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包裹天然骨架CpG ODN和HBsAg的非磷脂脂质体疫苗的免疫效果: 非磷脂脂质体Novasome(Np)是由Brij52、胆固醇和油酸组成,可作为同时传递佐剂和抗原的载体.我们将HBsAg与天然骨架CpG ODN(phosphodiester CpG ODN,pdCpG ODN)包裹于N...; 何春艳刘庆良; 关键词：乙肝表面抗原乙肝疫苗免疫效果; 文献传递

非洲绿猴肾细胞(Vero)无血清细胞库的建立被引量：4: 2007年; 目的建立Vero细胞无血清细胞库。方法采用序贯适应和直接适应方法,将Vero细胞从有血清培养适应到无血清培养,建立Vero细胞无血清细胞主库和工作库,采用STR图谱并结合染色体计数对Vero细胞进行鉴别,并对Vero细胞无血清细胞库进行致瘤性和病毒外源因子检定。结果两种方法均能使Vero细胞适应到无血清培养,其中直接适应法可大大缩短适应代次,因此选择其作为建立Vero细胞无血清细胞库的方法。Vero细胞无血清主库和工作库的STR图谱与日本细胞库公布的Vero细胞STR图谱完全一致,Vero细胞库无外源因子污染,无致瘤性。结论Vero细胞无血清细胞库可用作生物制品生产用候选细胞基质。; 何春艳唐丽丽李嘉韩玉英吴书军周琳婷应通锋秦洁; 关键词：非洲绿猴肾细胞无血清培养细胞库

一种载体传递的佐剂化抗原及其制备方法: 本发明属生物技术免疫制剂领域，涉及疫苗的佐剂载体系统及其制备方法和应用。本发明将抗原佐剂化后，用脂质体载体包裹佐剂化抗原制备成佐剂化抗原载体系统，通过载体将佐剂和抗原同时传递，实验证实，在稀释给药后，能诱生很强的体液和细...; 何春艳刘庆良; 文献传递

包裹乙肝表面抗原和天然骨架CpG ODN的脂质体乙肝疫苗的免疫原性和安全性: CpG ODN在近年来得到了广泛的研究。但是还没有对体内天然磷酸二酯骨架的CpG ODN(pdCpG ODN)研究报告。在本研究中,我们致力于评价包裹的乙肝表面抗原(HBsAg)和pdCpG的非磷脂脂质体疫苗在BALB/...; 何春艳刘庆良; 关键词：磷酸二酯乙肝表面抗原脂质体; 文献传递

Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养被引量：6: 2007年; 目的探索Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养条件。方法在搅拌瓶中,选择合适的微载体,在无血清条件下培养Vero细胞和流感病毒。观察Vero细胞的生长状况,并检测流感病毒的血凝滴度。结果Vero细胞在Cytodex 3上生长最好,每个微载体上接种10个细胞为最佳接种浓度,以MOI=0.005和0.010 CCID50/细胞接种H1N1流感病毒后,在72h时,培养上清病毒血凝滴度达到最高。结论无血清条件下,Vero细胞在Cytodex 3上生长良好,流感病毒能在Vero细胞上成功培养。; 何春艳陈列胜吴书军唐丽丽; 关键词：无血清培养微载体流感病毒

Vero细胞流感病毒的大规模培养和纯化被引量：4: 2008年; 目的:采用反应器技术以细胞为基质培养流感病毒,并探索其纯化工艺。方法:采用5L反应器无血清条件下以Vero细胞为基质培养流感病毒,病毒收获后,经灭活、澄清,采用阴离子柱去除宿主DNA,亲和柱浓缩流感病毒,最后采用分子筛三步层析法进行纯化。结果:整个纯化工艺HA回收率达102%,蛋白降低率为95.3%,宿主蛋白降低率为99.77%,DNA的降低率为99.99%。结论:成功建立了一种细胞流感病毒的纯化工艺。; 何春艳陈则吴书军唐丽丽秦洁; 关键词：VERO细胞流感病毒纯化

包裹天然骨架CpG ODN和HBsAg的非磷脂脂质体疫苗的免疫效果被引量：7: 2004年; 非磷脂脂质体NovasomeR○(Np )是由Brij5 2、胆固醇和油酸组成 ,可作为同时传递佐剂和抗原的载体。我们将HBsAg与天然骨架CpGODN (phosphodiesterCpGODN ,pdCpGODN )包裹于Np后免疫BALB/c小鼠 ,检测其免疫效果。结果显示 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np在小鼠中诱导了很高滴度的抗 HBs抗体产生并诱生了HBsAgS2 8 3 9特异性的CTL ,而铝佐剂组和仅包裹HBsAg的Np组诱生的抗体滴度较低 ,未检测到CTL活力。抗体亚类分析结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np诱生的免疫应答类型与pdCpGODN剂量有关 ,较低剂量 (2 4 μgpdCpGODN )诱生的为IgG2a为主的Th1型应答 ,而较高剂量(4 7μgpdCpGODN )诱生的是Th1/Th2混合型应答。铝佐剂和仅包裹HBsAg的Np组诱生的是以IgG1为主的Th2型应答。此外 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np免疫小鼠脾淋巴细胞在体外HBsAg刺激培养后特异性增殖并分泌高水平的IFN γ。这些结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np能增强HBsAg的免疫原性 ,诱生体液 /细胞免疫均衡应答。; 何春艳刘庆良; 关键词：CPGODN HBSAG 免疫效果

采用可溶性噻唑盐WST-8检测细胞病变被引量：10: 2004年; 目的　建立一种简便和客观的检测细胞病变的方法。方法　活细胞代谢过程中 ,可溶性噻唑盐WST 8在电子载体 1 MethoxyPMS存在时被还原形成的可溶性甲染料 ,通过读取A4 50 6 30 间接检测活细胞的个数 ,可用于细胞病变的检测。将WST 8法用于rhIFN α1b效价的检测 ,并与结晶紫法和常规镜检相比较。结果　相关性研究表明在一定细胞浓度范围内 (2 0 0～ 5 5 0 0 0细胞孔 )Wish活细胞个数与A4 50 6 30 值呈线性相关 ,相关系数为 0 998。WST 8法检测rhIFN α1b的效价结果与结晶紫法和常规镜检结果基本一致 ,相关系数分别为 0 911(P <0 0 0 1)和0 94 5 (P <0 0 1)。结论　WST; 何春艳周琳婷陈延赵春女徐帆洪; 关键词：细胞病变效价

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何春艳