沈维祥
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：上海市浦东新区科技发展基金上海市科学技术委员会科研基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 幽门螺杆菌感染首诊个性化诊疗:首战即决战被引量：7
- 2022年
- 随着大规模根除治疗的推进,导致幽门螺杆菌(H.pylori)耐药率不断升高,加上宿主CYP2C19基因多态性、H.pylori球形变、患者依从性、医生治疗方案不正规或经验式反复根除治疗等因素,H.pylori根除率逐渐下降。个性化治疗是实现H.pylori感染者首诊成功得以根除的有效措施。随着克拉霉素耐药分子诊断试剂盒在我国首次获批与美国胃肠病协会(AGA)有关难治性H.pylori感染定义更新,遵循国际最新共识与指南、符合国情、赶超国际水平的基于耐药基因检测的H.pylori首诊个性化诊疗走向前台。
- 郜恒骏钟子劭闫利娟张小燕沈维祥
- 关键词：幽门螺杆菌个性化治疗细菌耐药
- 基于突变阻滞扩增系统的实时荧光PCR技术检测幽门螺杆菌23S rRNA基因突变及其评价被引量：3
- 2017年
- 目的探索突变阻滞扩增系统(ARMS)联合实时荧光PCR技术用于检测幽门螺杆菌23S rRNA基因突变的可行性。方法以幽门螺杆菌23S rRNA基因2143位点的两种基因型(野生型为AAA,突变型为AGA)质粒DNA为研究模型,设计ARMS引物同时对实时荧光PCR体系进行优化,对突变阻滞扩增系统联合实时荧光PCR技术的基因分型特异性进行评价。结果在与模板匹配的ARMS引物3'端附近故意引入错配碱基,降低该ARMS引物浓度和镁离子浓度,并采用两步PCR循环的反应程序,使ARMS引物的特异性增强,能够得到清晰的基因分型结果。结论这种基于突变阻滞扩增系统的实时荧光PCR技术,实验设计简便,特异性较好,并有望在此基础上发展成为适合临床应用的突变检测方法。
- 沈维祥陈春峰张小燕郜恒骏
- 关键词：基因突变
- 2019新型冠状病毒核酸检测试剂盒的研发与应用被引量：3
- 2020年
- 目的评价自主研发的针对2019新型冠状病毒的多重核酸检测试剂的性能指标及临床验证。方法通过测试本试剂盒的准确性、灵敏度、特异性、精密度等指标,评估研发试剂盒的性能指标;同时,在临床单位收集60例临床样本,统计本试剂盒对临床样本中2019新型冠状病毒的检出结果,并与诊疗指南推荐的确诊/排除方法的结果进行比较,评估试剂在临床检验中的适用性。结果新研制的试剂盒各性能指标均符合要求:阳性符合率和阴性符合率均为100%,对各阳性参考品和阴性参考品能够准确检出;灵敏度测试经过确认和验证过程确定本试剂盒的最低检测限浓度为350copies/ml;特异性测试显示对具有潜在交叉可能的病原体和具有潜在干扰作用的药物进行测试,检出结果均正常,未受到交叉病原体和干扰物质的影响,特异性良好;精密度测试结果符合要求,批内精密度和批间精密度均<5%;对60例临床样本进行检测,与参比方法相比,灵敏度为95%(19/20),特异性为100%(41/40),经分析和参比方法检出结果差异不显著(P> 0.05)。结论建立的2019新型冠状病毒核酸检测试剂盒达到国内临床诊断试剂所要求的主要性能指标,可以满足临床样本的检测,是一种快速、准确的检测方法,可应用于临床。
- 孟影陈春峰张小燕沈维祥郜恒骏
- 关键词：荧光PCR
- TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌gyrA基因第87位密码子和第91位密码子耐药突变被引量：1
- 2017年
- 目的采用TaqM an-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子突变情况,比较与药敏试验和一代测序法的一致性。方法收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者252例,所有患者均使用MGB荧光探针法和一代测序法对喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子进行检测。其中158例患者同时进行药敏试验检测,同时分析耐药位点突变发生率与耐药表型的关系。结果 158例传统培养联合药敏法检测的标本中成功培养出85例,占53.8%,其中耐药型菌株40例,敏感型菌株42例。而MGB荧光探针法成功检出155例,占98.1%,其中野生型93例,突变型62例。在药敏试验检测出的85例阳性标本中,两种方法检出的符合率为94.1%。252例标本中,一代测序法成功检测出234例,占92.9%,其中野生型160例,突变型74例。在74例突变型标本中,含gyr A基因第87位密码子突变的标本占60.8%,含gyr A基因第91位密码子突变的标本占39.2%。MGB荧光探针法成功检测出250例,占99.2%,其中野生型161例,突变型89例。在89例突变组标本中,含gyr A基因第87位密码子突变的标本占64.0%,含gyr A基因第91位密码子突变的标本占36.0%。一代测序法和MGB荧光探针法在区分是否含有突变上的符合率为95.3%。结论 Taq Man-MGB荧光探针法可快速、敏感地检测患者胃黏膜标本中幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子的突变情况,与药敏试验和一代测序法有较高的符合性。
- 沈维祥胡泽斌陈春峰张小燕成虹郜恒骏
- 关键词：幽门螺杆菌喹诺酮类耐药
