目的:本次研究通过检测类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞亚群比例及其分泌促炎细胞因子的功能,探讨单核细胞亚群在RA发病过程中的作用。方法:22例RA患者(RA组)和22例健康对照者(HC组),经知情同意后抽取3ml静脉血,肝素钠抗凝。流式细胞术(FCM)检测单核细胞亚群比例、中间型单核细胞表面HLA-DR、Toll样受体2(TLR2)和髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达,及其细胞内肿瘤坏死因子(TNF)-α平均荧光强度(MFI),并分析RA患者单核细胞亚群比例与血清细胞因子的相关性。正态数据分析采用Students't-test检验。结果:与HC组相比,RA组中间型单核细胞比例升高[(4.6±1.2)%vs(11.7±1.6)%],差异有统计学意义(P<0.05);HLA-DR表达(MFI)与HC组比较差异无统计学意义(26.8±8.6 vs 30.2±6.1,P>0.05)。RA组TLR2(750.2±110.3 vs 526.8±98.6)、TREM-1(58.4±12.1 vs 40.3±10.2)表达(MFI)高于HC组,差异均有统计学意义(P<0.05);RA组中间型单核细胞胞内TNF-α(46.3±6.4 vs 36.7±8.3)MFI高于HC组,差异有统计学意义(P<0.05)。RA患者中间型单核细胞比例与DAS28评分和血清TNF-α、白细胞介素(IL)-17呈正相关,相关系数分别为0.593(P=0.003)、0.471(P=0.027)和0.538(P=0.009)。结论:RA患者外周血单核细胞向中间型极化,并处于活化状态,高表达TLR2和TREM-1,分泌较多的促炎细胞因子TNF-α,参与RA的疾病过程。因此,抑制单核细胞向中间型极化或阻断表面受体表达可能是治疗RA的新途径。
目的:研究带有蛋白穿膜结构域的小鼠Foxp3融合蛋白(mouse Foxp3 fusin protein combining with transduc-tion domain,PTD-mFoxp3)对小鼠脾淋巴细胞活化增殖能力和皮肤移植排斥反应的影响。方法:取健康C57BL/6小鼠脾淋巴细胞,在体外经刀豆蛋白A(concanavaline A,ConA)活化,并分别给予环孢素A(cyclosporine,CsA)、不同浓度的PTD-mFoxp3,mFoxp3,PTD-GFP和培养基处理,检测脾淋巴细胞增殖指数。在此基础上进行从Balb/c小鼠到C57BL/6小鼠的皮肤移植试验,将40只C57BL/6受体小鼠随机分为4组,每组10只,分别以PTD-mFoxp3,CsA,0.9%氯化钠注射液(NS),PTD-GFP于手术当天开始连续腹腔注射8天为干预手段。术后第9天各组随机取2只移植小鼠,采集皮片标本,进行组织学检查。其余的8只用于观察移植皮瓣的存活时间。结果:PTD-mFoxp3和CsA相似,与其他处理方法相比明显抑制ConA活化的小鼠脾淋巴细胞增殖指数(P<0.05)。PTD-mFoxp3组,CsA组移植物的存活时间较各对照组显著延长(P<0.05);病理检查显示PTD-mFoxp3组和CsA组移植物淋巴细胞浸润明显轻于各对照组。结论:PTD-mFoxp3能抑制ConA活化的T淋巴细胞的增殖,且具有抑制小鼠皮肤移植排斥反应的作用。
