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沈明辉
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
兰州大学第二医院
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发文基金:
甘肃省卫生行业科研计划项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
闫雯
兰州大学第二医院
王倩
兰州大学第二医院
马克君
兰州大学第二医院
郜莉娜
兰州大学第二医院
尤崇革
兰州大学第二医院
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2017
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荧光染料 SYTO13用于高分辨熔解曲线技术 SNP 基因分型的评价
被引量:3
2017年
目的:评价荧光染料SYTO13在高分辨熔解曲线技术( HRM)检测单核苷酸多态性( SNP)位点的基因分型能力和临床适用性。方法实验性能验证。选择经测序确认rs3125734 C>T (Ⅰ类SNP )、rs255758 A>C(Ⅱ类SNP)和rs688C>T三个位点基因型的样本36例,以商业化HRM染料LCGreen Plus为对照,进行SYTO13对Ⅰ类和Ⅱ类SNP以及rs688C>T位点的长片段扩增(107 bp)与短片段扩增(52 bp)基因分型能力的评价。基因分型能力以野生型与纯合突变型的Tm差值ΔTm表示,独立样本t检验比较野生型和纯合突变型的Tm均值,两种染料之间检测能力的比较分析采用配对t检验。临床适用性以随机选取已测序分型的35例样本进行批量均相检测来评价。结果SYTO13能够清楚直观地对Ⅰ类和Ⅱ类SNP进行基因分型(ΔTmclas Ⅰ=0.36±0.05,tclas Ⅰ=14.827, Pclas Ⅰ=0.000;ΔTmclas Ⅱ=0.42±0.110,tclas Ⅱ=9.539,Pclas Ⅱ=0.000)。均相检测时SYTO13对Ⅰ类SNP的基因分型直观性更好(ΔTmSYTO13=0.39±0.027),而对短片段扩增产物基因分型效果不佳。临床适用性评价结果显示SYTO13对长片段扩增的Ⅰ类和Ⅱ类SNP除个别离群样本外均能准确基因分型,离群样本经复查后也能准确分型。结论 SYTO13可作为HRM染料准确地对长片段扩增的Ⅰ类和Ⅱ类SNP位点进行基因分型,适合于临床常规应用。(中华检验医学杂志,2017,40:88-94)
王倩
闫雯
沈明辉
马克君
郜莉娜
尤崇革
关键词:
基因分型技术
荧光染料
高分辨率熔解曲线
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