袁玉华
- 作品数：16 被引量：53H指数：4
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外泌体表达蛋白在阿尔茨海默病诊断中的应用被引量：1
- 2020年
- 阿尔茨海默病(AD)是导致老年人痴呆的最常见病因,随着社会人口的老龄化,已成为全球最重要的健康问题之一。目前的研究表明,外泌体在AD的发病中有多重作用。对外周血中神经源性外泌体的提取和分析已经为AD的诊断提供了新的思路。初步研究已发现,通过对外泌体表达分子的检测可以有效早期识别AD,并预测轻度认知损害向AD的转化。未来,通过与病理改变或脑脊液、正电子发射断层成像(PET)等"金标准"生物标志物比较的前瞻性研究,将进一步推进外周外泌体检测在AD早期诊断和病情监测中的应用。
- 谷冬梅袁玉华张楠
- 关键词：外泌体轻度认知损害常见病因神经源性病情监测
- 胎盘生长因子串联scFv质粒构建表达及亲和力测定
- 2023年
- 目的:构建并表达胎盘生长因子串联scFv,提升对胎盘生长因子的亲和力。方法:设计不同长度的柔性连接子连接的串联scFv,构建串联scFv质粒,并分别将串联scFv与亲本scFv于原核表达系统进行表达。通过间接ELISA分别测定串联scFv及对应亲本scFv亲和力,分别对数据进行单因素ANOVA方差分析,并使用Dunnett-t检验进行组间比较。结果:柔性连接子长度的不同,会对串联scFv亲和力造成差别。单因素ANOVA方差分析结果表明,各组亲和常数间存在明显的统计学差异,Dunnettt检验组间比较结果可知,当串联scFv间柔性连接子(GGGGS)n长度n=4和n=5时,亲和力较亲本提升不明显(P>0.05);但亲和力在n=6(t_(335)=33.90,t_(7A10)=32.00,均P<0.000 1)及n=7(t_(335)=91.68,t7A10=90.71,均P<0.000 1)时较两亲本均有明显提升。结论:串联scFv可以明显提高单体scFv亲和力。
- 闫若辰王文皓魏琳纳袁玉华
- 关键词：胎盘生长因子SCFV
- 三种新型冠状病毒抗体检测系统一致性评价被引量：1
- 2021年
- 目的评价三种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)特异性IgG、IgM抗体化学发光检测系统的一致性。方法收集46份血清标本,其中SARS-CoV-2阳性23例、阴性23例。使用A、B、C三种系统及配套试剂对46份血清标本进行SARS-CoV-2抗体检测。参考CLSI EP15-A3及EP9-A3方案进行精密度评价和方法学比对,对定量结果采用passing-bablok进行比对分析;采用χ^(2)检验将定性结果之间进行差异性分析,并分别与核酸最终检测结果进行差异性分析。结果A、B、C三种系统IgG抗体检测精密度分别为4.59%~5.08%、4.40%~4.91%、4.25%~8.09%,IgM抗体检测精密度分别为4.92%~5.39%、3.97%~4.19%、4.18%~8.44%。三种检测系统IgG抗体定量结果间回归方程的相关系数为0.835~0.871,截距为0.017~0.025,斜率为0.034~0.173,IgM抗体定量检测结果间回归方程的相关系数为0.671~0.885,截距为-0.090~0.025,斜率为0.098~0.437;IgG抗体定性结果与最终临床诊断结果符合率为91.4%~95.6%,IgM抗体定性结果与最终临床诊断结果符合率为65.2%~86.9%。结论三种系统IgG抗体检测结果一致性较好,IgM抗体的检测结果之间存在差异;血清抗体检测可作为SARS-CoV-2感染诊断和流行病学调查的有效指标。
- 张华耿亚松王倩付东鹤唐洪影杨玲董莉真吴高鹏李桂柃李天宁袁玉华
- 关键词：新型冠状病毒核酸检测抗体检测化学发光法
- 丹酚酸B对糖尿病肾病模型大鼠肾组织中Nrf-2和HO-1的影响被引量：15
- 2018年
- 目的观察不同剂量丹酚酸B对糖尿病肾病模型大鼠肾组织中转录因子NF-E2相关因子2(Nrf-2)和血红素加氧酶1(HO-1)的影响。方法 40只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组(不建模)、模型组、丹酚酸B低剂量组(10 mg/kg)、丹酚酸B高剂量组(20 mg/kg)。采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40 mg/kg)制备大鼠DN模型,建模后丹酚酸B处理组给予相应剂量药物灌胃,对照组及模型组给予等体积橄榄油灌胃,连续给药6周。处理结束后收集各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白含量;取眼球血检测血糖、血肌酐、总胆固醇及三酰甘油水平。采用免疫蛋白印迹(Western blot)和逆转录PCR(RT-PCR)检测肾组织中Nrf-2、HO-1蛋白及m RNA表达情况,PAS染色观察各组肾组织病变程度。结果与对照组相比,模型组的24 h尿蛋白、血糖、血肌酐、总胆固醇及三酰甘油含量升高,肾组织中Nrf-2、HO-1蛋白及mRNA的表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05),肾组织的病变程度加重;与模型组相比,丹酚酸B低、高剂量组的24 h尿蛋白、血糖、血肌酐、总胆固醇及三酰甘油含量明显下降,肾组织中Nrf-2、HO-1蛋白及mRNA的表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05),肾组织的病变程度减轻,且丹酚酸B的效果呈剂量依赖性。结论一定剂量的丹酚酸B可上调肾组织中Nrf-2及HO-1的表达,抵抗氧化应激。
- 明建松王晓雪袁玉华
- 关键词：糖尿病肾病血红素加氧酶-1
- 新型冠状病毒血清特异性抗体不同方法学检测分析
- 2023年
- 目的:比较不同血清学检测方法检测新型冠状病毒特异性抗体的阳性率,比较其在新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)患者和无症状感染者中的差异。方法:使用5种胶体金免疫层析法检测试剂A、B、C、D、E和一种磁微粒化学发光检测试剂F对入院的10例确诊患者和11例无症状感染者血清标本进行检测,其中A试剂检测总抗体,B、C、D、E、F试剂检测抗体IgM,C、D、E、F试剂检测抗体IgG。依据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第九版)》中相关规定以20例已排除新冠病毒感染者为空白对照,计算不同试剂检测抗体IgM和IgG分别在新冠肺炎患者和无症状感染者中的阳性率,通过统计学分析进行比较,实验中所选研究对象均未接种新型冠状病毒肺炎疫苗。结果:总抗体:A试剂阳性检出率为100%,其测定总抗体,不区分抗体IgM和IgG。抗体IgM:10例新冠肺炎患者和11例无症状感染者分别使用B、C、D、E、F方法检测IgM抗体,不同方法学的阳性检出率差异均存在统计学意义(P<0.05),在新冠肺炎组和无症状感染者组中,胶体金免疫层析法C、D、E检测抗体IgM的阳性检出率均显著低于磁微粒化学发光法F。抗体IgG:新冠肺炎组使用C、D、E、F方法检测IgG抗体的阳性检出率差异不存在统计学意义(P>0.05),无症状感染组使用C、D、E、F检测IgG抗体的阳性检出率差异存在统计学意义(P<0.05),胶体金免疫层析法D、E检测抗体IgG的阳性检出率在无症状感染组中低于化学发光法F。结论:磁微粒化学发光法相较于胶体金免疫层析法检测新冠肺炎患者抗体IgM以及无症状感染者抗体IgM和IgG具有更高的阳性检出率,更有利于区分既往感染和当前感染,但其对检测条件有较高要求,检测时间相对较长;胶体金免疫层析法检测速度快,灵敏度相对磁微粒化学发光法较低。
- 王倩张华袁玉华
- 关键词：胶体金免疫层析法
- 治疗尿毒症新型血液灌流吸附剂体外实验研究被引量：1
- 2021年
- 目的:研制用于治疗尿毒症的新型血液灌流吸附剂,通过与已上市血液灌流产品对照研究探讨其对肌酐、尿酸和β2微球蛋白的清除效果及血液相容性。方法:通过体外血浆吸附实验研究血液灌流吸附剂对肌酐、尿酸和β2微球蛋白的清除效率,通过血浆蛋白吸附性、电解质吸附性、血细胞吸附性、溶血性以及凝血性实验评价血液灌流吸附剂的血液相容性。结果:新型HB-H-10血液灌流吸附剂对肌酐、尿酸和β2微球蛋白的吸附率分别达(40.5±2.3)%、(24.2±1.8)%和(46.9±1.3)%,与其他吸附剂相比,吸附效果具有统计学意义(P<0.05);该吸附剂对血浆蛋白总蛋白、白蛋白、球蛋白、白细胞、红细胞和血小板吸附率分别为(5.69±0.32)%、(4.76±0.42)%、(7.33±0.33)%、(2.88±0.32)%、(9.22±0.26)%和(11.98±0.43)%,与其他吸附剂相比,吸附效果具有统计学意义(P<0.05);该吸附剂对血浆电解质、溶血率、凝血影响无统计学意义(均P>0.05),具有优异的血液相容性。结论:研制的新型HB-H-10吸附剂可作为血液灌流吸附剂治疗尿毒症,达到该产品更新换代和升级的效果。
- 李可刘娟娟刘辉舒桂明舒桂明
- 关键词：血浆灌流肌酐Β2微球蛋白血液相容性尿毒症
- 2016~2020年天津市无偿献血者检测不合格情况及分布特征回顾性分析被引量：11
- 2022年
- 目的通过对近5年无偿献血者分布特征及初筛、实验室检测结果分析研究,制定招募策略提供依据,保障临床用血,提高血液安全质量。方法本中心将5年789 570人次无偿献血者按不同分布特征分类,对血液检测结果不合格率进行统计学分析。结果乙肝表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)等经输血传播感染(TTI)构成顺位情况除2018年首位为抗-TP,其余年份首位均为HBsAg。不同年龄间酶联免疫吸附实验(ELISA)四项及ALT检测项目不合格率比较分析,除抗-HIV组间比较分析,P>0.05,其余项目比较,P<0.05。不同职业类型和文化程度人群血液进行初筛项目、实验室检测不合格情况率比较分析,只有不同文化人群中抗-HIV不合格率无差异(P>0.05),其余均有统计学差异(P<0.05)。HIV确证实验阳性男性(228例)高于女性(3例),工人(23.08%~40.74%)和职员(16.67%~46.67%)占比较高,2020年学生HIV确认阳性数陡然上升到21.62%。乙型肝炎脱氧核糖核酸(HBV DNA)核酸单阳性检出例数最多为460例,人类免疫缺陷病毒核糖核酸(HIV RNA)和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)核酸单阳性检出数量均较低,分别为3例和6例。结论根据无偿献血者不同人群分布特征及检测结果,有的放矢制定招募策略并提高血液检测能力能够更好地保证血液安全。
- 李凤园袁玉华潘彤
- 关键词：人群分布特征血液检测不合格率核酸
- 类风湿关节炎中NF-κB信号通路相关微小RNA的研究进展被引量：2
- 2019年
- 微小RNA(miRNA)是一类短链非编码RNA分子,主要参与癌症、病毒感染、炎症、自身免疫病等的生理和病理过程。核因子κB(NF-κB)是一个基因调节功能广泛的转录因子,参与炎症、细胞增殖、肿瘤发育、学习、记忆等不同的生物过程。一些研究提示miRNA与NF-κB通路关系密切,在调控NF-κB通路中起着抑制或激活作用。本文就类风湿关节炎中参与NF-κB信号调节的miRNA及其作用机制的研究进展作一综述。
- 王晶袁玉华
- 关键词：微RNASNF-ΚB信号通路
- 抗G17单链抗体-AP融合蛋白的构建、表达与鉴定
- 2021年
- 目的:为了便于临床检测,建立一种G17新型免标自指示剂,用原核表达系统表达抗胃泌素单链抗体融合蛋白(ScFv-AP)。方法:通过构建重组质粒pET32a-scFv-AP,选择合适的感受态细胞Rosetta(DE3)及优化表达条件制得目的蛋白。利用固定化金属离子亲和层析技术得到纯品蛋白。再将其作为检测探针运用到双抗体夹心ELISA的方式证明其具有免疫活性与实用性。结果:经Sanger法测序、SDS-PAGE、Western blot证明经金属离子亲和层析技术得到高纯度目的蛋白。经ELISA验证其最低检出限为0.978 ng/ml。实验后确定最佳反应条件为25℃、1 mmol/L IPTG、6 h,每升菌可收获目的蛋白约9.6 mg。目的蛋白具有较高的灵敏度。结论:成功表达具有免疫反应性的抗胃泌素单链抗体融合蛋白。其具有指示蛋白的作用,与传统酶标抗体相比灵敏度高4倍。
- 邵艳宏李天宁黄伦辉王文皓魏琳纳袁玉华刘运德
- 关键词：单链抗体碱性磷酸酶原核表达
- 基于开放式三明治酶联免疫分析的雌二醇检测方法的建立
- 2022年
- 目的:通过建立开放式三明治酶联免疫分析方法(OE-ELISA),对雌二醇进行检测。方法:通过基因拼接构建质粒后在原核表达系统中制备小分子泛素相关修饰物蛋白-大肠杆菌麦芽糖结合蛋白-抗体轻链可变区(sumo-MBP-VL)和碱性磷酸酶-抗体重链可变区(ALP-VH)融合蛋白,并从产量和可溶性角度对两种蛋白的表达条件进行优化。将得到的两种蛋白纯化后分别作为包被抗体和酶标抗体,建立检测雌二醇的OE-ELISA方法。应用竞争ELISA和OE-ELISA测定不同浓度的雌二醇标准品,绘制标准曲线并计算两种方法的敏感性。结果:在质粒中加入sumo标签后,实现了sumo-MBP-VL融合蛋白的可溶性表达。在Rosetta宿主菌中37℃诱导后得到大量的ALP-VH和sumo-MBP-VL融合蛋白。OE-ELISA测定雌二醇标准品的标准曲线为y=0.0296x+1.3029,r^(2)=0.9961,敏感性为532 pg/mL,优于竞争ELISA 803 pg/mL的敏感性。结论:成功建立了检测雌二醇的OE-ELISA方法。
- 王文皓闫若辰魏琳纳袁玉华
- 关键词：雌二醇竞争ELISA
