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徐石
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
香港大学
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发文基金:
浙江省医药卫生科学研究基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
项涛
浙江大学医学院附属第一医院
黄熹
浙江大学医学院附属第一医院
许攀峰
浙江大学医学院附属第一医院
张维晨
浙江大学医学院附属第一医院
陆森
浙江大学医学院附属第一医院
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作者
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刘辉
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徐石
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2016
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淫羊藿苷通过AKT/P53通路抑制S-亚硝基谷胱甘肽诱导的内皮细胞凋亡
被引量:1
2016年
目的观察淫羊藿苷(ICA)对S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)诱导的内皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法内皮细胞株EA.hy926由浙江大学提供,将细胞按整群随机抽样法,分成空白对照组、损伤组(GSNO组)、不同浓度(高、中和低浓度)ICA干预组(ICA组)以及蛋白激酶B(AKT)通路的蛋白酶抑制剂LY294002抑制高、中和低浓度ICA组。空白对照组为EA.hy926细胞于96孔板培养,未予任何干预;GSNO组为EA.hy926细胞于96孔板培养48 h后给予1 mmol/L GSNO处理;高、中和低浓度ICA干预组为EA.hy 926细胞于96孔板培养24 h后分别加入10、1和0.1 μmol/L的ICA预保护24 h,再给予1 mmol/L GSNO处理;LY294002抑制高、中和低浓度ICA组为EA.hy 926细胞于96孔板培养24 h后分别给予高(10 μmol/L)、中(1 μmol/L)和低浓度(0.1 μmol/L)ICA干预的同时加入1 μmol/L LY294002,再作用24 h后给予1 mmol/L GSNO进行干预。噻唑蓝染色(MTT)法测定各组细胞存活率。根据不同试剂盒要求,检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)活性和线粒体膜电位。Western blot法检测各组细胞AKT/磷酸化AKT(p-AKT)、人抑癌蛋白53(P53)、细胞色素C(CYC)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)/磷酸化eNOS(p-eNOS)以及procaspase-3/caspase-3蛋白表达水平。结果(1)各组EA.hy926细胞存活率:GSNO组细胞存活率明显低于空白对照组(P〈0.01),而高、中和低浓度ICA组均明显高于GSNO组(P均〈0.01)。(2)各组EA.hy926细胞LDH活性:GSNO组的细胞LDH活性明显高于空白对照组[(142.65±5.56) U/L比(50.01±3.42)U/L,P〈0.05],而高、中和低浓度ICA组则均明显低于GSNO组[分别为(98.02±3.52)、(105.29±6.89)和(117.16±4.27) U/L比(142.65±5.56) U/L,P均〈0.05],且降低LDH活性的效果具有浓度依赖性。(3)各组EA.hy926细胞MDA含量:
黄熹
项涛
徐石
陆森
刘辉
张维晨
项鹏辉
许攀峰
关键词:
内皮细胞
细胞凋亡
淫羊藿苷
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