- 氧化应激环境下miR-155通过自噬调控内皮细胞功能的研究
- 研究背景与研究目的:目前冠心病、高血压等慢性血管性疾病发病率逐年增加,防治工作极为重要。内皮细胞功能紊乱是血管性疾病发生、发展的重要病理基础。血管内脂质代谢失调及缺氧等多种原因导致内皮细胞的损伤,血液与血管之间的屏障作用...
- 陈慧芬
- 关键词：内皮细胞缺氧应激自噬
- 文献传递
- 人脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞株U87上皮间质转化及皮下荷瘤能力的影响被引量：3
- 2016年
- 目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外模型中对胶质瘤细胞株U87荷瘤能力及其上皮间质转化(EMT)的影响及其可能机制。方法建立裸鼠皮下荷瘤模型,观察hUCMSCs与U87共培养组和U87单独荷瘤组皮下荷瘤能力的差别,免疫组化检测EMT相关基因组织表达水平,Western Blot检测EMT相关蛋白MMP2,MMP7,MMP9,E-cadherin(E-cad),N-cadherin(N-cad)和Vimentin(VIM)表达情况,q PCR检测EMT相关基因(mmp2,mmp7,mmp9,E-cad,N-cad和vimentin)转录水平。Transwell和Matrigel分别检测hUCMSCs对U87转移能力的影响,两组间比较拟采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果皮下荷瘤结果提示hUCMSCs与U87共培养组皮下荷瘤率高于U87单独荷瘤组,且肿瘤体积较大,RT-PCR结果提示:共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调,N-cad和VIM上调,且基质金属蛋白酶家族MMP2,MMP7,MMP9也有不同程度上调。Western blot结果提示:在蛋白水平共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调2.1倍,N-cad和VIM上调1.0倍,MMP9上调0.9倍;E-cad,N-cad,VIM以及MMP2变化结果与RT-PCR结果一致。免疫组化结果进一步验证hUCMSCs能促进U87表达Ki67,E-cad与N-cad低表达。Transwell和Matrigel实验结果提示hUCMSCs能够促进U87细胞的转移侵袭能力。结论 hUCMSCs能通过促进U87高表达EMT相关基因和增殖相关基因Ki67,从而促进胶质瘤细胞株U87皮下肿瘤形成并发生上皮间质转化,提示hUCMSCs临床应用中应该充分考略受试者是否是潜在胶质瘤患者。
- 刘高米洋和法莲陈慧芬陆容李自安何洁赵晶潘兴华
- 关键词：间质干细胞胶质瘤
- 胰酶消化时长对GFP转基因小鼠BMSC传代生长特性的影响
- 2018年
- 目的比较胰酶消化时间对绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)传代生长、分化能力的影响。方法取含相同细胞量的P2代绿色荧光蛋白转基因小鼠BMSC悬液接种于6孔细胞培养板中,待细胞生长融合度达到80%~90%时,用0.25%的胰酶消化5、10、15和20 min,比较不同时间点胰酶的消化能力、再次贴壁生长状态、培养上清中BMSC死亡碎片的数量以及诱导成脂、成骨、成软骨分化能力。结果消化5 mins后,大量BMSC处于贴壁状态,无法传代;消化10、15 mins后,80%以上的BMSC缩成圆形并脱落,二次贴壁后呈长梭形,表面光滑,具有多向分化潜能;消化20 min后,BMSC全部悬浮,再贴壁后呈宽大扁平状,表面粗糙,培养上清中悬浮大量细胞死亡碎片。结论绿色荧光蛋白转基因小鼠BMSC传代培养中,0.25%胰酶的最佳消化时间为10~15 mins。
- 和法莲白盈盈陈慧芬李自安杨建勇潘兴华刘高米洋
- 关键词：绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞胰酶消化
