李科 作品数:40 被引量:80 H指数:6 供职机构: 浙江省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家兔产业技术体系建设项目 国家自然科学基金 浙江省教育厅科研计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
兔支气管败血波氏杆菌外膜囊泡的制备及其蛋白质成分分析 被引量:1 2021年 本研究旨在确立兔波氏杆菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)最佳制备工艺。以兔波氏杆菌毒力较强菌株FX-1为研究对象,筛选出制备OMVs的最优方法,并对培养时间、抗生素添加量及过滤方法进行逐一优化。采用透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)等方法分析OMVs的理化性质;采用考马斯亮蓝法(Bradford法)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测OMVs的蛋白质含量及组分。试验结果显示,超滤浓缩法是制备兔波氏杆菌OMVs的较适方法,采用该方法的最佳培养时间、头孢氨苄质量浓度和过滤方法分别为18 h、64μg/mL和0.45μm滤膜过滤一次。制得的OMVs呈纳米级球形囊泡,平均直径为127.83 nm±0.68 nm。蛋白质分析结果表明,OMVs上包含多种与兔波氏杆菌毒力和感染机制有关的蛋白质。该制备工艺能够显著提高兔波氏杆菌OMVs的产量,为其工业化生产提供了可能;对其结构和蛋白质成分的分析,为研发新型亚单位疫苗提供了科学依据。 南黎 黄叶娥 肖琛闻 王志鹏 韦强 季权安 李科 刘燕 鲍国连关键词:支气管败血波氏杆菌 兔皮肤真菌病病原PCR快速诊断技术研究 被引量:3 2017年 兔皮肤真菌病近年来在我国各地流行严重,其病原菌靠传统的表型特征鉴定难以区分,本文从浙江、江苏等各地发病的21个兔场各品种兔中通过培养分离纯化出17株真菌,在培养特性等表型特征初步鉴定的基础上,进一步建立了PCR快速诊断技术,通过基因扩增和序列测定,能够正确作出鉴别诊断,分别鉴定出须癣毛癣菌10株、犬小孢子菌5株和趾间毛癣菌2株,其扩增的基因片段大小分别为692bp、741bp和708bp。 韦强 肖琛闻 季权安 刘燕 潘丽俊 李科 鲍国连关键词:真菌 PCR 一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途 本发明公开了一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途,该外膜蛋白为外膜蛋白PPP或外膜蛋白PL,所述外膜蛋白PPP包含:如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述外膜蛋白PL包含:如SEQ ID NO.2所示的核苷酸... 刘燕 鲍国连 韦强 肖琛闻 季权安 黄叶娥 李科文献传递 好氧反硝化细菌的筛选及培养条件的初步研究 被引量:10 2008年 通过涂布平板分离法从养殖水体污泥中共分离到12株好氧反硝化细菌,通过反硝化能力的测定,从中筛选出1株具有较强反硝化作用能力的菌株(D2),并以此为研究对象,进行最适培养基、生长温度及菌体浓度的测定。结果表明菌株D2的最适培养基为硝酸盐培养基,最适生长温度为37℃左右,在最适培养条件下最高生长浓度为4.2×105/mL。 吴美仙 张萍华 李莉 李科关键词:好氧反硝化细菌 反硝化作用 大肠杆菌噬菌体ZJRP5及其应用和杀菌剂、药物 本发明涉及病害防治领域,特别是涉及大肠杆菌噬菌体ZJRP5及其应用和杀菌剂、药物。本发明一株具有杀菌作用的大肠杆菌噬菌体ZJRP5,所述的大肠杆菌噬菌体ZJRP5的保藏编号为CCTCCNO.M202183。本发明所述大肠... 刘燕 鲍国连 王志鹏 黄盼 季权安 韦强 黄叶娥 崔雪梅 肖琛闻 李科霉变饲料诱发的大肠杆菌性腹泻的诊治 2017年 兔大肠杆菌病又称黏液性肠炎,是由致病性大肠杆菌及其毒素引起的一种肠道传染性疾病,死亡率高,以水样和胶冻样腹泻为特征[1]。该病不同的季节、不同年龄兔均可发病,除了气候等因素以外,家兔饲养管理,特别是饲料因素常常是引起该病的最大诱因,如饲料霉变、配比不当等,一旦发病常常导致大量兔子发病死亡,对断奶前后仔兔危害尤其严重,给养兔业造成严重的经济损失。 韦强 李科 肖琛闻 季权安 刘燕 何少杰 鲍国连关键词:兔大肠杆菌病 黏液性肠炎 霉变饲料 大肠杆菌性 饲料霉变 兔子宫内膜炎型巴氏杆菌病的诊治 被引量:1 2018年 兔巴氏杆菌病常见的是以呼吸道症状为主,主要为上呼吸道卡他性炎症,表现为流出鼻涕,打喷嚏、咳嗽,严重时流脓性鼻液,鼻孔堵塞,呼吸困难,最后呼吸衰竭而死亡。但也有其他症状的病例,因此临床上根据表现的症状不同,分为以下几种类型:全身败血症、鼻炎与肺炎型、中耳炎型、子宫内膜炎型、眼结膜炎型等。而其中的子宫内膜炎型,临床上罕见,笔者从业30多年. 韦强 肖琛闻 刘燕 季权安 李科 鲍国连关键词:兔巴氏杆菌病 子宫内膜炎 呼吸道症状 诊治 眼结膜炎 兔流行性腹胀病病原分离鉴定与防治 2021年 为了有效控制家兔流行性腹胀病的蔓延,结合流行病学调查和实验室鉴别诊断技术,对112例40~90日龄患病兔病样开展病原检测,其中,分离鉴定出大肠埃希菌(Escherichia coli)的有78例,分离鉴定出魏氏梭菌(Clostridium welchii)的有69例。致病性试验表明,这两大分离菌为兔流行性腹胀病的主要致病菌。在3个常发病兔场开展溶菌酶临床防治试验。结果显示,无论是预防试验中的发病率,还是治疗试验中的病死率,溶菌酶处理组均比对照组低50多个百分点,表明溶菌酶对该病的防治效果明显,能有效遏制病情蔓延,可作为当前替代抗生素的首选药物。研究结果为兔流行性腹胀病的防治提供了科学依据。 季权安 刘燕 肖琛闻 黄叶娥 李科 韦强 鲍国连关键词:细菌分离 溶菌酶 兔波氏杆菌LAMP检测用引物组、检测试剂盒和检测方法 本发明涉及家畜细菌病的诊断技术领域,尤其涉及兔波氏杆菌LAMP检测的引物组、检测试剂盒和检测方法。兔波氏杆菌LAMP检测的引物组,外引物组1如SEQ ID NO.1所示,外引物组2如SEQ ID NO.2所示,内引物组1... 刘燕 鲍国连 李科 韦强 肖琛闻 季权安文献传递 兔多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增检测方法的建立 被引量:8 2013年 为建立一种快速、准确地检测兔多杀性巴氏杆菌(Pm)的环介导等温扩增(LAMP)方法,本研究利用设计的4条特异性引物,在链置换DNA聚合酶的作用下,优化反应条件,并进行特异性和敏感性试验。结果表明,建立的LAMP扩增反应可以在70 min内完成;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的10倍,最低可以检测量为16 cfu的DNA;采用建立的LAMP方法对27份经PCR检测Pm阳性的样品进行检测,结果均呈阳性。该方法的建立为Pm在临床上的快速检测提供了一种新的技术手段。 李科 刘燕 韦强 肖琛闻 季权安 鲍国连关键词:兔多杀性巴氏杆菌 PCR