温茂荣
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 长链胰岛素样生长因子1在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析被引量：4
- 2008年
- 目的:在毕赤酵母KM71中分泌表达长链-Arg3-胰岛素样生长因子1(LR3IGF-1),并探讨其体外生物活性。方法:人工合成LR3IGF-1基因,构建表达载体pCαA-LR3IGF-1,转化毕赤酵母KM71。筛选重组工程菌株,经诱导表达并从上清中纯化目的蛋白,鉴定其生物活性。结果:诱导上清中存在一8×103左右的条带,经初步鉴定为目的蛋白条带。每升培养基经纯化后能得到40 mg目的蛋白。纯化后的目的蛋白具有明显的体外刺激NIH 3T3细胞增殖的作用。结论:建立了LR3IGF-1在毕赤酵母KM71中表达及纯化方法,该方法能获得具有生物学活性的高纯度LR3IGF-1,为LR3IGF-1的后续研究及临床应用奠定了基础。
- 温茂荣高新张倩赵茂俊宋海峰
- 关键词：胰岛素样生长因子1毕赤酵母细胞增殖
- 长链胰岛素样生长因子1（LR~3IGF1）在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析
- 人的胰岛素样生长因子1/(huIGF-1/)是类似于胰岛素原的单链多肽激素。其调节多种细胞的生长及分化。与胰岛素不同的是huIGF-1可由人体多种组织产生,循环过程中也保持了相对高的浓度。它的缺乏会导致多种严重的疾病。因...
- 温茂荣
- 关键词：毕赤酵母
- 文献传递
- 靶向人乙型肝炎病毒siRNA的构效关系研究被引量：1
- 2008年
- 目的:在体外模型HepG2.2.15细胞中研究靶向人乙型肝炎病毒(HBV)小分子干扰RNA(siRNA)的构效关系。方法:靶向HBV基因不同位置合成21条siRNA,分析多条siRNA在HBV 8个基因型(共120条序列)中的保守性情况以及siRNA的二级结构特点。利用乙肝表面抗原(HBsAg)ELISA定量方法与荧光定量PCR方法检测siRNA在不同浓度下(1,10,100 nmoL/L)对HepG2.2.15细胞中乙肝病毒HBsAg和mRNA表达的抑制情况。SPSS进行定量构效关系(QSAR)分析。结果:半数(13/21)的siRNA以浓度依赖模式抑制靶基因的表达(P<0.05)。其中537,672,1263,1658等序列活性显著高于阳性对照序列。QSAR分析显示siRNA基因型同源性(P<0.01)、S/P和X区(P<0.05)与siRNA活性有紧密关系;重叠基因[S/P/前基因组(pregenome)mRNA]区域局部靶mRNA二级结构保守性、发卡环、多茎环和茎的碱基数目与siRNA活性相关(R=0.994,P=0.009)。结论:siRNA的靶点序列、siRNA本身的一级序列与二级结构对其抑制靶基因的活性有显著影响,具有明显的构效关系。优选siRNA可能作为治疗多基因型乙肝感染的候选序列。
- 付洁汤仲明高新赵帆钟辉李鹏温茂荣孙效宋海峰钱小红
- 关键词：定量构效关系重叠基因
