王振宝
- 作品数：17 被引量：10H指数：2
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- 洋葱atp6基因的克隆与系统进化分析被引量：6
- 2014年
- 细胞质雄性不育(CMS)在作物遗传育种研究中占有重要地位,多种植物的细胞质雄性不育均与线粒体基因结构变异及新嵌合基因的产生有关。为探索线粒体atp6基因与洋葱CMS的关系,以13份不育系和11份保持系为材料克隆洋葱atp6基因编码序列,测序结果表明不同材料atp6基因间存在一个C/A多态性位点,该多态性位点在不育系和保持系间随机出现,而不是不育系与保持系的特征差异。蛋白质分析表明这一多态性位点的变异并未改变atp6蛋白跨膜结构。进一步的蛋白比对分析揭示了atp6蛋白在物种间有一定的保守性,特别是第IV跨膜结构域的Arg在所有物种中是高度保守的,也是H+转运所必需的。基于atp6蛋白序列的系统进化树显示细菌和病毒位于树的基部,其次是真菌、低等藻类以及原生生物,然后高等藻类、苔藓和蕨类,高等绿色开花植物处于树的顶端,单子叶植物处于树的最顶端。
- 王振宝霍雨猛缪军高莉敏刘冰江杨妍妍吴雄程斐
- 关键词：洋葱雄性不育系统进化
- 洋葱黄酮醇合成酶基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2022年
- 黄酮醇合成酶(flavonol synthase, FLS)是植物黄酮醇生物合成途径中的关键酶。本研究克隆了洋葱黄酮醇合成酶基因AcFLS,其编码序列长度为927 bp,编码309个氨基酸。AcFLS蛋白为亲水性胞质不稳定蛋白,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,属于α-同戊二酸和二价铁离子依赖型加氧酶家族。AcFLS的氨基酸序列与洋葱、虎眼万年青、石刁柏FLs蛋白的同源性分别为91.34%、76.42%、74.63%。实时定量PCR结果显示,AcFLS基因在洋葱中的表达具有组织特异性,表现为叶鞘中表达量最高,叶片次之,根中极少表达;在鳞茎膨大过程中AcFLS基因的表达量呈先升高后降低的趋势,在膨大盛期达到最高值;但AcFLS基因在紫皮、黄皮洋葱中的表达水平并无显著差异。该研究为进一步探明洋葱鳞茎颜色产生的机理奠定了基础。
- 王振宝杨妍妍刘冰江霍雨猛李艳伟孙亚玲吴雄
- 关键词：洋葱基因克隆生物信息学分析
- 洋葱种子消毒和无菌苗培养新方法被引量：2
- 2023年
- 为了获得简便、高效、低污染的洋葱种子消毒及无菌苗培养方法,通过控制植物组培抗菌剂(PPM)的pH值、消毒浸泡时间及培养浓度,对洋葱种子消毒及无菌苗培养进行研究。结果表明,PPM(20 mL/L,pH 2)浸种24-48 h消毒效果可以达到10%NaClO消毒10 min水平,且不影响种子发芽,8 d发芽势超过90%。污染微生物分析鉴定了4种真菌(Alternaria alternata、Fusarium proliferatum、Fusarium oxysporum、Stemphylium vesicarium)和2种细菌(Phytobacter diazotrophicus、Atlantibacter hermannii)可以通过洋葱种子进行传播,抑菌试验明确了PPM可有效的抑制污染微生物的生长。培养基中添加PPM可以有效的降低污染率,高浓度PPM(1-9 mL/L)可以抑制洋葱幼苗的生长,而低浓度PPM(0-0.5 mL/L)对洋葱幼苗生长无明显抑制作用。探索开发了一套操作简便无需繁琐冲洗的洋葱种子消毒以及高发芽率、低污染率无菌苗培养方法。
- 孙亚玲李瑞平王振宝张庶刘冰江霍雨猛
- 关键词：洋葱种子无菌苗
- 一种洋葱核心SNP的分子标记集及应用
- 本发明涉及一种洋葱核心SNP的分子标记集及应用。本发明提供的洋葱核心SNP分子标记集包含443个SNP标记，该分子标记集具有在洋葱资源或者品种鉴定、洋葱资源或者品种纯度检测、洋葱SNP指纹图库构建、洋葱遗传多样性分析以及...
- 李艳伟王振宝杨妍妍刘冰江霍雨猛孙亚玲
- 基于干种子DNA的洋葱杂交种纯度分子标记快速鉴定
- 2023年
- 为了寻找一种从洋葱种子中快速提取高质量DNA的方法,并能满足大量准确鉴定洋葱杂交种纯度的要求,本研究首先对全式金PlantZol试剂盒、天根快捷型植物基因组DNA提取系统、TPS法和CTAB法提取的洋葱种子DNA质量进行比较,筛选出最佳提取方法,并对不同发芽天数的种子及提取有效DNA的种子数量进行优化筛选,然后利用SCAR分子标记对洋葱杂交种的纯度进行鉴定,进一步验证洋葱种子DNA的提取质量。结果表明,天根快捷型植物基因组DNA提取系统未能成功得到洋葱干种子基因组总DNA;CTAB法提取的基因组总DNA带型整齐一致、单一明亮,条带无拖尾和降解现象,也没有明显的RNA和蛋白污染;洋葱干种子以1粒和发芽3 d提取的DNA更加完整,纯度更高。以CTAB法提取的1粒洋葱干种子基因组总DNA为模板,对杂交种Ms位点的基因型进行SCAR标记鉴定,PCR扩增条带清晰明亮,根据条带的迁移位置可以清楚区分洋葱不同细胞核基因型之间的差异。综上,本研究确定了CTAB法为洋葱干种子基因组总DNA提取的最佳方法,1粒洋葱干种子获得的有效DNA完全可以满足杂交种分子标记鉴定的要求,实现洋葱杂交种纯度的早期鉴定。
- 孙亚玲李艳伟王振宝吴雄刘冰江杨妍妍
- 关键词：洋葱种子DNA提取
- 一种区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记及其应用
- 本发明涉及一种区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记及其应用。本发明根据洋葱花青素合成酶基因序列设计引物，以30天苗龄紫皮、黄皮洋葱假茎为试材，提取总RNA，再反转录成cDNA，以Actin基因为对照进行花青素合成酶基因的...
- 王振宝杨妍妍刘冰江霍雨猛徐宏志孙亚玲李艳伟吴雄
- 一种盐碱地洋葱轻简化高产栽培方法
- 本发明涉及一种盐碱地洋葱轻简化高产栽培方法，该方法在盐碱地采用耐盐碱洋葱杂交种天正105，灌水压碱、深耕断碱、增施有机肥、地膜覆盖、AMF菌肥拌种等一系列技术手段，解决了0.3～0.5％的盐碱地洋葱栽培保苗难、发育迟缓、...
- 刘冰江杨妍妍霍雨猛王振宝孙亚玲李艳伟吴雄
- 文献传递
- 一种基于SNP分子标记鉴定洋葱雄性不育三系配套杂交种纯度的方法
- 本发明公开了一种基于SNP分子标记鉴定洋葱雄性不育三系配套杂交种纯度的方法，属于洋葱育种技术领域。其方法为：采用TPS法提取洋葱种子的基因组总DNA，应用基于SNP的KASP分子标记对杂交种和亲本进行基因分型，同时具有父...
- 杨妍妍刘冰江霍雨猛李艳伟王振宝孙亚玲吴雄
- 一种洋葱种子消毒及无菌苗培养方法
- 本发明涉及一种洋葱种子消毒及无菌苗培养方法。本发明首先提供了一种基于PPM的洋葱种子消毒方法，将洋葱种子浸泡在20mL/L的PPM溶液(pH＝2)中消毒24h，随后将其直接播种至含0.50mL/L PPM的1/2MS培养...
- 霍雨猛孙亚玲刘冰江王振宝张庶
- 不同皮色洋葱花青素合成酶基因片段的克隆及苗期表达分析
- 2022年
- 花青素合成酶(anthocyanidin synthase,ANS)是植物花青素生物合成途径的关键酶,可催化无色花色素向有色花色素转变。根据已报道的花青素合成酶基因序列设计引物,分别以不同皮色洋葱苗期总DNA和cDNA为模板进行克隆和序列比对,结果显示,从紫皮和黄皮洋葱中克隆到相同的目的条带,基因序列完全一致,且与已报道的ANS等位基因序列高度相似,确认克隆到AcANS基因片段序列。以Actin基因为内参,对AcANS在两种皮色洋葱苗期不同组织中的表达进行半定量分析,结果表明,AcANS在洋葱幼苗叶鞘中表达量最高,叶片中次之,根中不表达;紫皮洋葱中AcANS基因的表达量明显高于黄皮洋葱,这有利于紫皮洋葱积累更多的花色苷,从而使鳞茎产生颜色上的差异。本研究结果可为后续获得洋葱ANS基因全长序列、深入研究其功能奠定基础。
- 王振宝徐宏志刘冰江霍雨猛孙亚玲李艳伟吴雄杨妍妍
- 关键词：洋葱基因克隆苗期
