叶庆 作品数:63 被引量:207 H指数:8 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 武汉市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 理学 更多>>
去唾液酸糖蛋白受体单链抗体靶向蜂毒肽的体外抑瘤效应研究 被引量:1 2006年 目的探讨抗去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)单链抗体C1与蜂毒肽(Melittin)重组蛋白C1M靶向抑制肝癌细胞的效果。方法将含C1M/pGC的XL1-Blue转化菌通过IPTG诱导表达。表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,免疫组织化学技术分析重组蛋白C1M的抗原结合能力,四氮唑盐(MTT)法检测C1M对肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用。结果原核表达质粒C1M/pGC在XL1-Blue中获得有效表达;表达产物以可溶性形式存在;纯化的C1M相对分子量为29.4×103;免疫组化结果表明C1M能有效识别去唾液酸糖蛋白受体,与HepG2(C1M)共培养3d,细胞生长抑制率达92.0%。结论在大肠埃希菌中成功表达C1M,位于C端的Melittin蜂毒肽能有效抑制肿瘤细胞的生长,为体内研究Melittin的靶向抗肝癌效果奠定了基础。 曹利民 赵晓蓉 叶庆 雷萍 吴砂 代维 朱慧芬 朱荫昌 司进 沈关心关键词:蜂毒肽 重组免疫毒素 单链抗体 24例过敏性肺炎的临床、影像学及病理分析 被引量:9 2014年 目的提高临床医生对过敏性肺炎的临床、影像学及病理特点的认识。方法回顾性分析南京大学医学院附属鼓楼医院2005年2月至2013年2月诊治的24例过敏性肺炎患者的临床资料,总结其临床、影像学及病理特征。结果 24例患者中男15例,女9例;平均年龄(48±13)岁;急性2例,亚急性17例,慢性5例。主要的临床症状为呼吸困难、咳嗽、咳痰、发热、体重减轻,血气分析示低氧血症,肺功能检查显示限制性通气功能障碍及弥散功能障碍。胸部高分辨率CT主要表现为双肺弥漫性磨玻璃影、斑片影、小叶中心性结节影、马赛克征和网格影或伴蜂窝肺。支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类示肺泡淋巴细胞增加,经支气管镜肺活检(TBLB)病理表现为淋巴细胞浸润为主的肺泡炎、非干酪性坏死性肉芽肿及间质性肺炎。所有病例避免抗原暴露及经糖皮质激素治疗后症状明显缓解,胸部影像学改变明显好转。结论过敏性肺炎诊断困难,大部分病例(急性、亚急性)根据相关抗原的暴露、影像学、BALF的细胞学改变及TBLB病理检查作出诊断。对于不典型病例(慢性),需要进行外科肺活检而做出临床-影像学-病理的综合诊断。 邱玉英 陈露露 王永生 陈慧芬 蔡后荣 肖永龙 叶庆 孟凡青 冯安宁关键词:过敏性肺泡炎 间质性肺疾病 建立肿瘤血管生成抑制剂的体外筛选方法 2009年 以Avastin为阳性药,建立稳定、客观的肿瘤血管生成抑制剂的体外评价体系。用CCK-8检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖情况;荧光定量的Boyden小室法检验HUVECs的迁移能力;荧光定量分析HUVECs对纤维蛋白的粘附能力;运用图象分析软件Image-Pro Plus定量分析HUVECs的小管形成行为的图像。结果表明,在该体系中,Avastin能够抑制VEGF诱导的HUVECs与血管生成相关的生物学行为。该体系具有操作简单、可重复性好、易量化的特点,是一种在体外筛选肿瘤血管生成抑制剂的理想模型。 李惠 叶庆 李运曼关键词:血管生成因子 老年人乙醛脱氢酶2基因多态性与高血压病的关系 被引量:3 2012年 目的:探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与老年高血压病的关系。方法:111例老年人分为高血压病组(80例)与非高血压对照组(31例),对比两组间ALDH2基因多态性。利用DNA微阵列芯片法检测ALDH212号外显子上基因的G to A突变(导致第504位氨基酸Glu被Lys取代)。结果:本研究检测出三种ALDH2基因型,包括ALDH2野生型(ALDH2*1/*1),ALDH2突变杂合型(ALDH2*1/*2),ALDH2突变纯合子型(ALDH2*2/*2)。与非高血压对照组相比,高血压病组的野生型,ALDH2*1等位基因(54.8%比66.3%,74.2%比82.5%)比例增多,但差异无显著性,而突变型、ALDH2*2等位基因比例减少(45.2%比33.8%,25.8%比17.5%),差异亦无显著性(P均>0.05);高血压组男性亚组的野生型、ALDH2*1等位基因比例增多(54.2%比67.2%,72.9%比83.6%),差异亦无显著性(P>0.05)。结论:乙醛脱氢酶2基因多态性与老年人高血压病可能不相关。 冯 王春 叶庆 尹震宇 郭爱斌 黄明敏 杨海燕 陈晓琳关键词:高血压 基因 老年人 乙醛脱氢酶2 ASGPR单链抗体-蜂毒肽融合蛋白的构建及其溶红细胞效应 被引量:1 2007年 去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是一种异源低聚物的内吞受体,定位于肝脏实质细胞朝向窦状隙一侧的细胞膜表面,在介导肝脏疾病靶向治疗方面具有潜在应用价值。我们在获得抗ASGPR单链抗体CI的基础上, 曹利民 朱慧芬 赵晓蓉 叶庆 吴砂 李文涵 赵晓萍 朱荫昌 司进 沈关心关键词:单链抗体 细胞效应 融合蛋白 去唾液酸糖蛋白受体 蜂毒肽 肝脏疾病 尿脱落细胞荧光原位杂交检测对尿路上皮癌的诊断价值及漏诊原因分析 被引量:8 2011年 目的研究荧光原位杂交(FISH)检测尿脱落细胞9p21和3、7、17号染色体数目变化,协助尿路上皮癌诊断和术后监测的特异度和敏感度,并分析和研究造成漏诊的原因。方法检测尿脱落细胞染色体数目变化,并做病理活检;以病理检查结果为金标准评价该检测的特异度和敏感度。漏诊病例的癌组织行FISH检测,并复查尿脱落细胞滴片,分析漏诊原因。结果 100例样本中,35例尿路上皮癌中28例FISH阳性,敏感度为80%;65例非肿瘤中65例FISH阴性,特异度为100%。28例高级别尿路上皮癌3例漏诊,敏感度为89.29%,其癌组织均存在与尿路上皮癌相关的非整倍体,其滴片中尿脱落细胞均少但均未见存在与尿路上皮癌相关的非整倍体。7例低级别尿路上皮癌4例漏诊,敏感度为42.86%,其中2例癌组织仅少量癌细胞存在与尿路上皮癌相关的非整倍体,2例未见上述异常;其滴片中尿脱落细胞2例细胞数少但均未见与尿路上皮癌相关的非整倍体。结论用FISH检测尿脱落细胞上是否存在9p21和3、7、17号染色体与尿路上皮癌相关的非整倍体,具有较高的敏感性和特异性,可用于辅助尿路上皮癌诊断和术后监测。该检测对于高级别尿路上皮癌更敏感。自然尿中尿脱落细胞较少是导致该检测漏诊的主要原因;对于低级别尿路上皮癌,缺乏与尿路上皮癌相关的遗传学异常是导致该检测漏诊的主要原因。 叶庆 王志华 杨军 曲锋 孟凡青关键词:尿脱落细胞 尿路上皮癌 荧光原位杂交 特异度 漏诊 一种基于医院场景识别的电子签章自动推荐方法 本发明的目的是提供一种基于医院场景识别的电子签章自动推荐方法,该方法包括:采用管理者私钥将业务操作信息加密得到业务操作数据块;将业务操作数据块上传至区块链;通过哈希算法将业务操作信息中的场景数据处理得到场景摘要,将所述场... 聂丽丽 汪火明 周莉莉 陈勇飞 叶庆 沈桐B-CLL患者瘤细胞膜表面Id-ScFv和人Hsp70的制备及其抗瘤效应 2008年 背景与目的:恶性B型淋巴细胞表面免疫球蛋白(surface membrane immunoglobulin,SmIg)表达的独特型决定簇(Idiotypic determinant,Id)不仅是该类肿瘤特异性标记,也是该类肿瘤的特异性抗原,可诱导机体对其产生特异性免疫应答,但由于Id是自体成分,分子量小,免疫原性较弱。人热休克蛋白70(heat shock protein,Hsp70)是一类重要的抗原提呈分子,能有效加强抗原肽的免疫原性。本研究通过制备慢性B型淋巴细胞性白血病(B-cell chronic lymphatic leukemia,B-CLL)患者瘤细胞膜表面独特型单链抗体(Idiotypic determinant single-chain antibody,Id-ScFv)和Hsp70两种蛋白,在体外研究两者联合抗瘤作用并初步探讨其机制。方法:分别在大肠杆菌中表达Id-ScFv和Hsp70两种蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis)及ELISA(enzyme-linked immunosorbentassay)检测鉴定后,分别用金属螯合层析和离子交换层析纯化并在体外将这两种蛋白结合成复合物(Hsp70-Id)。用MTT法及检测Id-ScFv组、人Hsp70组及Hsp70-Id组刺激外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖作用,以ELISA法检测各组培养上清中IL-12和TNF-α水平,并用流式细胞术检测各组PBMC亚群的变化。用活细胞计数法检测各组被激活的PBMC对慢性B细胞白血病细胞株Daudi、慢性髓性白血病细胞株K562和肝癌细胞株HepG2的杀伤作用。结果:经SDS-PAGE电泳分析纯化后表达产物的分子量大约为30ku(Id-ScFv蛋白)和70ku(Hsp70蛋白),分别与其理论预期值相符。PBMC的增殖作用、培养上清中IL-12和TNF-琢水平,Hsp70-Id组明显强于Id-ScFv组和人Hsp70组(P<0.05),而Id-ScFv组和人Hsp70组明显强于阴性对照组(P<0.05)。流式细胞术检测显示在Hsp70-Id组、Id-ScFv组和人Hsp70组PBMC中CD8+T细胞亚群的百分率均有增加,其中Hsp70-Id组最明显。在Id-ScFv组和Hsp70-Id组激活的PBMC对Daudi细胞的杀伤作用较K562、HepG2� 叶庆 王志华 秦叔逵 周红艳 邓昊 沈关心血清TSGF与AFP联合检测对良恶性肝病的诊断价值 被引量:3 2003年 叶庆 曹利民 王骞关键词:血清 TSGF AFP 肝病 原发性肝癌 病理生理学实验教学改革的初步实践探讨 2008年 实验教学是病理生理学教学的重要组成部分,初步探索和改革实验教学方法、手段,建立学生主动的实验教学模式,提高了教学质量,培养了学生的科研兴趣。 李艳 张磊 叶庆 沈延春关键词:实验教学改革