岑柏宏
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用于沉默Caspase－2mRNA表达的siRNA分子
- 本发明公开了一组用于沉默Caspase‑2 mRNA表达的siRNA分子。所述的siRNA分子为siCASP2‑1、siCASP2‑2或siCASP2‑3；其反义链由19‑29个核苷酸组成，正义链由15‑21个核苷酸组成...
- 季爱民岑柏宏黎权辉陈佳扬
- 文献传递
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方...
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方...
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
- 文献传递
- siRNA介导的PD-L1沉默可增强人CD8~＋T淋巴细胞的体外杀伤作用被引量：1
- 2018年
- 目的设计并筛选多条可高效特异性降低肿瘤细胞表面沉默程序性死亡受体-配体1(PD-L1)表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并研究其增强人CD8^+T淋巴细胞对人胶质瘤细胞(U87 MG)免疫杀伤作用。方法根据siRNA设计法则,并通过siDirect软件在线设计针对PD-L1基因的几种不同的siRNA序列,并运用BLAST进行同源性分析,最终确定候选序列;通过RT-qPCR、Western blot及流式细胞术实验,选出高效抑制PD-L1 mRNA及蛋白表达的siRNA序列;通过流式细胞术及CCK8检测PD-L1siRNA沉默U87 MG细胞的PD-L1后,人CD8^+T细胞对U87 MG的细胞凋亡及增殖的影响。结果设计了10条针对人PD-L1基因具有不同核苷酸序列的siRNA。采用RT-qPCR、Western blot及流式细胞术在mRNA及蛋白水平上检测siRNA的沉默效率,与对照组相比,siPD-L1-1、siPD-L1-2、siPD-L1-3、siPD-L1-4、siPD-L1-5及siPD-L1-8均显著降低U87 MG中PD-L1基因的表达(P<0.05),其中siPD-L1-3的沉默效率最高。与对照组相比,流式细胞术及CCK8结果显示,siPD-L1-3及siPD-L1-8均可显著增强人CD8^+T细胞对U87 MG细胞的杀伤作用,且该杀伤作用可显著抑制U87 MG细胞增殖(P<0.05)。结论本文设计并筛选了能有效沉默PD-L1基因表达的siPD-L1-1、siPD-L1-2、siPD-L1-3、siPD-L1-4、siPD-L1-5及siPD-L1-8的6条序列,其中siPD-L1-3和siPD-L1-8可高效增强T淋巴细胞对U87 MG细胞免疫杀伤作用,且siPD-L1-3的作用最为显著。本文设计的PD-L1siRNA分子可以用于设计和制备预防、治疗多种癌症的核酸药物。
- 王震黄文岑柏宏岑柏宏廖路敏黎国仙季爱民
- 关键词：神经胶质瘤细胞CD8+T细胞
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方法用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注脐静脉腔消化15 min,收集细胞并用内皮细胞专用培养基(含5%内皮细胞基础培养基、1%内皮细胞生长因子、1%青链霉素),置37℃,5%CO2培养箱培养。在倒置显微镜下观察细胞形态特点,并用细胞免疫荧光方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术检测所得HUVECs的纯度,并检测0%、0.1%、0.5%、1%血清浓度的培养基饥饿处理0、6、12、18、24 h对细胞周期的影响。结果 0.1%Ⅱ型胶原酶消化可以得到HUVECs,细胞培养呈典型的铺卵石状排列,细胞较密处呈涡旋状排列。免疫荧光检测细胞VIII因子相关抗原表达呈阳性。流式检测细胞纯度高达99.67%。不同血清浓度培养基培养6 h可获得70%左右的G0/G1期细胞;培养12 h可获得80%~90%的G0/G1期细胞;培养18、24 h可获得95%左右的G0/G1期细胞。结论 0.1%Ⅱ型胶原酶充盈静脉管腔可以获得高纯度的原代HUVECs。完全无血清培养基培养12 h即可获得纯度超过80%的G0/G1期HUVECs。
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
