刘一农
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省中医药管理局基金北京市科委基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 非胰岛素依赖型糖尿病小鼠模型KK/Upj-Ay/J的繁殖与保存方法
- KK/Upj-A
- 张晓娟田玉书刘志红沈洁刘一农
- PCR技术在转人肾素基因小鼠繁殖保存及育种中的应用
- 2000年
- 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ， Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）方法检测转基因小鼠繁殖及有种过程中外源基因的整合，筛选携带目的基因的阳性仔鼠。
- 沈洁张晓娟陈兰英田玉书蔡炯祝梅香秦川刘一农蔡有余
- 关键词：肾素基因小鼠阳性仔鼠PCR技术育种过程
- 21世纪的实验动物学——高新技术工程生物医学模型时代被引量：8
- 1998年
- “人类认识自我的过程就是遗传学发展的过程。遗传学是人类健康的关键；而比较医学就是推动人类健康研究的焦点学科，比较医学家将永远站在生物医学发展的基础线上……”——Ｄｒ．ＧｅｏｒｇｅＤａｖｉｅｓＳｎｅｌ（１９０３～１９９６）美国Ｊａｃｋｓｏｎ研究所教授诺...
- 刘一农
- 关键词：生物医学遗传学实验动物学医学家
- 全文增补中
- 人类线粒体转移方法初报被引量：2
- 1999年
- 将人肝脏匀浆、差速离心、等密度梯度离心纯化得到线粒体,通过显微注射法将其转移到小鼠的受精卵细胞质内,有61 % 的卵注射后存活,而存活的卵中53 % 能顺利完成第一次卵裂。
- 蔡炯沈洁王婷鞠丽梅刘一农
- 关键词：线粒体存活等密度注射胞质受精卵
- 关于实验动物学学科分类归属的意见被引量：11
- 1998年
- 关于实验动物学学科分类归属的意见方喜业邢瑞昌１刘一农２刘瑞三３刘德惠２（卫生部医学实验动物管理委员会，北京）二十一世纪将步入生命科学的新时代，生命、人脑、遗传工程是当代高新技术群体生物技术的重要内容。实验动物科学则是在现代科学带动下崛起的一门以生命科...
- 方喜业邢瑞昌刘一农刘瑞三刘德惠
- 关键词：实验动物学生命科学研究人脑生物学实验动物科学生物技术
- 全文增补中
- 小鼠线粒体DNA中一个新的R-loop结构的发现被引量：7
- 2003年
- 哺乳动物线粒体DNA的D-loop区是其复制和转录的起始区域,其中D-loop重链RNA(DH-RNA)与复制和转录功能密切相关,但轻链RNA(DL-RNA)被认为没有重要的功能,因此几乎没有有关D-loop区的轻链RNA的研究。文中研究发现一个DL-RNA存在于小鼠线粒体D-loop区。研究表明这个DL-RNA跨越了几乎整个D-loop区,并且能够耐受RNaseA和RNase T1酶的切割,但对RNase H酶敏感,在这种RNA存在的情况下,D-loop的DNA不能被HaeⅢ酶切割,这些结果意味着新发现的DL-RNA能同D-loop区的DNA形成三链结构,并且能使其对应区域的DNA不被限制性内切酶消化。在以细胞色素b基因为对照的实验中没有发现类似的结构,证明这一结构不是RNA转录过程中形成的临时结构。考虑到D-loop区是线粒体DNA复制和转录的重要调控区,这个新奇的三链RNA-DNA复合物可能在线粒体DNA复制和转录中扮演了重要角色。
- 黄朝峰张毅马润林刘一农
- 关键词：小鼠线粒体DNA基因复制基因转录D-LOOP区
- 苯引起小鼠骨髓细胞线粒体DNA D-环区突变的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨苯对小鼠骨髓细胞线粒体DNA(mtDNA)D-环(Displancement loop,D-Loop)区的影响。方法将30只雌性昆明种小鼠按白细胞(WBC)水平随机分为2组,每组15只,其中染苯组以2000mg/kg苯-花生油混悬液灌胃,每天1次,每周6d,连续2周;对照组灌胃给予花生油。染苯2周后,从中选取WBC降至4.0×109/L以下的10只作为苯中毒性WBC减少小鼠模型,进行骨髓细胞mtDNAD-Loop区突变检测。结果苯(2000mg/kg)灌胃小鼠2周后可使WBC降至4.0×109/L以下的小鼠骨髓细胞mtDNAD-Loop区碱基发生点突变、单碱基插入和缺失等突变,其中16020bp为C缺失突变多发位点,突变率达40%。结论苯可诱导小鼠骨髓细胞mtDNAD-Loop区发生突变。
- 蔡婷峰高彩凤李继霞刘运忠刘一农唐小江
- 关键词：苯白细胞线粒体DNAD-LOOP区突变
- 在小鼠发育过程中线粒体基因组新型R环的表达
- 2007年
- 本实验室在成年小鼠线粒体DNA(mtDNA)D环上发现了一个新颖的轻链RNA转录本,这个RNA能够同DNA双链结合,形成一个稳定的DNA-RNA杂合结构(R环)。在此基础上,利用RT-PCR和Northern印迹法检测了小鼠线粒体基因组中R环的时空表达的特点。发现R环在小鼠不同组织、不同发育阶段中的表达水平有差异,其表达模式具有分化的位相性和时序性,提示R环有可能作为参与调控线粒体基因表达的分子,因而具有重要意义。
- 李继霞李胜利孟霞刘一农王钜
- 关键词：线粒体线粒体DNA
- 转线粒体细胞模型被引量：1
- 2006年
- 转线粒体细胞模型是由无线粒体DNA(mtDNA)细胞与mtDNA供体通过融合的方法而形成的融合细胞。随着转线粒体技术的发展,制备该细胞模型的方法也多种多样。现今,转线粒体模型的应用十分广泛,不仅可应用于线粒体相关疾病的基础研究,而且在线粒体相关疾病的临床研究中也发挥了重要的作用。融合细胞具有一致的核背景,可以消除核基因的作用,因而有助于判断mtDNA突变的致病作用及机制和线粒体缺陷的致病作用及机制。此外,利用该模型还可作为探讨线粒体相关疾病基因治疗和筛选疾病治疗药物的有效模型。
- 李继霞刘一农王钜
- 关键词：线粒体线粒体DNA细胞模型融合细胞
- mtDNA A3243G点突变小鼠模型的建立及其致病机制探讨被引量：1
- 2008年
- 利用显微注射线粒体技术建立转人线粒体小鼠模型,研究外源突变mtDNA在不同组织的分布及遗传规律,探讨mtDNA A3243G点突变对线粒体功能的影响.从健康成人及2型糖尿病患者(携带mtDNA 3243A-G突变)血液标本中分离有活性的线粒体,将其显微注射至小鼠受精卵,胚胎移植,产出仔鼠后利用分子生物学方法检测人mtDNA及mtDNA A3243G点突变.获得嵌合体小鼠后,对其空腹血糖和全血乳酸进行测定,并使用荧光法和比色法分析A3243G点突变小鼠重要脏器组织细胞活性氧生成量(ROS)、线粒体复合酶Ⅰ和Ⅳ活力及线粒体ATP合成活力的变化.研究结果显示:在1只雌性(转健康人线粒体)和2只雄性小鼠(转患者线粒体)中检测到人mtDNA,其中2只雄性小鼠携带mtDNA 3243A-G突变;将嵌和体雌鼠与野生型C57BL/6J雄鼠交配后,在1只后代仔鼠中检测到人mtDNA;人mtDNA仅在嵌合小鼠的部分组织中表达.在含有mtDNA A3243G突变的组织中发现,线粒体复合酶Ⅰ、Ⅳ活力降低,ATP合成速率下降,ROS水平升高,说明A3243G点突变能损伤线粒体正常功能从而导致疾病的发生.综上所述,本研究利用显微注射法成功建立了嵌和小鼠,引入了致病性的点突变,为线粒体疾病的研究提供了良好的思路.
- 李继霞王钜刘一农
- 关键词：线粒体线粒体DNA显微注射
