王桂芹
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:温州医学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织apelin及其受体的变化被引量:5
- 2013年
- 目的:探讨新的小分子活性肽apelin及其受体(APJ)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的变化及意义。方法:雄性SD大鼠25只,随机分为对照组(n=10)和野百合碱组(n=15)。野百合碱组大鼠一次性腹部注射野百合碱60 mg/kg,对照组注射相同剂量的溶媒。注射野百合碱后第21天时,测定大鼠平均肺动脉压,HE染色观察肺组织病理学变化,Masson三色染色检测肺血管重建指标,放射免疫法及Western blot法测定肺组织中apelin和APJ的蛋白,RT-PCR法观察肺组织apelin和APJ的基因。结果:野百合碱组的平均肺动脉压、右心室肥大指数、肺血管重建指标、肺组织中apelin蛋白含量均明显高于对照组,而肺组织中APJ蛋白及基因表达显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);但肺组织apelin基因表达两组间无显著统计学差别。免疫组化定位发现,野百合碱组大鼠apelin及APJ蛋白在肺组织内的炎症细胞胞膜及胞浆内呈强阳性表达。结论:内源性apelin及其受体的表达异常可能在野百合碱诱发的肺动脉高压的发生发展中起重要作用。
- 王青王桂芹庞玲霞薛峰陈醒言陈然孔晓霞龚永生范小芳
- 关键词:野百合碱肺动脉高血压APELIN
- 血管平滑肌细胞在不同细胞外基质的迁移特性:玻片倒扣法研究被引量:3
- 2013年
- 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移参与血管发育和多种疾病的发生、发展过程,然而其迁移机制尚不清楚。本课题建立了一种适合研究VSMCs迁移的方法——玻片倒扣法,基于该方法进一步研究VSMCs在不同细胞外基质上的迁移特性及机制。原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs),采用免疫细胞化学方法鉴定其纯度。将细胞接种于小玻片上,待生长至单层汇合后,将小玻片倒扣于包被有不同细胞外基质的大玻片上,培养24h后,固定、拍照、统计软件测量迁移出的细胞数量和迁移距离。进一步采用细胞划痕实验和免疫细胞化学技术,研究细胞外基质对PASMCs迁移的作用及机制。结果显示:(1)原代培养PASMCs纯度高达(97±3)%;(2)玻片倒扣24h后,层粘连蛋白(laminin)组、基质胶(Matrigel)组比对照(phosphate buffered saline,PBS)组、多聚右旋赖氨酸(poly-D-lysinehydrobromide,PDL)组迁出的细胞数量更多,迁移距离更远,差异具有明显统计学意义;(3)细胞划痕8、12、24h后,细胞在层粘连蛋白、基质胶上的面积愈合率比在PBS上的高,差异具有统计学意义;(4)免疫细胞化学结果显示迁移能力较强的PASMCs中肌动蛋白在与细胞运动方向相一致的边缘聚集现象越明显;vinculin(粘附斑的标记物)染色显示,种植于层粘连蛋白和基质胶上的PASMCs中,vinculin的分布较PBS和PDL上的更少。上述结果表明:玻片倒扣法是一种适合研究VSMCs迁移的方法;层粘连蛋白和基质胶可能通过抑制粘附斑的形成和调节骨架蛋白,促进VSMCs迁移。
- 王凤王桂芹薛峰陈兆琴龚永生黄智慧
- 关键词:肺动脉平滑肌细胞细胞外基质