张智红
- 作品数:2 被引量:9H指数:2
- 供职机构:华中理工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 用基因标记技术实时观察中性粒细胞吞噬病原体被引量:5
- 2000年
- 目的 试图建立一种快速、直接判断中性粒细胞的吞噬、杀菌功能的标准方法 ,并对该方法进行分析与评价。方法 将带有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的PRSETB质粒转化为大肠埃希菌BL2 1 ,利用BL2 1 高效表达GFP后发出强烈绿色荧光的特点 ,用电荷耦合器件 (CCD)耦合荧光显微镜连续记录中性粒细胞对大肠埃希菌粘附、内吞、消化和残体外排的全过程。结果 粘附过程 :BL2 1 在中性粒细胞膜表面停顿约 1 5s(1 5 0± 0 15s) ,为抗原识别过程 ;内吞过程 :中性粒细胞膜内陷、伸出伪足将大肠埃希菌包裹 ,并向细胞中心移动 ,持续时间可达 132s(132± 14s) ;消化过程 :当大肠埃希菌进入中性粒细胞胞体后 ,其杆状体逐渐变短 ,GFP发出的荧光强度逐渐变弱 ,持续时间约为 35 0s(35 0± 32s) ;残体外排过程 :可观察到溶酶体残体由中性粒细胞中心向胞膜运动 ,最后排出 ,持续时间约为 140s(140± 2 7s)。结论 该方法利用光子学显像和基因标记相结合的技术可以实时、连续观察中性粒细胞对大肠埃希菌的吞噬杀菌过程 ,对临床治疗有重要意义。
- 陈卫国洪志刚何冬红张智红曾绍群
- 关键词:中性粒细胞大肠埃希菌GFP
- 基于GFP的FRET应用被引量:4
- 2002年
- 绿色荧光蛋白(GFP)是一种活体荧光标记,已被用来研究基因表达、分子定位、蛋白质折叠和转运;荧光共振能量转移(FRET)是一种无损伤的光学检测方法,能检测到小干纳米的距离变化。将GFP的活体定位标记功能与FRET的高分辨率相结合,为活体研究生物分子的功能和命运开创了新的篇章。作者在介绍 GFP和 FRET原理的基础上;综述了基于 GFP的 FRET在蛋白酶活性、蛋白质间相互作用和构象改变研究中的应用。
- 周炜曾绍群张智红陈同生骆清铭
- 关键词:绿色荧光蛋白荧光共振能量转移构象蛋白质相互作用GFPFRET