杜敏杰
- 作品数：10 被引量：8H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 敲除α-1,3-半乳糖基转移酶基因五指山小型猪的繁育和鉴定被引量：3
- 2017年
- 目的总结α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)五指山小型猪的繁育和鉴定。方法统计GTKO五指山小型猪的繁育结果及窝产仔数;采用聚合酶链反应(PCR)技术对GTKO五指山小型猪GGTA1基因敲除类型进行鉴定;采用荧光显微镜和流式细胞术对人、野生型五指山小型猪、GTKO五指山小型猪外周血单核细胞(PBMC)的α-1,3-半乳糖(αGal)表型进行检测;比较GTKO五指山小型猪与野生型五指山小型猪血常规指标的差异。结果 GGTA1基因型的遗传符合孟德尔定律;GGTA1-/-猪的PBMC流式检测无荧光表达,与基因型鉴定结果一致;GTKO五指山小型猪雌性猪初产窝产仔数为(6.8±1.8)只,经产窝产仔数为(8.3±2.2)只;血常规检测的各项指标与野生型五指山小型猪差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论连续2代GTKO五指山小型猪遗传稳定,繁殖力正常。GTKO五指山小型猪可作为异种器官移植研究的可靠供体。
- 龙川高景波唐雨婷杜敏杰石宁宁冯冲鲁琳潘登科
- 关键词：基因敲除五指山小型猪繁殖性能外周血单核细胞
- 早期胚胎的卵裂球聚合制备GFP示踪的嵌合体小型猪
- 引言/目的日本科学家将大鼠多功能干细胞注入小鼠囊胚,在敲除Pdx1基因的胰腺缺失小鼠体内生长出大鼠胰腺,成功生成种间嵌合体。表明异种器官移植未来通过基因编辑技术与嵌合体技术结合在动物体内长出人类器官成为可能,而小型猪的生...
- 龙川纪慧丽冯冲石宁宁高景波唐雨婷杜敏杰潘登科
- GTKO五指山小型猪健康及遗传稳定分析
- 目的 目前国内外已有用于不同用途多种转基因动物,但对转基因动物健康状况和遗传稳定的研究报道较少。本课题组利用TELEN技术敲除了五指山猪α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)基因,制备了GTKO五指山小型猪(WZSP)。本...
- 高景波龙川杜敏杰石宁宁冯冲潘登科
- 关键词：五指山猪
- GTKO五指山小型猪健康及遗传稳定分析
- 目前国内外已有用于不同用途多种转基因动物,但对转基因动物健康状况和遗传稳定的研究报道较少。本课题组利用TELEN技术敲除了五指山猪α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)基因,制备了GTKO五指山小型猪(WZSP)。本文就本...
- 高景波龙川杜敏杰石宁宁冯冲潘登科
- 关键词：五指山猪
- GGTA1基因敲除巴马小型猪的遗传和健康初步分析
- 龙川高景波杜敏杰石宁宁唐雨婷冯冲潘登科
- GTKO五指山小型猪健康及遗传稳定分析
- 目的目前国内外已有用于不同用途多种转基因动物,但对转基因动物健康状况和遗传稳定的研究报道较少。本课题组利用TELEN技术敲除了五指山猪α1,3半乳糖基转移酶(GGTA1)基因,制备了GTKO五指山小型猪(WZSP)。本文...
- 高景波龙川杜敏杰石宁宁冯冲潘登科
- 关键词：五指山猪
- 流式细胞术检测供体猪α-1,3-Gal和人源CD46的表达
- 2018年
- 目的检测基因修饰猪细胞表面α-1,3-半乳糖(α-Gal)抗原敲除情况和人源蛋白CD46(hCD46)的表达情况,为异种器官移植提供可靠的供体。方法采集500μl野生型(wild type,WT)、α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)、hCD46和GTKO/hCD46巴马小型猪血液,分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。异硫氰酸荧光素标记的植物凝集素(FITC-GSIB4)与PBMC共孵育后采用流式细胞术检测α-Gal抗原敲除情况,异硫氰酸荧光素标记的hCD46膜辅蛋白抗体(antiCD46-FITC)与PBMC共孵育后采用流式细胞术检测h CD46蛋白表达情况。结果 GTKO和GTKO/hCD46巴马猪PBMC表面α-Gal检测呈阴性,WT和hCD46巴马猪检测呈阳性,与测序结果一致;hCD46和GTKO/hCD46巴马猪PBMC表面hCD46蛋白检测呈阳性,WT和GTKO巴马猪检测呈阴性,与PCR鉴定结果一致。结论建立了微量血液流式细胞术直观检测供体猪α-Gal抗原和人源CD46蛋白表达的方法。
- 杜敏杰杜敏杰臧荣鑫臧荣鑫
- 关键词：外周血单核细胞流式细胞术
