王鑫
- 作品数:66 被引量:168H指数:7
- 供职机构:临沂大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- Tet-On系统调控p53稳定表达的H1299细胞系的建立与应用被引量:2
- 2015年
- 应用Tet-on系统和H1299细胞,建立了p53诱导表达的H1299细胞系p53-Tet H1299,p53表达受强力霉素(doxycycline,Dox)调控,存在一定的剂量依赖性。诱导表达的p53蛋白有很好的核定位能力和转录活性,能显著上调p21、TLR3、Bax等多种p53转录激活的下游靶基因表达,同时还可显著抑制水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)的复制,说明p53-Tet H1299可作为研究p53抗病毒作用的细胞模型。p53诱导表达细胞系的建立为进一步研究p53抗病毒作用机制、转录调控基因的筛选及其他生物学功能研究提供了很好的研究工具。
- 武专昌王鑫魏建超杨逸凡赵秋华邵东华李玉明齐鹏飞刘珂李蓓蓓邱亚峰马志永
- 关键词:P53TET-ONH1299DOX抗病毒
- 一种新型动物组织采样器
- 本实用新型公开了一种新型动物组织采样器,涉及医疗器械技术领域,其包括底板,底板上表面靠近左侧的位置固定连接有支撑板一,支撑板一通过销轴一与连接杆一铰接。该新型动物组织采样器,通过设置的弹簧一,在工作人员松开手后,弹簧一可...
- 韩照清娄安刚关立增王鑫毕崇亮李永洙
- 文献传递
- 家蚕V型ATP酶B亚基的克隆及表达特征被引量:2
- 2016年
- V型ATP酶(Vacuolar-type ATPase)是一种定位于细胞膜和细胞器膜上的氢离子转运酶。它利用ATP水解的能量将氢离子转运到液泡、囊泡或者胞外,从而维持细胞内正常的酸碱环境。V型ATP酶B亚基(V-ATPase B)作为ATP的催化位点,也有着非常重要的作用。为了探讨家蚕V-ATPase B(Bm V-ATPase B)的功能,首先从家蚕五龄幼虫的中肠c DNA中克隆了Bm V-ATPase B基因并构建原核表达载体进行原核表达,获得了重组蛋白,经质谱鉴定正确后,通过镍柱亲和层析的方法纯化了该蛋白并制备了多克隆抗体;最后分析了该蛋白在家蚕丝腺中的表达特征并利用免疫荧光对其在丝腺中的表达位置进行了定位。结果显示Bm V-ATPase B基因序列全长1 473 bp,预测蛋白分子量55 k Da,预测等电点5.3。通过Western blotting对家蚕5龄第3天和上蔟第1天幼虫丝腺的不同区段进行Bm V-ATPase B蛋白的表达特征分析,发现在两个时期该蛋白均在前部丝腺高量表达,而在中部丝腺和后部丝腺表达量相对较低。进一步对两个时期丝腺的不同区段进行免疫荧光定位,发现该蛋白在两个时期的前部丝腺、中部丝腺和后部丝腺均定位于细胞层。利用激光共聚焦显微镜对该蛋白进行进一步的定位,发现该蛋白主要在丝腺的细胞膜表达。研究结果明确了该蛋白在丝腺中的表达模式,为深入研究该蛋白在蚕丝纤维形成中的作用奠定了基础。
- 陈慧芳王鑫谢康李懿赵萍
- 关键词:家蚕WESTERNBLOTTING免疫荧光定位
- 柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建被引量:7
- 2007年
- 为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示:从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。
- 韩红玉林矫矫赵其平董辉姜连连王鑫韩静芳黄兵
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊子孢子抑制性消减杂交
- PRRSV在感染早期通过活化CREB竞争抑制p65与CBP结合被引量:2
- 2019年
- 为研究细胞内cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的结合蛋白(CBP)在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染后的结合动态对Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)表达的影响,本研究利用HP-PRRSV强毒Hu N4株感染宿主细胞,采用CO-IP方法分析CREB的磷酸化情况及其结合动态。结果显示Hu N4株感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)能够引起CREB明显磷酸化,Hu N4株感染PAMs和Marc-145细胞使p38磷酸化水平显著上调,PKA通路抑制剂可以明显抑制Marc-145细胞中CREB的磷酸化水平,但不影响PAMs中CREB的磷酸化水平。并且Hu N4株感染Marc-145细胞1 h后磷酸化的CREB能够与CBP结合,并抑制了p65与CBP的结合。当抑制剂H-89和SB203580抑制Marc-145细胞中CREB的磷酸化后,CREB与CBP的结合同时受到抑制。本研究表明HP-PRRSV Hu N4株感染细胞后,可以通过激活p38 MAPK通路而活化CREB,活化的CREB与p65竞争结合CBP,而抑制p65与CBP的结合,使得HP-PRRSV在感染早期抑制了IFN-β的表达。本研究为深入研究HP-PRRSV的免疫抑制机理提供了实验依据。
- 李先斌王鑫谭祥梅陈鹏飞赵雄伟吴瑕虞凌雪高飞姜一峰于海童光志周艳君
- 关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒CREBP65CBPIFN-Β
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对I型干扰素表达影响的分析
- 王鑫
- 文献传递
- 一种治疗猪蓝耳病的中药组合物
- 本发明公开了一种治疗猪蓝耳病的中药组合物,由以下原料制备所得:金银花提取物绿原酸15~20份、鱼腥草10~15份、八爪金龙10~15份、黄连小檗碱10~15份、蒲公英6~10份、桔梗8~12份、牛至油10~15份、紫苏叶...
- 王鑫武专昌夏小静吴家强刘思当张兴林孟凡生王红岩毕崇亮韩照清王娟李浩然
- 文献传递
- 一种宠物狗的防雾霾口罩
- 本实用新型公开了一种宠物狗的防雾霾口罩,包括口罩主体和空气过滤器,所述口罩主体的前端设置有空气过滤器,所述口罩主体的后侧的两端分别设置有第一束紧带和第二束紧带,所述第一束紧带的外侧设置有第一魔术贴,所述第二束紧带的末端安...
- 毕崇亮王鑫夏春峰陈现伟
- 文献传递
- 上海地区奶牛球虫种类的初步调查被引量:6
- 2010年
- 赵其平韩红玉王赞江董辉姜连连王鑫韩静芳黄兵袁耀明
- 关键词:球虫种类奶牛集约化饲养出血性肠炎艾美耳属球虫病
- 一种治疗畜禽呼吸道疾病的口服固体自乳化分散体
- 本发明公开了一种治疗畜禽呼吸道疾病的口服固体自乳化分散体,由以下重量份的原料制备而成:金银花油2~6份、松果菊油5~7份、板蓝根乙醇提取物1~3份、开口箭提取物2~4份、穿心莲萃取物0.5~1份、地皮消发酵粉2~3份、中...
- 王鑫夏小静吴家强刘思当武专昌商营利李永洙张兴林孟凡生王红岩毕崇亮王娟李浩然
- 文献传递