赵丽欣
- 作品数:8 被引量:24H指数:4
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 人α_1型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制被引量:4
- 1992年
- 应用杂交瘤技术建立了稳定分泌抗rHu-IFN-α1的单克隆抗体细胞系,体外连续传代8个月以上,在BALB/c鼠体内连续传代6个月以上,分泌抗体能力不变,特异性专一。11D2单抗为IgG2b,17D9单抗为IgG1。采用不同方法提纯抗体均得到90%纯度。11D2单抗中和效价为1024,17D9单抗为65534。制备亲和层析柱的最佳抗体浓度为5mg/ml,凝胶与抗体体积比为1:2,偶联率均达到95%~98%。11D2单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1干扰素不易被洗脱,不适宜制备亲和层析柱。17D9单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1结合的抗原容易被洗脱,适宜制备亲和层析柱。粗制rHu-IFN-α1经17D9单抗层析柱后,获得了电泳纯级制品,比原纯度增加15倍,平均收率93%,比活性平均值为6.5×106IU/mg。残余鼠IgG量符合规程要求。
- 曾国华韩亮赵丽欣崔云泽
- 抗基因工程干扰素单克隆抗体的纯化被引量:6
- 1993年
- 为获得纯化的单抗以制备高效的单抗亲和层析柱,采用盐析、DEAE-Sephacel离子交换层析和Sephacryl S-_(300)凝胶过滤层析方法,对IgG亚类不同的抗人α-1和α-2a型基因工程干扰素(rHu-IFN-α)单抗进行纯化。结果,11D_2(IgG_(20))的纯度为81.5%,活性回收率为58.3%;17D_9(IgG_1)的纯度为91.1%,活性回收率为73.1%;1A_5(IgG_1)的纯度为93.7%,活性回收率为96.0%;1B_5(IgG_1)的纯度为97.0%,活性回收率为73.7%;27A_7(IgG_(2a))的纯度为93.4%,活性回收率为79.0%。
- 韩亮刘淑玲赵丽欣张秀霞杨桂云张志曾国华
- 关键词:单克隆抗体层析干扰素提纯
- 应用McAb分析rHu-IFN-α_(2a)抗原表位与抗病毒作用的关系被引量:2
- 1996年
- 用自制的三系抗重组人α_(2a)型干扰素(rHu-IFN-α_(2a))单克隆抗体,经中和试验,ELISA竞争试验和ELISA夹心试验,对α_(2a)型干扰素抗原表位与抗病毒作用之间的关系,以及干扰素激活靶细胞时与受体作用的方式等进行了研究,并提出了以下设想:(1)α_(2a)型干扰素分子只有一种抗病毒活性区。(2)活性区内至少有2个抗原表位。(3)干扰素抗病毒活性是其整个活性区与靶细胞上受体作用的结果,活性区内任何一个表位都不能单独完成抗病毒的作用。(4)活性区内每个表位对整个活性区的活性都非常重要,缺一不可。
- 韩亮曾国华赵丽欣杨桂云刘淑玲张秀霞张志
- 关键词:单克隆抗体干扰素抗原表位抗病毒活性
- 抗人α2a型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制被引量:2
- 1998年
- 应用鼠-鼠杂交瘤细胞技术建立了三系稳定分泌抗重组人α2a型干扰素(rHu-IFN-α2a)单克隆抗体细胞系1A5、1B5和27A7。细胞连续传代和在液氮中冻存后复苏,分泌抗体能力不变,并且维持在较高水平,细胞培养上清效价1∶256~1∶4096,腹水1∶26×105~1∶27×108。Ig亚类测定,1A5和1B5McAb为IgG1,27A7为IgG2a。三系McAb均识别rHu-IFN-α2a和-α2b,与rHu-IFN-α1和正常大肠菌体裂解液无反应。竞争ELISA试验,三系McAb分别针对rHu-IFN-α2a上三个不同表位。同McAb建立双抗体夹心ELISA对rHu-IFN-α2a和-α2b均可检测到150pg/ml,约10IU/ml的敏感度。用提纯的单抗制备亲和层析柱,单抗偶联率95%以上。三系单抗亲和层析柱均可将粗制rHu-IFN-α2a提纯到97%以上纯度。平均回收率为:1A5单抗柱902%,1B5单抗柱953%,27A7单抗柱947%。比活性平均值依次为194×108IU/mg,197×108IU/mg和164×108IU/mg,残余鼠IgG量均符合规程要求。纯化rHu-IFN?
- 韩亮曾国华赵丽欣杨桂云刘淑玲张秀霞张志李金凤
- 关键词:重组人干扰素单克隆抗体纯化
- 分泌型重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子中试发酵工艺的研究被引量:3
- 1997年
- 通过对GM-CSF工程菌W3100发酵条件的研究,优化了培养及表达条件,使工程菌W3100在30L发酵罐可表达分泌型GM-CSF1.5g/L左右,占菌体总蛋白的25%以上,纯化后的比活大于2.0×107。
- 林殿海杨桂云迟春萍李健平赵丽欣张秀霞
- 关键词:GM-CSF粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 抗rHu-IFN-αMcAb亲和常数的测定被引量:4
- 1997年
- 采用ELISA间接法检测抗原-抗体反应系统中游离抗体量的方法,对本实验室制备的5系抗rHu-IFN-αMcAb进行了亲和力测定,获得比较准确的McAb亲和常数。
- 韩亮曾国华刘淑玲赵丽欣
- 关键词:单克隆抗体
- 实验性T多凝集红细胞的血型检测被引量:1
- 1990年
- 人红细胞经神经氨酸酶处理后,与A、B、A B、O型成人血清及人血清制备的血型试剂都出现血凝,抗A、抗B血型单克隆抗体只与相应红细胞凝集;抗T单抗和花生血凝素只与T激活红细胞反应;抗M、抗N单抗和兔免疫血清试剂与T激活红细胞无凝集。进一步证实了人血清及其制备的血型试剂中含有抗T抗体。用血型单克隆抗体检测T激活红细胞,能得到正确的ABO定型;T激活红细胞的MN抗原已被神经氨酸酶破坏,用单抗和兔免疫血清试剂抗M、抗N都不能判断其原来MN血型。
- 李勇朱建春张志韩亮赵丽欣杨桂云刘淑玲曾国华
- 人类ABO血型系统-A抗原单克隆抗体的研制被引量:5
- 1989年
- 人类ABO血型的鉴捌,在临床医学、法医学、考古学及人类遗传学等工作中都是常规。传统的抗A、抗B标准血清均来自人血,全国每年用于制备ABO血型试剂所需血清量是十分可观的。应用杂交瘤技术制备血型单克隆抗体,为血型鉴别提供了新的有用工具,将为社会节省大批人血。本文报道的A抗原单克隆抗体,其生物活性稳定,可以取代传统抗A血清,作为新的血型检测试剂。
- 曾国华刘淑玲赵丽欣张秀霞王颖