卓莎
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 供职机构:西北大学化学与材料科学学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学一般工业技术医药卫生更多>>
- 基于MspA蛋白质纳米孔传感器的主客体化学研究被引量:4
- 2016年
- 以大肠杆菌原核系统表达的方法制备了MspA蛋白质纳米孔,并利用表面活性剂高温提取获得高活性MspA蛋白纳米孔。实验结果表明,0.5%的提取剂90℃提取30 min为最佳提取条件。利用制备的MspA纳米孔在单分子水平上研究了其与多种环糊精的相互作用,结果表明,在众多环糊精分子中,全-6-氨基-β-环糊精(am_7-β-CD)与MspA蛋白纳米孔相互作用较强且阻塞平台较一致,其滞留时间随电压增大而逐渐减小,但阻塞电流受电压影响不大。筛选使用am_7-β-CD作为适配体非共价键装配MspA纳米孔,在单分子水平上研究主客体化学反应。加入am_7-β-CD后,当盐酸金刚烷胺小分子浓度为50 nmol/L时,即出现二级阻塞平台,其滞留时间随电压增大而逐渐减小。这种新型蛋白质纳米孔单分子传感器可用于有机小分子的检测识别,极大拓宽了MspA纳米孔分析技术的的应用范围。
- 段静卓莎姚付军张亚妮亢晓峰
- 关键词:MYCOBACTERIUMSMEGMATISPORIN单分子检测盐酸金刚烷胺
- 工程化蛋白质纳米孔实时监测镉离子与谷胱甘肽的单分子反应被引量:3
- 2017年
- 本研究利用合成的全-6-季铵基-β-环糊精(Per-6-quaternary ammonium-β-cyclodextrin,p-QABCD)装备基因工程化的α-溶血素(α-Hemolysin,αHL)蛋白质纳米孔(M113R)_7,构建全新的单分子纳米孔反应器,在单分子水平实现对谷胱甘肽(GSH)和镉离子(Cd^(2+))的络合反应的实时原位监测,并辨认络合反应的不同路径、反应中间产物和最终产物。结果表明,溶液的pH值显著影响GSH与Cd^(2+)络合产物的络合比例。pH=7.4时,GSH与Cd^(2+)络合反应的最终产物为Cd(GSH)_2;pH=9.0时,最终产物为Cd(GSH)_2和Cd_2(GSH)_2。其中,Cd_2(GSH)_2的形成遵循两种路径:(1)一个Cd^(2+)首先结合两个GSH分子的巯基形成Cd(GSH)_2,然后,第二个Cd^(2+)结合去质子化的氨基形成Cd_2(GSH)_2;(2)两个Cd^(2+)分别结合同一个GSH分子的巯基和去质子化的氨基形成Cd_2(GSH)_1,然后,第二个GSH分子的巯基和去质子化的氨基结合Cd_2(GSH)_1的Cd^(2+)形成Cd_2(GSH)_2。本研究实现了在单分子水平无标记和无化学修饰研究金属离子和生物小分子的反应,对理解细胞内重金属的解毒机理和拓展纳米孔单分子技术的研究领域具有重要意义。
- 卓莎王莹亢晓峰
- 关键词:单分子检测谷胱甘肽镉离子