- 博来霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织铁死亡相关基因表达谱分析
- 2023年
- 目的分析博来霉素诱导的肺纤维化模型小鼠肺组织铁死亡相关基因的表达谱并探讨其可能的作用机制。方法取12只6~7周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分为模型组与对照组,每组6只,分别构建肺纤维化模型及进行对照处理。3周后处死小鼠,采用HE与Masson染色评估其肺部病理改变和胶原纤维堆积状况,普鲁士蓝染色观察肺组织铁聚集水平。应用小鼠铁死亡通路PCR Array筛选差异表达基因,采用生物信息学分析方法对差异基因进行GO功能富集与KEGG信号通路预测。运用实时定量PCR验证模型组与对照组肺组织铁死亡相关差异基因的表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠肺组织出现纤维化改变及明显的铁沉积。PCR Array检测结果显示,与对照组比较,模型组碳酸酐酶9(CA9)、半胱氨酰-tRNA合成酶1(CARS1)、热休克转录因子(HSF1)、NADPH氧化酶3(NOX3)、线粒体铁蛋白(FTMT)等5个铁死亡相关基因的表达量明显降低(P<0.05)。GO功能富集分析与KEGG信号通路预测结果显示,肺纤维化模型小鼠肺组织的差异表达基因主要与体温内稳态、NADPH氧化酶复合体、碳酸脱氢酶活性等功能有关,并在氮素代谢、氨酰合成、军团菌病等通路中富集。实时定量PCR验证结果显示,模型组小鼠肺组织中CA9、CARS1、HSF1及FTMT的表达量均明显低于对照组(P<0.05)。结论博来霉素诱导的肺纤维化模型小鼠肺组织中多个铁死亡相关基因的表达水平发生明显变化,提示铁死亡在特发性肺纤维化中发挥重要作用,其中的差异基因或可为临床治疗提供潜在靶点。
- 沈忱悠聂晓伟卫栋杨旭生江成王伟盛雅婷李桂荣陈静瑜
- 关键词：肺纤维化
- 大黄素和DMSO对肺缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制被引量：1
- 2017年
- 目的探讨大黄素和DMSO对肺缺血-再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法24只SD大鼠随机均分为四组:A、B和C组大鼠在建立缺血-再灌注损伤模型前2h分别给予生理盐水5ml/kg、大黄素溶液5mg/kg和5%DMSO 5ml/kg,D组仅在术前2h给予生理盐水作为假手术组,开胸,心脏取血。采用HE染色观察肺组织病理学变化,计算肺组织的湿/干重比(W/DR),RT-PCR法检测线粒体DNA(mtDNA)的表达,ELISA法检测血清IL-6、IL-8和TNF-α的含量。结果与D组相比,A组肺泡中大量炎症物质渗出,肺间质水肿,肺组织W/DR增大,mtDNA表达以及IL-6、TNF-α、IL-8含量增加(P<0.05);而B组和C组分别给予大黄素和DMSO后,能有效改善上述各指标的变化过程(P<0.05)。结论大黄素和DMSO通过抑制mtDNA的释放,降低炎症因子及趋化因子的表达,减轻机体的炎症反应,从而对肺缺血-再灌注损伤起保护作用。
- 李桂荣李慧星高霏杨振坤卫栋陈静瑜
- 关键词：大黄素线粒体DNA肺缺血-再灌注损伤
- 博来霉素诱导肺纤维化小鼠肺组织差异转录因子的筛选与功能分析被引量：3
- 2022年
- 目的 转录因子与特发性肺纤维化(IPF)的关系仍需进一步研究。文章通过筛选博来霉素诱导的肺纤维化小鼠模型肺组织中转录因子表达谱探讨转录因子在IPF发生中的潜在调控作用。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠14只,随机分为博来霉素组与对照组,每组7只。博来霉素组按5 mg/kg剂量给予鼻腔滴注博来霉素,对照组给予等剂量等渗盐水。3周后处死全部小鼠,采用Masson染色检测肺部胶原沉积情况。提取肺组织总RNA,使用小鼠转录因子PCR Array筛选差异表达的转录因子,并对表达上调与下调的因子分别进行靶基因预测和功能分析。结果 Masson染色结果显示博来霉素组胶原含量堆积,对照组则无明显异常。PCR Array结果显示,与对照组相比,博来霉素组小鼠肺组织中共检测到1个上调转录因子与5个下调转录因子。差异转录因子共与43个(上调27个,下调16个)靶基因存在调控关系。GO注释与KEGG分析结果显示,上调转录因子主要与调控细胞凋亡进程、细胞质、蛋白结合等功能有关,并在MAPK、PI3K-AKT、FoxO等信号通路中富集;下调转录因子主要与以DNA为模板的转录调控、细胞核、DNA结合等功能有关,并在HIF-1、p53等通路中富集。结论 博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型中存在EGR1、AR等转录因子的差异表达,后者或可为IPF的临床治疗提供潜在靶点。
- 沈忱悠李桂荣卫栋聂晓伟杨旭生王伟江成盛雅婷邹建赵晶晶陈静瑜
- 关键词：肺纤维化模型转录因子靶基因
