陈亚宁
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
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- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 凋亡抑制剂Z-VAD-FMK在猪卵母细胞冷冻保存中的应用
- <正>引言:猪卵母细胞对温度极为敏感,其冷冻后发育能力较低,直到2014年才由Somfai等获得了第一头由玻璃化冷冻卵母细胞发育而成的成活小猪仔。哺乳动物胚胎或卵母细胞冷冻后的细胞凋亡被认为是其冻后活力下降的主要因素之一...
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- 文献传递
- 白藜芦醇处理对猪MⅡ期卵母细胞冻后凋亡与相关基因表达的影响
- 戴建军吴彩凤张树山钮莹芳陈亚宁张德福
- 猪MII期卵母细胞冷冻前后全基因组表达谱分析
- 2019年
- 为探究猪MII期卵母细胞冷冻前后基因表达的变化,采用猪全基因组表达谱芯片对其冷冻前后的基因进行表达谱分析,筛选出2倍以上差异表达基因,并利用生物信息学对这些基因进行GO和KEGG Pathway分析。结果表明:(1)猪卵母细胞玻璃化冷冻前后共获得2倍以上差异表达基因171个,其中冻后上调表达基因103个,下调表达基因68个;选取的6个差异表达基因的RT-PCR验证结果与芯片分析结果一致。(2)损伤应答、细胞凋亡、程序性细胞死亡、细胞坏死及蛋白激酶调节、RNA拼接、核mRNA拼接和mRNA代谢等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的生物学过程;(3)胞外区、基底质膜、细胞外间隙、质膜、肌动蛋白细胞骨架、线粒体脊、线粒体、细胞器膜和线粒体包膜等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的细胞组分调控;(4)类固醇结合、酶抑制剂的活性、激素结合、核苷酸结合、辅酶结合和ATP酶活等参与了卵母细胞冻后差异表达基因的分子功能调控。(5) KEGG Pathway分析表明,Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、黏着连接和MAPK信号通路等参与了冻后卵母细胞的基因表达调控。综上所述,冷冻能造成猪MII期卵母细胞多系统的损伤,如线粒体损伤、凋亡、坏死、质膜损伤和RNA拼接与代谢异常等。
- 戴建军吴彩凤吴彩凤张树山陈亚宁张德福
- 关键词：卵母细胞玻璃化冷冻表达谱基因芯片
- 玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚线粒体功能和凋亡水平的影响
- 陈亚宁戴建军吴彩凤张树山张德福
- 特异性凋亡抑制剂在冷冻猪卵母细胞凋亡途径中的应用
- 吴彩凤钮莹芳陈亚宁戴建军张树山张德福
- 哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存及其相关机制的研究
- 利用玻璃化冷冻保存技术将哺乳动物胚胎长期保存起来，建立“胚胎库”使胚胎的供给不受时间和空间的限制，是保护物种资源和拯救濒危动物的有效手段。但是近年来研究认为冷冻后胚胎损伤、细胞凋亡和基因表达异常是其发育能力低下的一个重要...
- 陈亚宁钮莹芳
- 关键词：胚胎玻璃化冷冻基因表达
- 成熟液中添加白藜芦醇对猪卵母细胞体外发育和抗冻能力的影响被引量：5
- 2018年
- 为探究猪卵母细胞成熟培养液中添加白藜芦醇(resveratrol,RES)对其体外发育与抗冻能力的影响,本试验通过添加不同浓度的RES,观察其对卵母细胞体外发育和相关基因的表达的影响;通过OPS(Open Pulled Straw)玻璃化冷冻和解冻,观察RES对卵母细胞冷冻前后线粒体功能、凋亡和发育能力的影响。结果表明:(1)成熟培养液中添加2μmol/L RES有利于提高猪卵母细胞的体外成熟和发育能力,提高RES浓度至10μmol/L时则表现为细胞毒性作用;(2)添加2μmol/L RES可显著提高卵母细胞Sirt1、MATER、SOD1和Bcl2基因的表达量,并显著降低c-mos、MAPK和Mfn2的表达;当RES添加量增至10μmol/L时,卵母细胞凋亡相关基因的表达呈现出促凋亡状态;(3)添加RES后,猪MII期卵母细胞的ROS水平在冷冻前后均分别低于为添加组,细胞内ATP含量和膜电位值则分别高于未添加组;(4)成熟液中添加RES可提高玻璃化冷冻后卵母细胞的FDA染色存活率和孤雌激活卵裂率,并降低早期凋亡比例,其中FDA染色存活率差异显著。综上所述,2μmol/L的RES在猪卵母细胞成熟液中添加,可通过改善其发育和凋亡相关基因的表达,提高线粒体功能,达到提高卵母细胞发育和抗冻能力的目的。
- 戴建军吴彩凤吴彩凤张树山陈亚宁张德福
- 关键词：卵母细胞白藜芦醇抗冻能力
- 猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后的凋亡途径研究被引量：2
- 2017年
- 为阐明猪卵母细胞玻璃化冷冻后的细胞凋亡模式,本试验利用原位荧光染色技术对冻后卵母细胞死亡受体介导的外源性凋亡途径和线粒体介导的内源性凋亡途径中的Caspase 3、Caspase 8、Caspase 9和总Caspase活性进行检测,用RT-PCR技术对不同途径中关键基因进行mRNA表达检测。结果显示:猪MII期卵母细胞冷冻后,死亡受体外源性凋亡途径的Caspase 8荧光强度值(32.03)和线粒体内源性凋亡途径的Caspase 9荧光强度值(16.56),以及两者共同途径中的Caspase 3和总Caspase荧光强度值(16.70和8.43)均显著高于新鲜卵母细胞对照组所对应的荧光强度值(分别为4.02、4.83、4.23和3.08)。死亡受体外源性凋亡途径TNFα、FasL、CASP8和CASP3基因表达量也均有一定水平的提高,线粒体介导的内源性凋亡途径中CASP9、CASP3和P53基因表达水平呈上升趋势,而Bcl2、BAX、SOD1和survivin的基因表达水平显著下降。综上所述,死亡受体介导的外源性凋亡和线粒体介导的内源性凋亡共同参与了猪MII期卵母细胞冻后的凋亡过程。
- 吴彩凤戴建军钮莹芳张树山陈亚宁张德福
- 关键词：卵母细胞玻璃化细胞凋亡
- 一种用于猪孤雌激活胚的体外培养液及培养方法
- 本发明公开了一种用于猪孤雌激活胚的体外培养液(mPZM‑3)及培养方法，属于动物胚胎体外培养领域，所述体外培养液(mPZM‑3)的原料包括mPZM‑3基础培养液及五水乳酸钙和丙酮酸钠，且所述体外培养液中五水乳酸钙的浓度为...
- 张德福戴建军张树山吴彩凤陈亚宁王文杰
- 文献传递
- 白藜芦醇处理对猪孤雌激活囊胚抗冻能力的影响被引量：5
- 2017年
- 为研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)处理对猪孤雌激活囊胚抗冻能力的影响,利用2μmol/L RES在卵母细胞体外成熟、玻璃化冷冻与解冻和随后的胚胎培养过程中进行全程添加,观察其对猪孤雌激活囊胚冻后线粒体膜电位、TUNEL凋亡水平、多种Caspase活性、凋亡相关功能基因mRNA表达水平和体外发育能力的影响。结果显示:体外成熟和胚胎培养过程中添加RES能显著提高卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚率(95.18%vs.85.79%,51.85%vs.41.46%,P<0.05)。RES全程添加后其孤雌激活囊胚的抗冻能力显著提高,表现为囊胚腔恢复率和囊胚细胞数增高(35.09%vs.31.25%,37.95 vs.31.8l,P<0.05),线粒体膜电位升高(0.92 vs.0.46,P<0.05),囊胚细胞凋亡比例下降(8.24%vs.10.13%,P<0.05),Pan-caspase、Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的荧光强度值和Caspase-8,Caspase-9,TNF-α基因表达水平下降,Bcl-2和SOD-1表达水平升高(P<0.05)。与冷冻囊胚相比,新鲜囊胚的线粒体膜电位水平、Bcl-2和SOD-1基因表达量更高;细胞凋亡比例、Pan^caspase、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3荧光强度值以及Caspase-8、Caspase-9、TNF-α基因表达水平则更低(P<0.05)。因此,RES全程添加可通过改善冻后猪孤雌激活囊胚的线粒体功能,降低囊胚细胞凋亡水平,从而提高其抗冻能力。
- 陈亚宁吴彩凤张树山张德福戴建军
- 关键词：孤雌激活囊胚线粒体玻璃化冷冻白藜芦醇
