吴娇娇
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 微生物脂肪酶基因的克隆与表达
- 本文通过分子生物学手段克隆了粘质沙雷氏菌/(Serratia marcescens/) ECU1010脂肪酶新基因lipB,并对其进行了可溶性表达优化,研究了该重组脂肪酶的发酵、纯化手段与相关酶学性质。此外,本文克隆了7...
- 吴娇娇
- 关键词：粘质沙雷氏菌脂肪酶克隆表达棒曲霉
- 文献传递
- 黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶新基因lipB的克隆和表达被引量：2
- 2011年
- 目的克隆黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶基因lipB于大肠杆菌中表达后研究其酶学性质。方法 PCR克隆脂肪酶基因,与质粒pET-28a（＋）连接后转化至大肠杆菌BL21（DE3）。硫酸铵沉淀法纯化表达产物,研究酶的稳定性等酶学性质。结果成功克隆了S.marcescens ECU1010中脂肪酶基因lipB（GenBank：HM440338）,在E.coli中高效表达。LipB最适反应温度40℃,最适pH 8.5。该酶能在pH 5-7条件下保持稳定,Ca2＋有促进酶活性的作用。LipB对不同有机溶剂的耐受性与黏质沙雷菌脂肪酶LipA有明显差异。结论 lipB基因克隆丰富了脂肪酶基因资源,分析LipB的酶学性质表明,此酶在食品工业和手性药物的拆分等领域有广阔的应用前景。
- 吴娇娇李素霞赵健范立强许建和
- 关键词：黏质沙雷菌脂肪酶克隆
- 正交试验优化黏质沙雷菌脂肪酶包涵体复性条件被引量：3
- 2010年
- 目的优化黏质沙雷菌脂肪酶复性条件。方法采用正交试验研究影响脂肪酶复性的关键因素,包括复性液的离子强度、pH、复性温度和复性液尿素浓度;进一步优化筛选出的关键因素。结果最佳复性液组成为20 mmol/L Tris-HCl(pH7.0),1 mmol/L Ca2+,复性液中尿素浓度0.8 mol/L,复性温度30℃。复性12 h后脂肪酶活性可达3 500 U/L。结论影响脂肪酶复性的关键性因素为复性液pH及离子强度。Ca2+可以促进脂肪酶复性。
- 庞怀宇吴娇娇李素霞许建和赵健范立强
- 关键词：脂肪酶复性正交试验
