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凡纳滨对虾核自身抗原精子蛋白基因克隆及其表达: 2016年; 利用cDNA末端快速扩增技术克隆出凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)核自身抗原精子蛋白(NASP)基因,NASP基因c DNA全长2258 bp,其中包括92 bp 5′端非编码区,147 bp 3′端非编码区及2019 bp开放阅读区,编码673个氨基酸,预测分子量为74.18 k D。该序列已提交至Gen Bank,序列号为KT274811。在NCBI上进行序列比对后发现,其与斑节对虾(Penaeus monodon)NASP序列相似性最高,为90%。采用荧光定量PCR方法测定了不同发育时期卵巢与肝胰腺中NASP m RNA相对表达水平,结果表明,NASP在卵巢中的表达量高于肝胰腺中的表达量,且在Ⅱ期表达量最高,Ⅲ期表达量最低。此外,通过构建系统进化树比较了凡纳滨对虾NASP与其他物种间的遗传距离。实验结果为进一步研究该基因在凡纳滨对虾卵巢发育中的作用提供了依据。; 颜婕刘红方昱蔡生力; 关键词：凡纳滨对虾基因克隆荧光定量PCR

凡纳滨对虾卵黄蛋白原和血蓝蛋白mRNA在卵巢不同发育时期的半定量和实时荧光定量PCR分析: 2015年; 卵黄蛋白原和血蓝蛋白是凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)卵巢和/或肝胰腺合成的重要蛋白。利用半定量和荧光定量PCR技术分别检测了亲虾卵巢不同发育期卵黄蛋白原和血蓝蛋白mRNA在卵巢和肝胰腺的相对表达量。结果显示,卵黄蛋白原mRNA在卵巢和肝胰腺中均有表达,其相对表达量随着卵巢发育持续增加,在第五期达到最高,在恢复期迅速下降。根据卵巢和肝胰腺质量的综合计算,凡纳滨对虾的卵黄蛋白中,卵巢的贡献率占主导地位,约占80%,而肝胰腺仅为卵巢的四分之一。血蓝蛋白mRNA主要在肝胰腺中表达,随着卵巢的发育,表达量呈增加趋势,至第三期达到高峰,其后稍有下降,但仍然维持在较高水平,在第六期恢复到初始水平。血蓝蛋白是否直接或间接参与了卵黄发生和卵巢发育有待进一步探讨研究。; 方昱蔡生力刘红; 关键词：凡纳滨对虾卵巢卵黄蛋白原实时荧光定量PCR技术

切除眼柄对凡纳滨对虾/(Litopenaeus vannamei/)差异表达基因的影响及几种重要基因在不同卵黄发生阶段的表达量变化: 凡纳滨对虾/(Litopenaeus vannamei/)是我国主要养殖虾类之一。本实验利用抑制性消减杂交技术（SSH）构建了卵巢和肝胰腺在卵原细胞增殖期（第一期，切除眼柄前）与初级卵黄发生期（第三期，切除眼柄后）差异表...; 方昱; 关键词：凡纳滨对虾抑制性消减杂交卵黄蛋白原血蓝蛋白差异表达基因; 文献传递

凡纳滨对虾核自身抗原精子蛋白cDNA克隆及mRNA表达量分析: 核自身抗原精子蛋白基因是利用抑制消减杂交技术发现的与对虾卵黄发生相关的基因。本实验利用c DNA末端快速扩增技术克隆出凡纳滨对虾核自身抗原精子蛋白基因(NASP),NASP基因c DNA全长2258bp,其中开放阅读20...; 颜婕刘红方昱蔡生力; 关键词：凡纳滨对虾荧光定量PCR; 文献传递

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)卵黄发生前期与消退期卵巢和肝胰腺消减文库的初步构建及分析: 2013年; 利用抑制性消减杂交技术(SSH)分别对中国明对虾在卵黄发生的两个关键时期(卵黄发生前期和消退期)构建卵巢和肝胰腺的正反向消减文库,测序结果与GenBank进行BLASTx同源比较并利用GO分析进行功能注释。结果显示,各文库中的差异表达基因与卵巢发育时期相吻合,卵黄发生前期的卵巢和肝胰腺中分别检测到与卵黄蛋白原相关基因的出现,说明卵黄发生前期与卵黄发生有重要联系。在消退期中检测到与皮质棒形成相关的基因,说明消退期仍有皮质棒的形成,同时也检测到一些与免疫相关的基因,在机体中差异表达时期的功能有待进一步探讨。; 杨波刘红蔡生力方昱; 关键词：中国明对虾卵巢

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方昱