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一种人工肽适体用于抑制尖孢镰刀菌的用途: 本发明涉及一种肽适体在制备用于抑制或抵抗尖孢镰刀菌的生物制剂、农药或保护剂中的用途。该肽适体包含可变肽段，所述可变肽段具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或其变体，或由如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其...; 唐燕琼刘柱马香黄君君唐鸿倩胡新文; 文献传递

耐硼赖氨酸芽孢杆菌在抑制火龙果软腐病菌生长方面的应用: 本发明公开了耐硼赖氨酸芽孢杆菌在抑制火龙果软腐病菌生长方面的应用，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌于2019年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019773。耐硼赖氨酸芽孢杆菌不仅可以很大程...; 李宏曹欣刘柱陈银华马香王丹唐燕琼高玉晓胡新文

一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂及其制备方法、应用: 本发明提出了一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，包括如下重量份的组分：20‑40份耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液和8‑12份辅料，其中，辅料为水、培养基、甘油中的至少一种，耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液是由耐硼赖氨酸芽孢杆菌经过二次发...; 李娟娟刘柱王丹陈银华章跃陵林向民; 文献传递

抗菌肽Cathelicidin-1真核表达及发酵液抑菌活性鉴定被引量：1: 2023年; 为了获得体外表达的高活性抗菌肽,通过分子克隆技术构建了抗菌肽Cathelicidin-1重组载体,在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中表达,并鉴定包含该抗菌肽的发酵液的抑菌活性。通过DNA全合成技术合成编码抗菌肽Cathelicidin-1的全长基因,采用PCR技术扩增靶标基因并与真核表达载体pGAPZαA连接,获得重组质粒pGAPZαA-Cathelicidin-1;将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α中扩增,提取质粒并经单酶切处理后转化毕赤酵母GS115;使用YPD培养基培养酵母,72 h后收集发酵液,通过Tricine-SDS-PAGE检测抗菌肽表达,并通过抑菌圈与抑菌曲线测定鉴定发酵液的抑菌活性。结果表明,抗菌肽Cathelicidin-1以分泌肽形式表达于发酵液中,并且该发酵液能够显著抑制大肠杆菌(Escherichia coli)的生长,而对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)则无明显抑菌效果。; 李飞航武浩恒李宏李娟娟马香唐燕琼刘柱; 关键词：抗菌肽真核表达发酵液抑菌效果

海绵共生链霉菌及其发酵生产星形孢菌素的方法和应用: 本发明涉及一株海绵共生链霉菌SP6206，属于海绵共生链霉菌发酵领域，所述海绵共生链霉菌SP6206的保藏编号为CCTCCM2017451。本发明还公开了所述的海绵共生链霉菌SP6206发酵生产星形孢菌素中的方法，包括以...; 黄小龙黄东益周双清许云吴文嫱刘柱郑继平陶琳

基于特异性序列的维氏气单胞菌检测引物、试剂盒、检测方法及其开发方法: 本发明涉及用于检测维氏气单胞菌的引物对，所述引物对的正向引物的核苷酸序列选自SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.3，所述引物对的反向引物的核苷酸序列选自SEQ ID NO.2和/或SEQ ID NO.4。本发...; 马香刘柱唐燕琼唐鸿倩胡新文王丹; 文献传递

氧化胁迫下维氏气单胞菌qPCR内参基因筛选被引量：1: 2022年; [目的]筛选氧化应激胁迫下用于检测维氏气单胞菌基因变化的稳定实时荧光定量PCR(RT-qPCR)内参基因。[方法]选取16S rRNA、gyrB、recA、tmRNA、GAPDH作为候选内参基因,通过RT-qPCR方法检测其在维氏气单胞菌经不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))溶液处理后的表达情况;利用NormFinder和BestKeeper对候选基因表达稳定性进行分析。[结果]在不同浓度H_(2)O_(2)溶液处理下,维氏气单胞菌中候选内参基因Ct值最稳定的是16S rRNA、GAPDH和tmRNA,分别约为14、30和22;NormFinder软件分析表达最稳定的内参基因是gyrB、GAPDH和16S rRNA,稳定值M分别为0.38、0.38和0.46;BestKeeper软件分析表达最稳定的内参基因是16S rRNA和GAPDH,P值分别为0.023和0.001,标准差分别为0.52和0.54,变异系数分别为3.81和1.83,相关系数分别为0.337和0.520。[结论]16S rRNA和GAPDH的Ct值稳定,NormFinder分析其稳定值低,稳定性好,BestKeeper显示16S rRNA和GAPDH的P值、标准差均符合要求,16S rRNA和GAPDH可作为氧化应激条件下进行维氏气单胞菌qPCR检测的内参基因。; 孙灵敏唐燕琼李宏李娟娟刘柱马香; 关键词：维氏气单胞菌内参基因 GAPDH

一种维氏气单胞菌减毒菌株的构建方法、菌株及其应用: 本发明涉及一种维氏气单胞菌，于2019年7月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M 2019580。本申请的维氏单胞菌突变菌株的毒力大幅下降，达到了良好的减毒效果，为制作维氏气...; 李宏徐一轲刘柱马香唐燕琼盛强龙孙愉宸; 文献传递

Flag-ALD融合载体构建及蛋白表达被引量：1: 2020年; 维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是感染鱼类的最常见致病菌之一,为了解维氏气单胞菌中丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase,ALD,EC 1.4.1.1)的调控功能,笔者通过分子克隆获得Flag-ALD融合表达载体,并在大肠杆菌中大量表达该蛋白。即以维氏气单胞菌C4基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增获得N端带有Flag标签的ald基因,将带有标签的目的基因与原核表达载体pACYCDuet连接,并将重组质粒pACYCDuet-Flag-ald转化到大肠杆菌(E.coli)BL21中。添加异丙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(Isopropylbeta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组蛋白大量表达。SDS-PAGE分离与Western blot结果表明,来源于维氏气单胞菌的Flag-ALD重组蛋白在E.coli中以可溶性形式成功表达。本实验构建的Flag标记靶标蛋白可为研究丙氨酸脱氢酶在维氏气单胞菌中的功能以及在生物抑菌剂方面的应用提供技术支持。; 曹欣唐燕琼李宏马香刘柱; 关键词：丙氨酸脱氢酶基因克隆重组质粒蛋白表达

维氏气单胞菌tmRNA以sRNA形式特异调控的下游靶标筛选和鉴定: 2024年; 转移-信使RNA(transfer-message RNA,tmRNA)是细菌中普遍存在的稳定非编码sRNA,同时具备tRNA和mRNA双重特性,主要介导反式翻译核糖体拯救机制,对病原菌致病性和胁迫响应具有重要影响。【目的】从tmRNA功能研究入手,揭示对水产养殖和人类公共安全造成严重危害的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的致病分子机制。【方法】采用生物学信息学工具IntaRNA2.0对维氏气单胞菌tmRNA可能结合的下游靶标进行预测,通过基因本体论(geneontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,鉴定预测靶标参与的生物学过程及信号通路,并使用qPCR技术验证候选靶标基因在维氏气单胞菌野生型、tmRNA敲除株和smpB敲除株中的表达情况,以初步鉴定维氏气单胞菌tmRNA以sRNA形式调控的潜在下游靶标。【结果】tmRNA可以sRNA形式与下游100个潜在特异性靶标结合,这些靶标基因主要结合于tmRNA的3′端tRNA样结构域(tRNA-likedomain,TLD)、H2域及PK3、PK4域,参与细菌基本代谢过程。qPCR结果表明,在特异性结合的靶标基因中,基因WP_201994931.1以SmpB非依赖的方式受到tmRNA调节;WP_201954220.1、WP_005335875.1、WP_265062582.1、WP_265061484.1和WP_265061494.1等基因的表达则受到SmpB蛋白调控。【结论】本研究初步鉴定基因WP_201994931.1有可能是tmRNA作为sRNA调控的下游靶标,对拓展tmRNA功能研究领域有一定指导作用,有助于后续进一步探究维氏气单胞菌的致病和环境适应等重要生命活动的分子机制。; 童园罗宸柏泰鹏唐燕琼刘柱马香; 关键词：维氏气单胞菌 TMRNA SRNA

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刘柱

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