袁润余
- 作品数：24 被引量：40H指数：4
- 供职机构：广东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒广东分离株的全基因克隆及序列分析被引量：6
- 2010年
- 本研究以一株2006年广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/HL/2006(H9N2)(简称Ck/GD/HL/06)为研究对象,用RT-PCR法扩增病毒基因组各片段(包括5′端和3′端的非编码区序列),将扩增片段进行克隆、测序并与参考毒株的相应序列进行比较分析,绘制各基因片段的系统发生树。分析结果表明,Ck/GD/HL/06株的HA基因同1997年中国香港鸭源毒株Dk/HK/Y280/97(H9N2)在同一进化分支,从HA的糖基化位点、受体结合位点等综合分析,该毒株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9亚型禽流感病毒的特点。HA的226位氨基酸残基为亮氨酸(Leu),具有同哺乳动物SAα,2-6受体结合的特性。Ck/GD/HL/06的PB1、PA和NP基因,同2004年越南分离的人源高致病性H5N1亚型流感病毒A/VietNam/1203/2004(H5N1)株(简写A/VN/1203/04)的核苷酸序列一致性分别是93.8%、95%和96.8%,在先前的研究中未见有类似特性毒株的报道,而这种特性H9N2亚型AIV的出现,是否会增加在重组过程中产生新的高致病性H5N1亚型AIV的可能性,是值得我们关注的一个问题,也提醒在我国华南地区应更加重视防控H9N2亚型AIV,做好长期对H9N2亚型AIV监控及分子流行病学调查的工作。
- 齐岩袁润余张贺楠亓文宝单芬胡玥李小康焦培荣廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型全基因
- 2006-2018年广东省By系流感病毒血凝素蛋白基因进化特点
- 目的分析2006-2018年广东省流行的By系流感病毒血凝素蛋白基因进化特点,部分阐明2017年冬季流感流行的病原学原因。方法采用时空抽样方法对2006-2018年广东省流行的By系流感病毒进行抽样、鉴定、分离和HA基因...
- 宋颖超袁润余武婕
- 关键词：血凝素蛋白基因进化
- 文献传递
- H5亚型禽流感病毒多肽疫苗的初步研制被引量：1
- 2008年
- 本试验利用生物软件对H5亚型禽流感病毒A/CK/GD/178/04的血凝素进行抗原特性分析,结合关于禽流感病毒血凝素抗原位点的文献报道,选定97～212位氨基酸和369～529位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域。利用本实验室自主研发的原核表达载体pBT载体,串联表达HA的两个区域,经SDS-PAGE和Western Blotting分析,证明重组产物得到表达,Ni2+柱纯化重组蛋白后,对2周龄SPF鸡进行免疫,经HI试验检测该重组蛋白可以刺激机体产生HI抗体。本研究为H5亚型AIV多肽疫苗的进一步研制奠定了基础。
- 柯艳坤齐岩叶贺佳张贺楠陈晓春李小康袁润余亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H5亚型HA多肽疫苗
- 鸭RIG-1基因的PCR扩增及其序列分析被引量：6
- 2012年
- 维甲酸诱导基因1(RIG-1)是细胞质中侦测病原相关分子模式的识别受体。论文旨在扩增北京鸭RIG-1编码基因,并对其进行序列分析。通过PCR方法,从北京鸭脾脏中扩增得到RIG-1基因cDNA,并使用LaserGene分子生物学分析软件进行序列分析。结果发现北京鸭的RIG-1基因cDNA开放阅读框全长2 802bp,编码933个氨基酸。结构预测发现鸭RIG-1结构与哺乳动物类似,N端有两个串联CARD区,中间为DExD/H解旋酶区,C端为抑制区,各功能区起重要作用的氨基酸较为保守。同源性及进化树分析发现鸭RIG-1与鹅和斑马鱼的同源性最高分别为93.7%、78.4%,与哺乳动物同源性高于50%,与其他鱼类的同源性低于50%。成功扩增出北京鸭RIG-1基因cDNA编码序列,为鸭RIG-1的深入研究奠定了基础。
- 程玉强焦培荣韦良孟钟自富廖顺娣袁润余贾宝琴罗开健廖明
- 关键词：聚合酶链反应天然免疫
- 禽流感病毒快速检测中的纳米磁珠分离器设计及试验被引量：2
- 2014年
- 为实现禽流感病毒快速检测中的纳米级免疫磁珠分离,该文设计了一种便携式环形六孔纳米磁珠分离器,通过瓦型钕铁硼永磁体的合理布局,采用高导磁率的坡莫合金制作导磁片并贴合离心试管外壁锥度,实现了满足试验要求的6个局部强磁场区域,实测分离器分离空间磁感应强度达1166.2 mT,最大磁场梯度达152.7 T/m。为考核磁分离器分离效率,分别开展了多点磁感应强度测量、磁珠分离效率初步观察、透射电镜辅助观察等定性试验,并从定性和定量角度分别采用灭活的禽流感H5N1病毒和大肠杆菌E.coli O157:H7,结合Dot-ELISA和平板菌落计数方法进行了30、100和180 nm磁珠分离效率考核试验。试验结果表明:对于30、100和180 nm磁珠,当分离时间分别大于等于60min、60和40s时,磁珠分离器对3种磁珠捕获效率均在96.5%以上,分离上清液中均无残留磁珠,磁分离系统稳定可靠。
- 刘洪山莫嘉嗣袁润余焦培荣罗锡文
- 关键词：病毒分离器禽流感磁感应强度
- 广东省2015年人感染H7N9禽流感病毒基因特征分析被引量：6
- 2017年
- 目的分析2015年广东省人感染H7N9禽流感病毒基因特征。方法对2015年1—12月送检广东省疾病预防控制中心的4份人感染H7N9禽流感病毒株进行病毒分离纯化并进行Ion Torrent高通量测序获得H7N9禽流感病毒全基因组8个基因片段。使用生物信息学软件将RNA序列与Gen Bank得到序列进行多重比对,并对病毒关键位点的分子变异情况进行分析,使用MEGA 7.0软件中最大似然法绘制遗传进化树进行基因进化分析。结果A/Guangdong/SZ17/2015(H7N9)、A/Guangdong/JM51/2015(H7N9)、A/Guangdong/ZH57/2015(H7N9)这3株人感染H7N9禽流感病毒的HA和NA基因与2014年广东省汕头、东莞等地的H7N9禽流感病毒进化距离最近,A/Guangdong/SW20/2015(H7N9)病毒的HA、NA基因与2014—2015年浙江温州、江苏淮安等地的H7N9禽流感病毒进化距离最近。ZH57病毒除NP基因与深圳H9N2亚型病毒高度同源(99.4%)以外,其余7个基因片段均与2013—2014年广东省内H7N9亚型禽流感毒株高度同源;其余3株病毒除HA和NA基因外,其余6个基因片段均与江西、安徽、江苏等地H9N2亚型病毒高度同源。分析相关致病位点得知,4株毒株中均出现可导致宿主特异性改变、病毒传播力、致病力、毒力及复制能力增强的位点突变,其中,4株病毒的HA蛋白受体结合区均发生G186V和Q226L这2个关键氨基酸位点的变异,对人呼吸道上皮细胞SAα-2,6Gal受体的结合能力增加,提示广东省H7N9禽流感病毒更容易感染人类。4株病毒的NA蛋白茎杆区69~73位氨基酸均出现缺失,这是禽流感病毒由野生水禽适应陆生家禽(鸡、鹌鹑等)的结果。4株病毒的M2蛋白均发生S31N突变,该突变会使流感病毒对M2离子通道抑制剂(金刚烷胺类药物)产生耐药性。所有毒株均保留了病毒对神经氨酸酶抑制剂的敏感性。结论 2015年广东省人感染H7N9病毒株具有遗传多样性及复杂性、致病力增强、对M2离子通道抑制剂的耐药性位
- 林慕蕾梁丽君宋颖超邹丽容武婕袁润余陆靖张欣柯昌文
- 关键词：基因特征
- H9N2亚型禽流感病毒广东分离株的全基因克隆及序列分析
- 本研究以一株2006年广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/HL/2006 (H9N2)(简称Ck/GD/HL/06)为研究对象,用RT-PCR法扩增病毒基因组各片段,将各扩增片段分别...
- 齐岩袁润余张贺楠谢杰单芬胡月李小康陈晓春赵丽荣廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2
- 文献传递
- 人源抗寨卡病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达
- 2019年
- 目的 利用噬菌体表面展示技术进行人源抗寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)噬菌体抗体库的构建及其基因工程单克隆抗体Fab段基因的获得和表达,掌握人源噬菌体抗体库的制备和针对特定病毒高度特异性的抗体筛选方法。方法 收集寨卡病毒病康复期患者的全血样本,分离淋巴细胞,采用RT-PCR方法成功地从淋巴细胞Ig mRNA中扩增出抗体轻链和重链Fab段基因,利用pComb3H系统成功构建具有基因多样性的人源抗ZIKV噬菌体抗体库制备。利用已纯化的ZIKV和已获得的ZIKV E蛋白抗原对已建立的抗体库进行富集筛选。结果 本研究成功地构建人源抗ZIKV噬菌体抗体库,并获得针对ZIKV E蛋白抗原的单克隆抗体Fab段基因,该基因能在大肠埃希菌中进行有效表达。结论 根据其序列分析研究表明,该单抗为一株新的抗ZIKV的人源基因工程抗体,这对建立ZIKV快速特异的早期诊断方法,获得特异性ZIKV人源治疗单抗奠定基础。
- 袁润余孙丽娜苏娟纪洵敏梁均和陈茂余梁米芳柯昌文
- 关键词：人源基因工程抗体噬菌体表面展示
- 引物对探针组合产品、试剂盒及其在检测肠道病毒中的应用
- 本发明涉及微生物检测技术领域，具体而言，涉及一种引物对探针组合产品、试剂盒及其在检测肠道病毒中的应用。本发明所提供的引物对探针组合产品可用于检测多种肠道病毒，具有灵敏度高，特异性强以及精准绝对定量的特点，可用于肠道病毒的...
- 袁润余柯昌文曾汉日苏娟周平平武婕陆靖
- 新型冠状病毒及其培养方法，以及新型冠状病毒灭活疫苗
- 本发明涉及疫苗领域，具体而言，涉及新型冠状病毒及其培养方法，以及新型冠状病毒灭活疫苗。该新型冠状病毒，其于2020年7月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:V202039，毒株名称为2019...
- 袁润余柯昌文周平平柯碧霞安文琪马小伟张海燕黎薇武婕
- 文献传递
