杜新凯
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 棉铃虫甾醇载体蛋白2原核表达及纯化
- 2017年
- 甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫体内甾醇吸收及运输过程中有着重要的生理功能。试验构建重组表达质粒pET-22b/HaSCP2,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,并对IPTG浓度、诱导时间及温度进行优化,经Ni柱分离纯化后分析其与胆固醇结合活性。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白相对分子质量约为16 ku,且在25℃,IPTG终浓度0.2 mmol·L^(-1)下诱导10 h为最佳诱导表达条件。经荧光探针8-苯胺-1-萘磺酸(1,8-ANS)竞争分析,胆固醇与HaSCP-2结合半数有效浓度(EC50)为29.03μmol·L^(-1)。该研究为深入研究棉铃虫SCP-2的功能以及后续HaSCP-2抑制剂的筛选研究奠定了基础。
- 杜新凯任娟胡珺王常高林建国蔡俊杜馨
- 关键词：棉铃虫原核表达
- 一种棉铃虫甾醇载体蛋白2抑制剂及其虚拟筛选方法
- 本发明属于农业生物技术领域，涉及一类甾醇载体蛋白2（SCP‑2）小分子抑制剂虚拟筛选方法的建立。本方法根据棉铃虫甾醇载体蛋白2（SCP‑2）的结构数据，分析关键氨基酸残基，确定结合口袋；再利用分子对接软件筛选打分并计算结...
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- 文献传递
- 产脂肪酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化被引量：11
- 2016年
- 以橄榄油为唯一碳源,采用油脂同化平板从食堂废弃物中筛选出一株产脂肪酶菌株HFE722。通过测定与分析该菌株16S rRNA基因序列,鉴定该菌株为芽孢杆菌(Bacillussp.)。菌株HFE722在初始条件(发酵温度30℃,接种量为1%,自然pH,装液量为100 mL/250 mL,摇床转速为200 r/min)下培养36 h,测得发酵液上清液脂肪酶酶活为2.17 U/mL。优化后所得菌株HFE722产酶的最适发酵条件为:发酵温度30℃,发酵周期为36 h,接种量为1%(V/V),初始pH 7.0,装液量为50 mL/250 mL,摇床转速为160 r/min。在最佳发酵条件下,发酵液上清液酶活可达到5.8 U/mL,酶活较优化前提高了167.28%。
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- 关键词：脂肪酶发酵条件优化
- 棉铃虫甾醇载体蛋白2抑制剂的高通量筛选
- 农业害虫对杀虫剂抗性的持续增加，严重威胁着农业可持续发展和人类生存。寻找新靶标，研制开发高效低毒环境友好型的新型农药是害虫防治重要急迫的研究任务。 胆固醇是昆虫细胞膜的结构组分和蜕皮激素合成前体，然而昆虫自身并不能合成...
- 杜新凯
- 关键词：抑制剂高通量筛选棉铃虫
- 文献传递
- 一种棉铃虫甾醇载体蛋白2抑制剂及其虚拟筛选方法
- 本发明属于农业生物技术领域，涉及一类甾醇载体蛋白2（SCP‑2）小分子抑制剂虚拟筛选方法的建立。本方法根据棉铃虫甾醇载体蛋白2（SCP‑2）的结构数据，分析关键氨基酸残基，确定结合口袋；再利用分子对接软件筛选打分并计算结...
- 蔡俊杜新凯杜馨王常高林建国
