刘燕芳
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 软骨形成过程中参与Hedgehog信号通路的microRNA的分析被引量：2
- 2017年
- 间充质细胞增殖并聚集(condensation)是软骨形成的第一步,大量研究表明。在这一过程中,Hedgehog信号通路扮演着重要角色。但是,哪些Hedgehog信号通路相关的微小RNA(microRNA)参与这一过程目前还不清楚。本研究采用Hh信号通路特异性抑制剂(cyclopamine)和激活剂(purmorphamine)分别处理原代培养的胚胎期小鼠肢芽间充质细胞,经细胞微团培养(micromass culture),对间充质细胞聚集过程进行microRNA表达差异化芯片分析。研究找到了Hh信号通路相关的特异性microRNA:miR-494和miR-1906,并且我们发现在hedgehog信号被特异性激活后,miR-494和miR-1906的表达量显著下降,hedgehog信号被抑制后,miR-494和miR-1906的表达量则上升,呈现稳定的负相关变化趋势。通过microRNA数据库预测分析发现Gli3基因是miR-494潜在的靶基因。尽管初步体外验证试验没有发现miR-494对Gli3的直接调控,但是,这一发现为进一步探索microRNA在软骨发育过程中的功能和调控机制的研究提供了有价值的参考依据。
- 王磊刘燕芳王帅秦胜营马钢
- 关键词：软骨形成HEDGEHOG信号通路MICRORNA
- IHH基因多点突变病毒载体构建及表达
- 2013年
- 目的:构建携带IHH WT和E95K、E95G、△E95、D100E突变体的RCAS病毒载体,并验证其有效性;优化RCAS病毒收集方法。方法:PCR扩增得到人IHH基因,采用原位杂交和半定量PCR的方法来验证上述载体能否过表达IHH mRNA;采用细胞裂解法收集RCAS-GFP病毒,通过鸡胚注射、冰冻切片观察的方法了解鸡胚感染情况。结果:构建的上述RCAS病毒载体在鸡胚细胞成功表达;优化了RCAS病毒收集方法,使最终滴度达108IU/ml。结论:该研究为在鸡胚肢芽中过表达不同IHH突变体蛋白打好了基础。
- 刘燕芳陶一昕贺林马钢
- 关键词：点突变鸡胚
