阳成
- 作品数：8 被引量：43H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参皂苷Rg1对游离脂肪酸诱导非酒精性脂肪肝细胞炎症的改善作用及机制研究被引量：6
- 2020年
- 该研究探讨人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪性肝细胞炎症反应的作用及其分子机制。用1 mmol/L游离脂肪酸处理HepG2和L02细胞24 h,再用20μg/mL或40μg/mL人参皂苷Rg1处理6 h;设置对照组、模型组、低剂量Rg1组、高剂量Rg1组。全自动生化仪检测各组细胞上清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的含量;酶联免疫吸附法测定细胞上清IL-1β、IL-6、TNF-α。RT-qPCR及Western blot检测NF-κB通路相关基因及蛋白的改变。免疫荧光染色观察NF-κB核转移;Western blot检测各组胞质与胞核内的NF-κB P65蛋白的表达。与对照组相比,模型组培养上清炎症指标明显增加(P<0.05);Rg1能降低炎症指标的表达(P<0.05)。Rg1能减少游离脂肪酸诱导的NF-κB磷酸化及其下游IL-1β、IL-6、TNF-α的表达,减少NF-κB P65从胞质向胞核的转移(P<0.05)。Rg1可通过抑制NF-κB活化减少NASH细胞模型炎症反应,为非酒精性脂肪性肝炎的治疗提供了可能的靶点。
- 肖晴章述军阳成高月徐静朱雅莉黄文祥
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎人参皂苷RG1炎症
- 人参皂苷Rg1激活腺苷酸激活蛋白激酶抑制体外诱导的非酒精性脂肪性肝细胞模型脂质沉积被引量：6
- 2019年
- 目的探讨人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪性肝细胞模型脂质沉积的作用及其分子机制。方法用0.25 mmol/L棕榈酸处理HepG2细胞24 h构建非酒精性脂肪肝细胞模型;加或不加10μmol/L AMPK抑制剂(Compound C,CC)预处理1 h,再使用40μg/mL人参皂苷Rg1或5μmol/L二甲双胍处理6 h。微量法检测细胞内甘油三酯(triglyceride, TG)含量;油红O染色观察脂滴聚集情况。RT-qPCR及Western blot检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路相关基因及蛋白的变化。结果与对照组比较,模型组细胞内TG、油红O染色吸光度增加(P<0.05)。Rg1能减少TG及油红O染色吸光度(P<0.05)。Rg1能增加被棕榈酸抑制的腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)的磷酸化,下调胆固醇结合调节元件蛋白(sterol regulatory element binding proteins-1c,SREBP-1C)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的表达(P<0.05),CC预处理能显著逆转Rg1的改善作用及其对AMPK通路的影响(P<0.05)。结论 Rg1可通过调控腺苷酸激活蛋白激酶通路减少非酒精性脂肪性肝病细胞模型脂质沉积。
- 肖晴黄文祥章述军阳成李佳俊赵金秋高月
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病人参皂苷RG1脂质沉积腺苷酸活化蛋白激酶
- 人参皂苷Rg1对小鼠急性肝衰竭的治疗作用和机制研究被引量：12
- 2017年
- 目的在四氯化碳（c01,）诱导的急性肝衰竭模型中，人参皂苷Rg1（G—Rg1）对内质网应激的调节作用，以及对肝细胞凋亡的影响。方法将40只健康成年C57／BL雄性小鼠随机分为等渗盐水对照（NS）组，G-Rg1空白对照（G—Rg1）组，CCl4模型（CCl4）组，G-Rg1预防治疗（CCI＆G-Rg1）组，并建立CCl4小鼠急性肝衰竭模型。建模12h后，分别采集各组小鼠血清和肝脏组织，用试剂盒法检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）水平；定量PCR法检测肝脏葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C／EBP家族同源蛋白（CHOP）的表达量；Westernb10t检测GRP78、CHOP、半胱氨酸蛋白酶12（caspase12）、caspase3的表达情况；HE染色评价肝脏组织病理学改变；免疫组织化学法分析GRP78、caspase3的表达情况；TUNEL法检测肝脏组织细胞凋亡情况。计量数据进行单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t法。结果NS组、G-Rg1组、CCl4组、CCI＆G-Rg1组ALT值分别为（50．12士9．25）U／L、（40．48土6．38）U／L、（980．66±110．29）U／L和（691．30±108．06）U／L，F：365．07，P〈0．05；AST值分别为（9．69±2．78）U／L、（9．40±3．84）U／L、（319．44±89．32）U／L和（195．40土15．41）U／L，F=115．64，尸〈0．05；TBil值分别为（0．46±0．13）rag／d1（1mg／dl=17．1μmol／L）、（0．48±0．08）rag／d1、（1．56±0．12）mg／dl和（1．09±0．11）mg／dl，F=211．29，P〈0．05，CCl4＋G-Rg1组血清ALT、AST、TBil水平低于CCl4组，差异均有统计学意义。CCl4＋G-Rg1组GRP78、CHOP的mRNA相对表达量均较CCl4组下降，差异均有统计学意义（F值分别为34．4、44．1，P值均〈0．05）。Westernbolt结果显示CCl4＋G—Rg1组与cch组相比，caspase3、GRP78、caspasel2、CHOP蛋白相对表达量均有不同程度降低，差异有统计学意义（P值均〈0．05）。CCl
- 罗欢黄文祥阳成赵金秋刘舒徐雅妹刘成伟
- 关键词：小鼠细胞凋亡肝衰竭内质网应激
- 非酒精性脂肪性肝病患者的肝组织差异蛋白的定量分析:基于iTRAQ技术被引量：3
- 2021年
- 目的应用蛋白质组学在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝脏组织中筛选差异蛋白,寻找关键的作用靶点。方法收集符合纳入标准的肝脏组织,通过HE染色病理切片筛选出非酒精性脂肪性肝炎样本(NASH组)3例和正常对照样本3例。提取NASH组及正常对照组的肝脏蛋白,使用iTRAQ试剂对多肽进行标记进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测,用蛋白质鉴定软件Mascot2.3.02比对UniProt蛋白数据库搜索鉴定,应用GO数据库对差异表达蛋白质进行注释和富集,应用KEGG数据库进行差异蛋白质涉及信号通路富集。实时荧光定量PCR(q PCR)检测显著差异表达蛋白对应的mRNA表达水平。结果 NASH组和对照组相比,以差异倍数(>1.2或<0.8)且P<0.05为阈值质谱分析鉴定到648个显著差异蛋白,其中表达量上调的蛋白有246种,下调的蛋白有402种。GO功能富集分析结果显示,差异表达蛋白主要参与小分子代谢、有机酸代谢、含氧酸代谢等生物学过程,在代谢途径、补体凝血级联、核糖体等KEGG通路上富集。荧光定量PCR对差异倍数(>2.0或<0.5)且P<0.05的25个显著差异表达蛋白进行筛选,共有6个蛋白与蛋白组学的结果趋势一致,包括5个下调蛋白:Jumonji蛋白(JARID2)、莱伯西林样蛋白(LCA5L)、突触素1(SYN1)及胶原α-1(ⅩⅢ)链(COL13A1)、FYVE,RhoGEF和PH结构域蛋白5(FGD5),以及1个上调蛋白:谷胱甘肽S-转移酶Mu 4(GSTM4)。结论 iTRAQ技术和生物信息学方法在NASH肝脏组织筛选出差异表达蛋白648个,其中JARID2、SYN1、COL13A1、FGD5、GSTM4可能是NASH的关键靶向蛋白。
- 朱雅莉章述军阳成薛薇张佳李佳俊赵金秋徐静黄文祥
- 关键词：非酒精性脂肪肝蛋白组学
- TSPAN8参与小鼠非酒精性脂肪性肝病的脂质代谢被引量：2
- 2022年
- 目的探讨四跨膜蛋白8(TSPAN8)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展中的变化及其在脂质代谢中的作用。方法将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为普通饲料组(ND,n=15)和高脂饲料组(HFD,n=15)。Westernblot检测1、3、6月末各组小鼠肝脏组织中TSPAN8的表达水平。HepG2细胞分成6组:完全培养基培养,无其他处理的命名为对照组(CON);游离脂肪酸(FFA)处理以构建NAFLD细胞模型的命名为FFA组;TSPAN8过表达细胞命名为PCDNA-TSPAN8组,其对照为PCDNA3.1组;FFA处理后的PCDNA-TSPAN8命名为PCDNA-TSPAN8+FFA组,其对照为PCDNA3.1+FFA组;qRT-PCR及Westernblot检测CON组和FFA组细胞中TSPAN8表达水平;油红O染色法和全自动生化仪检测PCDNA-TSPAN8+FFA和PCDNA3.1+FFA组细胞内脂质蓄积情况。qRT-PCR检测与脂质代谢相关基因mRNA的表达情况。结果Westernblot显示,与同喂养时间ND组相比,HFD喂养3、6月的小鼠肝组织中TSPAN8的表达下降(P<0.05)。qRT-PCR与Westernblot显示,与CON组比较,TSPAN8在FFA组中的表达下降(P<0.01)。与PCDNA3.1+FFA组相比,PCDNA-TSPAN8+FFA组中细胞内甘油三酯(TG)水平下降(P<0.001)。qRT-PCR示,与PCDNA3.1组比较,脂肪酸转运蛋白5(FATP5)在PCDNA-TSPAN8组中表达降低(P<0.01),与CON组相比,FATP5在FFA组表达上调(P<0.001)。结论TSPAN8参与NAFLD的脂质代谢,细胞过表达TSPAN8可能通过降低FATP5的表达来抑制细胞内脂质的沉积,可能具有潜在的临床价值。
- 张佳薛薇章述军朱雅莉阳成高月石凌枫黄文祥
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病脂代谢
- 人参皂苷Rg1对小鼠非酒精性脂肪肝的改善作用和机制研究被引量：9
- 2019年
- 目的:探讨人参皂苷(ginsenoside,Rg1)对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的改善作用及可能的机制。方法:将42只健康成年C57/BL雌性小鼠随机分为对照组、模型组、Rg1低剂量组、Rg1高剂量组、二甲双胍组,对照组和模型组每组各9只小鼠,其余小组每组各8只小鼠。对照组给予普通饲料喂养,其余各组给予高脂饲料喂养,持续喂养16周。16周后,对照组和模型组给予0.9%生理盐水20 mL/(kg·d)灌胃,Rg1低剂量组给予人参皂苷Rg120 mg/(kg·d)灌胃,Rg1高剂量组给予人参皂苷Rg140 mg/(kg·d)灌胃,二甲双胍组给予二甲双胍150 mg/(kg·d)灌胃。持续治疗4周后采集各组小鼠血清和肝脏组织。观察各组肝组织病理学形态,测定血清转氨酶及血脂水平、肝组织匀浆中丙二醇(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)的含量及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与炎症小体相关蛋白的表达情况。结果:Rg1低、高剂量组血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)分别为(41.87±10.64)、(43.46±13.84)U/L,天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)分别为(159.56±21.29)、(159.56±25.01)U/L,甘油三酯(triglyceride,TG)分别为(0.69±0.15)、(0.75±0.12)U/L,均明显低于模型组(P=0.001,P=0.010,P=0.000),肝组织脂肪变性程度明显轻于模型组(P=0.000)。Rg1能降低FFA,MDA含量,提高SOD活力(均P=0.000)。Rg1能下调GRP78、CHOP、Caspase12、NLRP3、IL-1β蛋白的表达(P=0.000,P=0.003)。结论:Rg1可能通过提高抗氧化酶活性、抑制ERS相关分子及炎症小体活化来改善NAFLD。
- 徐雅姝黄文祥阳成章述军赵罗乐秦圆圆
- 关键词：非酒精性脂肪肝人参皂苷RG1氧化应激内质网应激
- 2015~2019年重庆某三甲医院革兰阴性杆菌的分布特点和耐药性变迁
- 2024年
- 目的:对重庆某三甲医院2015~2019年期间临床分离的革兰阴性杆菌的分布和耐药性进行监测。方法:利用抗菌药物耐药性趋势监测(SMART)项目提交的重庆某医院革兰阴性杆菌标本,使用定制药敏板通过Trek系统进行抗菌药物敏感性测试。结果:共收集来自腹腔、呼吸道、尿路和血流感染患者的950株革兰阴性杆菌标本。其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的检出率分别为43.37%、18.63%、14.11%、10.84%。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对常规抗菌药物的耐药率较高但5年内变化较小。而肺炎克雷伯菌在2017年对第三代头孢菌素类和氟喹诺酮类药物的耐药率较2016年明显上升,对碳青霉烯类药物的耐药率在2019年降至20%以下。此外,不同感染部位的革兰阴性杆菌的耐药率也存在显著差异。其中,尿路感染来源的鲍曼不动杆菌对氟喹诺酮类抗菌药物左氧氟沙星和黏菌素均具有较高的敏感率;然而在腹腔和呼吸道感染中,其耐药率大多数超过50%。对于检出的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌、对头孢噻肟或头孢曲松耐药的大肠埃希菌、耐氟喹诺酮类大肠埃希菌、多重耐药鲍曼不动杆菌和多重耐药铜绿假单胞菌,目前可选用的常规抗菌药物较少。结论:该院2015~2019年期间革兰阴性耐药菌的问题比较突出,尤其是三代头孢菌素耐药肠杆菌目细菌。而鲍曼不动杆菌无论是否为特殊耐药菌,对大部分抗菌药物的耐药率都很高,有待于持续监测并结合临床实际合理选择有效抗菌药物。
- 代海峰李佳俊康纯鑫贾蓓辛小娟阳成刘成伟唐君陈潇迪黄文祥
- 关键词：革兰阴性杆菌抗菌药物耐药
- 人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪肝HepG2细胞脂质摄取和氧化的影响被引量：9
- 2020年
- 目的:探讨人参皂苷Rg1改善游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)HepG2细胞脂质摄取和氧化的作用及机制。方法:将HepG2细胞分为空白组,模型组,人参皂苷Rg1低、高剂量组(25,50μmol·L^-1)。1 mmol·L^-1游离脂肪酸处理HepG2细胞24 h构建非酒精性脂肪肝细胞模型,25,50μmol·L^-1人参皂苷Rg1处理24 h。细胞增殖及毒性检测-8(CCK-8)检测人参皂苷Rg1对HepG2细胞活性的影响,微量法检测细胞内甘油三酯(TG)含量,油红O染色观察脂滴聚集情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测与脂质摄取和氧化相关基因与蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,模型组细胞内TG含量及脂滴聚集吸光度显著增加(P<0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg1组细胞内TG含量及脂滴聚集吸光度显著降低(P<0.01)。Real-time PCR和Western blot结果均显示,与空白组比较,模型组过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),脂肪酸结合蛋白1(FABP1),脂肪酸转运蛋白2/5(FATP2/5)和脂肪酸转运酶(CD36)mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05),过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),肉毒碱棕榈酰基转移酶1(CPT1)和酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,人参皂苷Rg1组PPARγ,FABP1,FATP2,FATP5和CD36mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),PPARα,CPT1和ACOX1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:人参皂苷Rg1可通过降低脂质摄取和增强脂质氧化减少NAFLD细胞模型脂质蓄积。
- 高月黄文祥章述军李佳俊阳成赵金秋肖晴杨福伟朱雅莉
- 关键词：人参皂苷RG1非酒精性脂肪性肝病HEPG2细胞脂质代谢过氧化物酶体增殖物激活受体
