刘宇
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脑胶质瘤中 CDK4 和 β-Catenin 表达及临床意义的研究被引量：2
- 2015年
- 目的 研究脑胶质瘤中CDK4和β-Catenin的表达情况及相关性. 方法 采用免疫组织化学法检测45例脑胶质瘤组织和8例癌旁正常组织中CDK4和β-Catenin的表达,并将其按WHO 2000年神经系统肿瘤病理学分级标准进行分类分级,进行统计学分析. 结果 45例脑胶质瘤组织中CDK4和β-Catenin 阳性表达率分别为73.3%和77.8%,与癌旁正常组织之间的差异具有统计学意义（ P 〈0.05）.CDK4和β-Catenin的表达均与WHO分级和组织学分型相关（P〈0.05）,与患者性别、年龄之间差异无统计学意义（P〉0.05）. CDK4和β-Catenin的表达呈正相关（r=0.52,P〈0.01）,二者表达均阳性患者恶性程度高. 结论 脑胶质瘤中CDK4和β-Catenin的表达增高可能与胶质瘤的恶性变和恶性胶质瘤的发生有关,二者相结合有望成为胶质瘤恶性评估的重要指标.
- 董天华沈欣梁亚男刘宇佟丹丹
- 关键词：脑胶质瘤CDK4Β-CATENIN
- 大鼠SCN5A基因内含子1 +204 bp^+757 bp转录调控功能分析被引量：1
- 2007年
- 目的克隆大鼠心肌SCN5A基因5′端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp^+757 bp、+204 bp^+385 bp和+204 bp^+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性。结果成功构建大鼠心肌SCN5A基因5′端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍。结论SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp^+385 bp为正调控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控。
- 刘宇李晖董钦张振明李凤兰李金波马宁
- 关键词：SCN5A基因转录调控顺式作用元件
- 骨髓间充质干细胞对致脑脊髓炎性MBP68-86特异性T淋巴细胞的调节作用
- 2012年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）对致脑脊髓炎性MBP68-86特异性T淋巴细胞的抑制和激活作用。方法全骨髓贴壁法提取、培养Lewis大鼠股骨、胫骨内的MSCs；建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）动物模型，对照组大鼠仅免疫完全弗氏佐剂（CFA）；EAE大鼠免疫10—11d后，MBP68-86特异性T淋巴细胞被取出进行体外T淋巴细胞增值试验。从Lewis大鼠中得到的间质干细胞分别按下列要求预培养：在24孔板中与T细胞比值：1：1（1×10^6骨髓基质细胞／T细胞1×10^6）1：5、1：10、1：50或1：100；ELISA方法检测淋巴细胞培养上清液。结果同种同基因的MSCs以MSCs与效应T细胞比例为1：1、1：5、1：10时共培养能够显著抑制MBP68-86特异性T淋巴细胞的增殖能力，与没有加入MSCs的单独MBP68-86特异性T淋巴细胞组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论MSCs在高密度（MSCs／T细胞数比≥1：10）的情况下，对MBP68-86一特异性T细胞表现为抑制作用；在较低的密度（≤1：50）时，表现为刺激的作用。
- 杨琳丽王广友詹晓霞刘宇王心悦孙博李呼伦
- 关键词：骨髓间充质干细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎免疫调节
- 低氧导致培养心肌细胞Na^+通道基因SCN5A mRNA表达改变被引量：3
- 2006年
- 目的研究低氧培养大鼠心肌细胞Na+通道基因SCN5A mRNA表达的变化,并探讨其与丙二醛(M alond ialhyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)活性的关系。方法培养大鼠心肌细胞,检测各组培养液氧分压。用RT-PCR检测SCN5A mRNA表达,检测培养液MDA含量和细胞SOD活性。结果与对照组相比:SCN5A mRNA相对表达量低氧1 h和6 h组显著增高(P<0.001)、低氧12 h和24 h组显著降低(P<0.001);MDA含量显著增高而SOD活性显著降低。结论心肌细胞Na+通道基因SCN5A在低氧1 h和6 h mRNA表达上调,而在低氧12 h和24 h mRNA表达下调,且与脂质过氧化和SOD相关。
- 陈诗慧李晖石广森李凤兰金剑峰范启明刘宇张振明马宁
- 关键词：心肌细胞低氧脂质过氧化
- 重组人α降钙素基因相关肽的克隆与表达(英文)
- 2004年
- 通过PCR方法从人类基因组中扩增出编码hαCGRP的片段,将该片段定向克隆到pET-32a(+)载体上,构建pET-hαCGRP重组质粒。转化E.coli JM109菌株,利用酶切和测序方法筛选后,经IPTC诱导再转化E.coli BL21trxB(DE3)pLYsS菌株。SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物,最后通过扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验来检测重组hαCGRP扩张血管的活性。结果表明,重组质粒含hαCGRP成熟肽编码基因序列(111bp),符合预想结果;表达出21 kD的融合蛋白,且主要以可溶性形式存在,其粗提物具有扩张血管能力。重组hαCGRP的成功表达为下一步纯化及研制基因工程药物奠定了重要基础。
- 赵丹丹于晓光班莺徐华锋林平邹海峰刘宇
- 关键词：PCR人类基因组融合蛋白克隆基因工程
- 实验性自身免疫性脑脊髓炎发病过程中淋巴细胞相关因子及转录因子的表达被引量：1
- 2014年
- 目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)发病过程中淋巴细胞相关因子及转录因子的表达情况。方法将C56BL/6小鼠分为免疫髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)特异性免疫乳剂的EAE组与免疫未加MOG35-55多肽的免疫乳剂的CFA组,每组16只,分别取100μl免疫乳剂,经腋窝皮下免疫小鼠,于免疫当天及第2天经小鼠尾静脉注射200 ng百日咳毒素(pertussis toxin,PT),建立实验动物模型,并于免疫后进行临床评分;分别于免疫后第7、14和21天取小鼠的淋巴结和脾脏,RT-PCR法检测淋巴细胞相关因子及转录因子IL-17、IFNγ、RAR相关孤核受体γ(RAR-related orphan receptor gamma,RORγ)和T盒子转录因子be(tT-box transcription factor bet,T-bet)基因mRNA转录水平的变化。结果成功建立EAE模型,从免疫后第7天起出现临床症状,EAE组临床评分明显高于CFA组(P均<0.05);免疫后第7、14和21天,EAE组淋巴结和脾脏淋巴细胞中IL-17、IFNγ、RORγ、T-bet基因mRNA转录水平均明显高于CFA组。结论 IL-17、IFNγ、RORγ和T-bet参与EAE疾病的发生发展,且表达量的增加与疾病加重有相关性。
- 刘宇杨金凤詹晓霞王心悦孙博
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎淋巴细胞白介素-17干扰素Γ
- RBMS3基因的功能研究进展被引量：1
- 2015年
- 在许多实体瘤中常发生3p的缺失,在此位置上存在多个肿瘤抑制基因。RBMS3位于这一位置。它广泛表达于胚胎和成人机体,并参与软骨的形成,促进肝脏的纤维化。近两年来,RBMS3在少数鳞癌中被报道表达减少,并于不良的预后相关。对于RBMS3的功能提出了新的见解,现将RBMS3基因的功能研究进展进行综述。
- 梁亚男刘宇佟丹丹
- 关键词：胚胎发育肝纤维化肿瘤发生抑癌基因
- SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段的克隆与功能分析
- 2007年
- 目的为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对照,瞬时转染人胚肾母细胞(HEK293)和小鼠胚胎心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶活性。结果成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比,在HEK293细胞无明显差别(P>0.05),在H9C2细胞荧光活性增高(22.5±5.4)倍(P<0.01)。结论大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件。
- 张振明李晖董钦刘宇李凤兰马宁李金波刘端阳舒畅逄淑超
- 关键词：SCN5A基因转录调控顺式作用元件荧光素酶报告基因
- B细胞在MOG_(35-55)诱导的小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨B细胞参与MOG35-55诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encelphalomyelitis,EAE)小鼠模型的可能机制。方法采用MOG35-55肽段免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型;采用临床评分检测EAE模型建立情况,HE和快蓝染色观察脊髓炎性细胞浸润和脱髓鞘状况,流式细胞术检测B细胞活化程度,免疫组化法检测脾组织生发中心的形成,ELISA法检测IgG1、IgG2a和IgG2b的分泌水平。结果成功建立了MOG35-55诱导的EAE小鼠模型,EAE组临床评分明显高于弗氏完全佐剂(Complete Freund adjuvant,CFA)组(P<0.001),EAE组小鼠脊髓可见明显的炎性细胞浸润和脱髓鞘斑块;在EAE组发病起始期(免疫后第5天和第8天),外周免疫器官活化B细胞表达水平明显高于CFA组(P<0.01);在发病高峰期(免疫后第15天)EAE组小鼠脾中形成生发中心,而CFA组未见生发中心形成,且外周血抗MOG35-55抗体分泌水平明显高于CFA组(P<0.005)。结论 MOG35-33肽段可以诱导B细胞活化,进而可能通过发挥体液免疫作用介导EAE疾病的发生。
- 詹晓霞杨金凤刘宇王心悦谢晓丽孙博李呼伦
- 关键词：B淋巴细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎多发性硬化
