周茜
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 拟南芥转录因子TDF1的原核表达及多克隆抗体制备被引量:4
- 2010年
- 在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起到关键的作用.利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a.将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的TDF1融合蛋白.该融合蛋白主要以包涵体形式存在,分离出包涵体后进行可溶性处理作为抗原免疫家兔.制备出的多克隆抗血清经ELISA测定效价为1∶2560,Western blot检测表明该抗血清与TDF1融合蛋白识别良好.TDF1抗体的制备有助于进一步从生化水平上研究TDF1在花药发育中的功能.
- 周茜曹志林俞俞杨仲南
- 关键词:原核表达拟南芥转录因子融合蛋白多克隆抗体
- 拟南芥转录因子DYT1的原核表达与多克隆抗体制备被引量:5
- 2011年
- 以拟南芥雄性不育突变体ms157为材料,对其转录因子DYT1的原核表达进行了分析及多克隆抗体的制备.结果表明:构建的原核表达载体转化入BL21菌株后,经IPTG诱导,表达了分子量约为50 kD的重组蛋白.SDS-PAGE检测结果表明,该重组表达蛋白以可融性形式表达.用该蛋白作为抗原注射新西兰兔后,成功获取了多克隆抗体.Western blotting证实其具良好的免疫原性,ELISA结果表明融合蛋白的效价大于1∶5 120.
- 俞俞邢卫锋周茜
- 关键词:拟南芥转录因子原核表达多克隆抗体