于淑静
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖
- 2015年
- 目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacI线性化后转入HEK293细胞包装、扩增。倍比稀释法测定病毒滴度。实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力。结果pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组。结论K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖。
- 舒燕齐杰玉王灿蔚于淑静陶崑
- 关键词：腺病毒K562细胞
- 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对免疫性肝损伤的保护作用及其机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对雷公藤甲素(TP)诱导的免疫性肝损伤的保护性作用及其作用机制。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、EGCG对照组、TP组、EGCG治疗组。以赖氏法检测血清中ALT水平,以分光光度法检测肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的变化情况,以HE染色观测小鼠肝脏组织形态学变化,以ELISA方法检测肝脏中白细胞介素(IL)-17和IL-6的表达水平,以Western blot方法检测肝脏中Toll样受体4(TLR4)的表达情况。结果:TP组小鼠血清转氨酶水平明显高于正常对照组(P<0.005),EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG治疗组小鼠血清转氨酶水平与TP组相比下降明显(P<0.005)。TP组小鼠肝脏病理切片示较多肝细胞坏死和中性粒细胞浸润,EGCG对照组和正常对照组小鼠肝脏形态学基本正常,EGCG治疗组示肝细胞炎症坏死程度较TP组有大幅减轻。TP组小鼠肝脏中MDA、IL-17及IL-6水平明显高于正常对照组(P<0.005),而SOD和GSH水平明显低于正常对照组(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005),EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),EGCG治疗组小鼠肝脏中MDA、IL-17及IL-6水平均下降明显(P<0.005),而SOD和GSH水平均增高,与TP组比较有显著性差异(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005)。TP组肝脏TLR4蛋白表达水平高于正常对照组,EGCG对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG治疗组TLR4水平显著降低。结论:EGCG对TP所致小鼠肝损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化作用及对炎症因子的调节有关。
- 于淑静周莲娣魏彩冰孙宗良张起辉陶崑
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯雷公藤甲素肝损伤抗氧化作用
- MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响。方法将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合基因的表达;Western blot检测BCR/ABL融合蛋白的表达;CCK-8检测K562细胞的增殖情况,流式细胞术(FCM)检测K562细胞凋亡率。结果与对照比较,K562细胞感染Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒后,miR-193b表达明显升高;bcr/abl融合基因及BCR/ABL融合蛋白表达明显下调;K562细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论 miR-193b可下调bcr/abl表达,抑制K562细胞的生物学效应,过表达miR-193b能作为治疗CML的有效手段。
- 舒燕齐杰玉王灿蔚于淑静陶崑
- 关键词：K562细胞BCR/ABL
- 雷公藤甲素致小鼠肝损伤的机制研究被引量：5
- 2017年
- 本文研究雷公藤甲素致肝损伤作用机制。将雌性C57BL/6小鼠20只随机分为2组,并以雷公藤甲素造模,通过检测血清中谷丙转氨酶(ALT)水平变化,以及观察小鼠肝脏组织切片HE染色结果,了解肝脏损伤情况;RT-PCR法检测小鼠肝脏中白细胞介素(IL)-17、IL-6、维甲酸孤儿核受体(ROR-γt)mRNA表达水平,ELISA法检测IL-17、IL-6蛋白表达水平,Western blot法检测小鼠肝脏中TLR4蛋白表达水平。与对照组比较,雷公藤甲素模型组小鼠血清ALT水平显著升高(P<0.005),HE染色切片显示较多的肝细胞坏死和炎症细胞浸润,IL-17、IL-6、ROR-γt mRNA表达水平和IL-17、IL-6蛋白表达水平显著升高(P<0.005),此外,TLR4蛋白表达水平显著升高(P<0.005)。结果表明,雷公藤甲素所导致的肝损伤可能通过激活TLR4信号,增加IL-17、IL-6的表达,影响Th17特异性转录因子ROR-γt,进而促进Th17细胞活化,增强其致炎功能。
- 于淑静魏彩冰陶崑周莲娣
- 关键词：雷公藤甲素肝损伤炎症因子C57BL/6小鼠
