蒋小飞
- 作品数：10 被引量：44H指数：4
- 供职机构：南京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 补肾助孕方对大鼠垂体细胞促性腺激素的调节被引量：7
- 2018年
- 目的目前黄体功能不全的机制尚不明确,文中观察补肾助孕方含药血清对大鼠垂体细胞促性腺激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)分泌功能的影响,探讨补肾助孕方干预垂体分泌促性腺激素的作用机制。方法用补肾助孕方水煎剂给雌性SD大鼠灌胃,制备补肾助孕方含药血清。采用CCK-8法检测注射用醋酸西曲瑞克、含药血清和垂体促性腺激素释放激素(GnRH)对细胞活性的影响。在最大无毒浓度的条件下,采用注射用醋酸西曲瑞克阻滞垂体细胞GnRH受体,用RPC细胞建立受体拮抗模型(模型组),另建立空白组(正常细胞)、西曲瑞克组(仅单纯注射醋酸西曲瑞克作用6 h)、补肾助孕方组(仅加含补肾助孕药血清作用24 h)。使用20 nmol/L GnRH刺激细胞6 h,检测各组细胞上清液中FSH和LH含量,以及FSHβ与LHβ、GnRHR的mRNA表达。结果与空白组比较,西曲瑞克组细胞上清FSH降低[(3.91±0.36)m IU/m L vs(2.26±0.22)m IU/m L,P<0.05]、LH降低[(8.94±0.57)m IU/m L vs(3.35±0.59)m IU/m L,P<0.05],补肾助孕方组细胞上清LH显著升高[(8.94±0.57)m IU/m L vs(10.79±0.60)m IU/m L,P<0.05];与西曲瑞克组相比,补肾助孕方组与模型组细胞上清FSH、LH水平均明显升高(P<0.05)。与空白组比较,西曲瑞克组FSH mRNA显著降低[(0.95±0.23)vs(0.58±0.12),P<0.01]、LH mRNA显著降低[(0.98±0.14)vs(0.27±0.21),P<0.01],GnRHR mRNA表达升高[(0.97±0.13)vs(1.77±0.26),P<0.01];补肾助孕方组FSH mRNA、LH mRNA升高(P<0.05)。与西曲瑞克组比较,补肾助孕方组、模型组FSHβmRNA、LHβmRNA表达均升高(P<0.05),而GnRHR mRNA表达降低(P<0.01)。结论补肾助孕方能显著提高大鼠垂体细胞GnRH受体拮抗模型的FSH、LH分泌水平,降低异常升高的GnRH受体的mRNA及蛋白水平。补肾助孕方可改善GnRH受体表达功能。
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- 关键词：垂体细胞含药血清
- SD大鼠腺垂体细胞体外分离方法的比较被引量：2
- 2017年
- 目的体外分离腺垂体制备主要包括酶消化及机械法等方法,但何种方法效果更好尚无相关报道。现比较大鼠腺垂体细胞体外分散制备的几种主流方法并对其进行促性腺激素分泌细胞鉴定,明确何种制备方法更为便捷高效。方法将48只成年雌性SD大鼠按随机数字表法分为胰酶组(0.25%胰酶EDTA液消化)、Ⅳ型胶原蛋白酶组(Ⅳ型胶原蛋白酶消化)、机械分离组(200目细胞筛研磨)及胰酶+机械分离组(0.25%胰酶EDTA液消化+200目细胞筛研磨),每组12只。评价各种方法制备细胞的效果。培养各组原代细胞,动态观察各组细胞在体外生长的情况,并利用免疫细胞化学染色技术进行鉴定。结果与机械分离组细胞活率[(90.25±0.96)%]比较,胰酶组、胰酶+机械分离组[(94.11±1.71)%、(94.92±1.92)%]均升高;与Ⅳ型胶原蛋白酶细胞活率[(93.32±1.77)%]比较,胰酶组、胰酶+机械分离组亦明显升高(P<0.05)。形态学观察:各种方法制备的腺垂体细胞均呈圆形,折光性强,边缘完整清楚。培养16~24 h候开始部分贴壁,至48~72 h绝大部分细胞贴壁,早期腺细胞仍为圆形,体积较前减小,可见少量大体积的细胞散落分布其间。培养7 d后,细胞变为多角形或梭形,并连接成片,至10 d左右,纤维化逐渐明显;免疫细胞化学染色表明FSH阳性细胞体积较大,数量少,散在分布;其阳性产物位于细胞质内,呈蓝色;酶联免疫吸附试验测定细胞上清液证实离体细胞仍有激素分泌功能。结论对比单一制备细胞方法,胰酶消化+机械分离法具有一定优势;体外培养的垂体前叶细胞生长良好,分泌功能存在,可胜任相关科学实验。
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- 关键词：SD大鼠体外培养免疫化学染色
- 输卵管近端梗阻性不孕的中西医结合治疗临床研究
- 不孕是困扰广大育龄期妇女的常见疾病,可由男女双方因素或单方因素导致。不孕症虽然不是致命性疾患,却是困扰诸多家庭的严峻的社会问题。随着社会的不断进步,由输卵管梗阻所致的不孕症比例有所增加,据1990年WHO不育症病因学调查...
- 蒋小飞
- 关键词：不孕输卵管梗阻中西医结合治疗
- 补肾助孕方干预垂体细胞GnRHR后信号通路的机制研究
- 背景:黄体功能不全是不孕症、早期妊娠流产和复发性流产的直接、重要原因。目前临床治疗效果欠佳。导师应用补肾助孕方治疗“肾阳偏虚,夹有肝郁”的LPD患者取得良好疗效。前期研究已阐明该方对子宫内膜容受性、卵巢内分泌功能的疗效,...
- 蒋小飞
- 关键词：黄体功能不全垂体促性腺激素信号通路网络药理学
- 文献传递
- 补肾助孕方对LPD模型大鼠卵巢SOD-2、GPX-1、P53表达水平的影响被引量：9
- 2019年
- 目的研究补肾助孕方对由米非司酮诱导的(Lutealphasedefect,LPD)模型大鼠卵巢SOD-2、GPX-1、P53表达水平的影响,探讨补肾助孕方治疗LPD的机制。方法50只雌性育龄期SD大鼠按随机数字表法分配到空白组、米非司酮组、阳性药地屈孕酮组、补肾助孕方低剂量及高剂量治疗组5组,每组10只,分组造模给药。分别采用qPCR法与WesternBlot法检测各组大鼠卵巢线粒体超氧化物歧化酶(SOD-2)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx-1)及P53的mRNA表达以及蛋白表达水平。结果与空白组相比较,米非司酮组SOD-2、GPX-1蛋白、mRNA表达水平下降(P<0.01),P53蛋白、mRNA表达水平明显上升(P<0.05);与米非司酮组相比,补肾助孕方低剂量、高剂量治疗组GPX-1、SOD-2蛋白及mRNA表达均显著上升(P<0.05);阳性药地屈孕酮组SOD-2、GPX-1蛋白表达较米非司酮组明显升高(P<0.05),但SOD-2mRNA、GPX-1mRNA表达与米非司酮组相比未见明显差异;阳性药地屈孕酮组与补肾助孕方低剂量治疗组P53蛋白及mRNA表达较米非司酮组明显下降(P<0.05);而补肾助孕方高剂量治疗组P53mRNA表达未见明显差异(P>0.05)。结论补肾助孕方可能通过提高LPD模型大鼠卵巢组织抗氧化能力,缓解大鼠卵巢组织凋亡水平,达到治疗LPD的目的。
- 袁艺祯周惠芳蒋小飞徐建亚单进军张双
- 关键词：卵巢黄体功能不全
- 褪黑素治疗黄体功能不全的作用机制研究进展被引量：4
- 2016年
- 氧化应激在黄体功能不全(LPD)发病过程中占有重要的作用。褪黑素具有强大的氧自由基清除和抗氧化能力,可用于改善LPD患者黄体功能及体外培养的卵母细胞质量。
- 蒋小飞周惠芳
- 关键词：褪黑素黄体功能不全氧自由基氧化应激辅助生殖技术
- 通管助孕汤治疗输卵管梗阻性不孕60例临床疗效观察被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨通管助孕汤治疗输卵管梗阻性不孕的临床疗效;方法:120例患者按随机数字表法分为两组,其中治疗组60例,对照组60例;对比通管助孕汤灌肠和口服金刚藤胶囊的疗效;结果:治疗组有效率为94.6%;对照组有效率为74.1%;两组治疗效果有差异(P<0.05)结论:通管助孕汤加减治疗输卵管梗阻性不孕疗效显著。
- 蒋小飞
- 关键词：通管助孕汤输卵管梗阻性不孕
- 中药对下丘脑作用的研究进展被引量：12
- 2017年
- 下丘脑是人体重要的内分泌启动器官,其对女性下丘脑-垂体-卵巢(HPOA)生殖轴以及下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)等具有关键的调控作用。近年来,研究发现多种补肾、疏肝中药可对下丘脑的促性腺激素释放激素(GnRH)分泌及下游器官功能、神经递质以及相关关键蛋白表达产生影响。本文从以上三方面综述了中药对下丘脑的作用,为以后的研究提供了思路。
- 刘贝周惠芳周伯如蒋小飞单进军徐建亚谢彤
- 关键词：中药下丘脑HPA轴生殖内分泌
- 葛根芩连汤含药血清通过miR-146b/SIRT1信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗的研究被引量：10
- 2019年
- 目的:探讨葛根芩连汤含药血清改善HepG2细胞胰岛素抵抗的机制。方法:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,用葛根芩连汤含药血清、吡格列酮干预,并设空白对照组和模型组。比色法检测细胞糖原合成能力,实时定量PCR检测miR-146b的表达,Western blot和实时定量PCR检测SIRT1/FoxO1通路中相关蛋白及mRNA的表达。结果:葛根芩连汤含药血清能逆转胰岛素抵抗HepG2细胞的糖原合成能力下降(P<0.01)。与对照组比较,模型组miR-146b表达显著升高(P<0.01),葛根芩连汤含药血清能显著抑制miR-146b的表达(P<0.01)。Western blot显示,与空白对照组比较,模型组SIRT1、PPARγ蛋白表达显著降低,acetyl-FoxO1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,葛根芩连汤含药血清组SIRT1、PPARγ蛋白表达显著升高,acetyl-FoxO1蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。过表达的miR-146b能抑制SIRT1蛋白的表达,沉默miR-146b能增强SIRT1蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:葛根芩连汤含药血清能改善棕榈酸诱导的HepG2胰岛素抵抗模型,其机制与调控miR-146b/SIRT1信号通路有关。
- 隋淼蒋小飞范尧夫陈国芳刘超
- 关键词：葛根芩连汤胰岛素抵抗
- 丹栀调脂汤对高脂诱导MAFLD大鼠PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响
- 2023年
- 目的研究丹栀调脂汤对高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)大鼠PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响,探讨其在MAFLD治疗中的作用。方法雄性SD大鼠分为正常组、模型组及丹栀调脂汤高、中、低剂量组。正常组和模型组予等体积的生理盐水,丹栀调脂汤高、中、低剂量组分别予丹栀调脂汤20.4、10.2、5.1 g·kg^(-1)·d^(-1),连续灌胃8周后取材。检测5组大鼠体质量、血脂、血糖、胰岛素水平及HOMA-IR变化情况;肝脏组织脂质沉积情况;Western blot检测PI3K/AKT信号通路中各蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量、TG、TC、FFA、GLU、INS、LDL-C及HOMA-IR水平明显升高,HDL-C水平明显降低;肝脏组织油红O染色可见明显肿大的肝细胞及明显的脂质沉积;PI3K、AKT蛋白磷酸化表达水平显著降低。相较于模型组,丹栀调脂汤高、中、低剂量组体质量、TG、TC、FFA、GLU、INS、LDL-C及HOMA-IR水平不同程度降低;肝细胞肿大、肝细胞脂滴及排列结构均有不同程度的改善;PI3K、AKT、FOXO1蛋白磷酸化表达水平升高。结论丹栀调脂汤可能通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路改善胰岛素抵抗,进而达到防治MAFLD的目的。
- 刘玉玉隋淼蒋小飞汤楠楠王智明
