王新芳
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 少孢节丛孢菌Aoz1基因调控区的发掘及分析
- 2018年
- 为了确定少孢节丛孢菌内蒙古株丝氨酸蛋白酶Aoz1基因的潜在启动子区,试验采用透析膜培养的方法培养出少孢节丛孢菌内蒙古株并提取基因组DNA,与NCBI上Aoz1基因进行比对,选定Aoz1基因上游侧翼长度为2 000 bp的序列(命名为AP1)并据此设计引物,用PCR法扩增该序列并构建至平末端载体后测序,使用启动子在线预测软件Web Promoter Scan Service、NNPP以及CpG岛预测软件EMBOSS对AP1进行生物信息学分析。结果表明:所提取的基因组DNA完整性良好;成功构建出重组平末端质粒PEASY-AP1-Blunt,测序结果正确;通过相应软件预测出AP1含有的启动子基本元件,如TATA框、转录起始位点(TSS位点),以及参与Aoz1基因表达调控的转录因子结合位点Sp1、GHO、E2F、T-Ag和GCF等,同时确定了CpG岛的Obs/Exp值与GC含量的百分比分布。说明AP1序列具有启动子的基本结构和特点,初步确定了少孢节丛孢菌Aoz1基因的潜在启动子区。
- 王新芳尹相吉聂福贵陈湘江郭宏年梁萌罗小平钱英红郭少平杨晓野王瑞
- 关键词：少孢节丛孢菌PCR启动子生物信息学分析启动子预测
- 一种食线虫性真菌——厚垣普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)ARSEF3539生长特性的研究被引量：5
- 2017年
- 对厚垣普可尼亚(Pochonia chlamydosporia)ARSEF3539真菌的生长特性——菌丝生长过程、形态、分生孢子与厚垣孢子的形成及发育过程进行了研究。通过试验发现,该菌在0.4 g/L玉米粉琼脂固体(CMA)培养基和沙氏葡萄糖琼脂(SDA)培养基2种培养基上生长速度略有不同,SDA培养基上菌丝生长速度快,菌落为厚重的白色棉絮状;CMA培养基上菌丝生长速度略慢,菌落为较单薄的棉絮状。2种培养基上菌丝皆呈放射状生长,菌丝致密,气生菌丝发达,分生孢子梗单个或轮生于菌丝,每个孢子梗有4~5个分支,每个分支顶端分生孢子聚生,孢子透明,呈卵圆或圆形。老的气生菌丝膨大处形成厚垣孢子,厚垣孢子内部砖格状、多室、厚壁。
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- 关键词：分生孢子厚垣孢子
- 捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体获得与再生的荧光标记评价被引量：1
- 2017年
- 为了更准确快捷地评价利用酶解法酶解捕食性真菌Duddingtonia flagrans菌丝产生的原生质体数量及菌丝细胞壁降解情况,采用活体荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE),对该捕食性真菌菌丝酶解后产生的原生质体进行荧光标记,分别考察了标记浓度、标记时间、孵育温度对原生质体标记效果的影响,并观察CFSE标记后的原生质体再生情况。结果表明CFSE终浓度为10μmol/L,标记时间为15min,孵育温度为36℃,是CFSE标记捕食性真菌原生质体的理想条件,该试验同时表明CFSE不影响原生质体的再生率。CFSE作为一种活细胞示踪荧光探针,可以快速高效地标记捕食性真菌原生质体,该方法为捕食性真菌原生质体制备质量的快速评价提供了新的思路。
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- 关键词：荧光标记原生质体再生
