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長岡正人
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
东京工业大学
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
王钊
清华大学医学院
赤池敏宏
东京工业大学
岳晓珊
清华大学医学院
玉井俊行
东京工业大学
村上裕太
东京工业大学
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岳晓珊
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長岡正人
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村上裕太
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玉井俊行
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基础医学与临...
1篇
军医进修学院...
年份
2篇
2008
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P19细胞心肌体外分化诱导条件的优化
被引量:2
2008年
目的 分别观察P19细胞心肌分化诱导中的几种影响因素,优化P19细胞心肌分化的诱导条件。方法使用悬滴法或96孔板悬浮培养法制备细胞聚集体(aggregates),二甲基亚砜(DMSO)为诱导剂诱导P19细胞的心肌分化。普通光学显微镜下观察跳动的心肌细胞的产生来确定诱导是否成功,免疫荧光染色确认心肌特异性蛋白Troponin T的表达,RT-PCR方法检测分化诱导后心肌细胞标志基因的表达情况。结果使用96孔板悬浮培养法诱导细胞形成聚集体后转入贴壁培养阶段时细胞聚集体贴壁状态优于传统的悬滴法。DMSO的加入可以提高细胞形成聚集体后贴壁时细胞聚集体的完整性。1×10^7~2×10^8L^-1的接种浓度下心肌细胞分化诱导效率较高。在可观察到跳动的心肌细胞之前即可检测到Troponin T的表达。结论通过对细胞形成聚集体的诱导方法、诱导剂、接种浓度等因素的优化可以提高P19细胞的心肌分化效率,为开发高效心肌分化诱导法提供了条件。
岳晓珊
長岡正人
赤池敏宏
王钊
关键词:
P19细胞
心肌细胞
分化
N-钙黏素融合蛋白抑制P19分化伴随的细胞凋亡
被引量:1
2008年
目的:讨论N-钙黏素融合蛋白N-cad-Fc对P19细胞分化过程中伴随的细胞凋亡的影响。方法:分子生物学技术制作N-钙黏素融合蛋白N-cad-Fc。视黄酸(retinoic acid,RA)诱导P19细胞分化,培养于明胶(gelatin)包被培养板上的P19细胞为对照组,普通光学显微镜观察其神经分化情况,TURNEL法和DNA片段化分析法检测细胞凋亡情况,alamarBlueTM染色法检测细胞存活情况。结果:培养于N-cad-Fc包被培养板上的P19细胞经RA诱导分化后细胞形态与明胶包被培养板上P19细胞分化形态一致,但分化过程中伴随的凋亡现象被明显抑制,分化诱导后细胞的存活率大大提高。结论:使用N-cad-Fc融合蛋白培养技术可以在不影响细胞分化状态的前提下降低分化过程中细胞的死亡率,为开发低死亡率的高效细胞分化诱导方法创造了条件。
岳晓珊
玉井俊行
長岡正人
村上裕太
赤池敏宏
王钊
关键词:
细胞分化
细胞凋亡
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