目的:建立了同时测定大鼠血浆中来那度胺、伏立诺他和地塞米松的液相色谱-质谱联用(liquid chromatography mass spectrometry,LC-MS)方法,并应用于大鼠药代动力学研究。方法:色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为5 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液-乙腈;采用梯度洗脱;体积流量0.6 mL/min;柱温35℃;进样量为5μL;采用电喷雾离子源正离子模式(ESI~+),多反应监测进行测定。结果:来那度胺、伏立诺他和地塞米松在各自的浓度范围内检测值与浓度均具有良好的线性关系(R~2≥0.995),三成分的日内和日间精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)值均小于7.4%,准确度为94.7%~106.7%,基质效应均在92.3%~109.7%可接受范围内,平均提取回收率为87.4%~103.6%,满足测定的要求。结论:经方法学验证,该方法可同时测定来那度胺、伏立诺他和地塞米松的血药浓度,快速、经济,为药物研究提供了重要的分析手段。