谢琅
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
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- 竹荪多糖对亚砷酸钠致人肝细胞毒性的拮抗作用被引量：3
- 2016年
- 目的探讨竹荪多糖对亚砷酸钠致人胎肝（L-02）细胞毒性的拮抗作用。方法将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于含不同浓度[0（对照）-80μmol/L]亚砷酸钠和[0（对照）-160μg/ml]竹荪多糖＋10μmol/L亚砷酸钠的培养液中暴露24 h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞存活率。将处于对数生长期的L-02细胞分设对照（培养基）组、亚砷酸钠（10μmol/L）组、竹荪多糖（80μg/ml）组和联合处理（10μmol/L亚砷酸钠＋80μg/ml竹荪多糖）组,暴露24 h后,检测细胞培养液中丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原性谷胱甘肽（GSH）、细胞色素C（Cyt-C）水平和天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）的活力及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白、Bcl-2相关X（Bax）蛋白的表达水平。结果与对照组比较,除2.5和5μmol/L亚砷酸钠染毒组外,10-80μmol/L亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势。与对照组比较,40、80和160μg/ml竹荪多糖联合处理组L-02细胞的存活率均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中,以80μg/ml竹荪多糖的拮抗效果最好。与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平升高,T-SOD、CAT及GSH的水平降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而竹荪多糖组L-02细胞培养液中上述指标均无明显变化。与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平降低,T-SOD、CAT及GSH的水平升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞胞内Caspase-3的活力升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而竹荪多糖组L-02细胞细胞内Caspase-3的活力无明显变化。与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞内Caspase-3
- 杨红艳罗鹏曾丹沈祥春胡婷肖智文谢琅黄元庆
- 关键词：亚砷酸钠线粒体细胞凋亡
- 组蛋白H4K20甲基化修饰对砷致HaCaT细胞DNA双键断裂损伤的影响被引量：8
- 2017年
- [目的]观察亚砷酸钠(NaAsO_2)对人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)DNA双链断裂损伤、组蛋白H4第20位赖氨酸一、二甲基化(H4K20me1、H4K20me2)修饰水平的影响,探讨H4K20me1、H4K20me2修饰在砷致DNA双键断裂损伤中的作用。[方法]体外常规培养HaCaT细胞,以0.00、1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L NaAsO_2连续处理HaCaT细胞24 h,10.00μmol/L NaAsO_2处理HaCaT细胞0、6、12、24 h,其中以0.00μmol/L浓度组和0 h为空白对照组。采用中性单细胞凝胶电泳法检测各组HaCaT细胞DNA双链断裂损伤水平(尾部DNA百分含量、Olive尾矩);免疫印迹法检测各组H4K20me1、H4K20me2蛋白表达水平。[结果]HaCaT细胞染砷24 h后,DNA双链断裂程度在5.00、10.00μmol/L浓度组高于对照组(P<0.05);H4K20me1/me2蛋白表达水平在2.50、5.00、10.00μmol/L浓度组低于对照组(P<0.05)。10.00μmol/L NaAsO_2处理HaCaT细胞0、6、12和24 h后,DNA双链断裂程度在12、24 h染砷组高于对照组(P<0.05),H4K20me1、H4K20me2蛋白表达水平在6、12、24 h较对照组降低(P<0.05)。尾部DNA百分含量与H4K20me1、H4K20me2修饰水平呈负相关(r=-0.955、-0.855,均P<0.05),Olive尾矩与二者亦呈负相关(r=-0.940、-0.841,均P<0.05)。[结论]砷可导致HaCaT细胞DNA双键断裂损伤和H4K20me1、H4K20me2表达改变,提示砷所致DNA损伤可能与组蛋白H4K20甲基化修饰有关。
- 谢琅李军李成贵陈丽马璐张爱华杨光红杨红艳
- 关键词：亚砷酸钠HACAT细胞DNA双链断裂
- 组蛋白H4第20位赖氨酸甲基化修饰与燃煤砷暴露人群DNA损伤修复的关系被引量：6
- 2016年
- 目的观察贵州省燃煤污染型砷中毒病区砷暴露者外周血细胞组蛋白H4第20位赖氨酸（H4K20）甲基化修饰水平及其与血细胞DNA损伤的关系，为揭示砷抑制DNA损伤修复机制研究提供依据。方法以贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区交乐村为调查点，通过健康体检，选择115例砷暴露者为砷暴露组；同时选择相邻的非病区上坝田村53例居民作为对照组。采集观察对象发样、外周血，提取血细胞组蛋白；微波消解-电感耦合等离子质谱（ICP—MS）法测定发样中砷元素的含量；酶联免疫吸附实验（ELISA）检测外周血细胞组蛋白H4K20一、二、三甲基化（H4K20me1、me2、me3）修饰水平；单细胞凝胶电泳（SCGE）法检测DNA损伤。结果发砷含量测定结果：与对照组[中位数（M，四分位数）：0．12（0．08～0．18）μg／g]比较，砷暴露组发砷[M（四分位数）：0．30（0．19-0．46）μg／g]含量明显升高（F=11．968，P〈0．05）。H4K20甲基化修饰水平检测结果：与对照组（0．44±0．14、0．99±0．41、1．06±0．33）比较，砷暴露组H4K20mel修饰水平（0．60±0．29）升高（F=2．513，P〈0．05）、H4K20me2修饰水平（0．75±0．26）降低（F=4．707，P〈0．05）、H4K20me3修饰水平（1．20±0．62）变化不明显（F=0．582，P〉0．05）。DNA损伤检测结果：与对照组[M：2．12、1．16]比较，砷暴露组尾部DNA百分含量（TailDNA％，M：10．75）、Olive尾矩（Olivetailmoment，M：11．69）均明显升高（F=9．307、9．457，P均〈0．05）。相关性分析：观察对象H4K20me1修饰水平与发砷含量呈正相关r=0．214，P〈0．05），H4K20me2修饰水平与其呈负相关关系（r=-0．224，P〈0．05）；H4K20me1修饰水平与DNA损伤水平（TailDNA％、Olivetailmoment）均呈正相关关系（r=0．383、0．380，P均〈0．05），H4K20me2修饰水平与其均呈负相关关系（r=-0．290、-0．298，P均〈0．
- 李成贵李军张爱华马璐于春谢琅杨光红
- 关键词：砷中毒甲基化DNA损伤DNA修复
- 赖氨酸甲基转移酶PR-Set7及S-腺苷甲硫氨酸在亚砷酸钠调控人永生化皮肤角质形成细胞碱基切除修复基因H4K20me1修饰中的作用被引量：1
- 2019年
- 目的探讨赖氨酸甲基转移酶PR-Set7和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)对亚砷酸钠调控人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)碱基切除修复(BER)基因组蛋白H4第20位赖氨酸一甲基化(H4K20me1)修饰水平的影响。方法体外培养HaCaT细胞,设对照(24 h)组、NaAsO2(10.00μmol/L,24 h)染毒组、赖氨酸甲基转移酶PR-Set7小干扰RNA(siPR-Set7)干扰组(50 nmol/L,siPR-Set7,48 h)、siPR-Set7+NaAsO2组(50 nmol/L siPR-Set7干扰48 h后,10.00μmol/LNaAsO2处理24 h)和SAM+NaAsO2组(SAM处理1 h后10.00μmol/LNaAsO2处理24 h),染色质免疫共沉淀(CHIP)检测N-甲基化嘌呤-DNA-糖基化酶(MPG)、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP1)、X射线修复交叉互补基因-1(XRCC1)基因启动子区(CHIP1、CHIP2区域)和编码区(CHIP3、CHIP4区域)H4K20me1修饰水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA表达水平。结果与对照组比较,NaAsO2染毒组、siPR-Set7组和siPR-Set7+NaAsO2组MPG、PARP1基因启动子CHIP1区及XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO2组MPG、PARP1基因启动子CHIP1和CHIP2区及XRCC1基因启动子CHIP1区H4K20me1富集减少;与NaAsO2染毒组比较,siPR-Set7+NaAsO2组PARP1基因启动子CHIP1区、XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO2组PARP1基因启动子CHIP1区及XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集增加(P均<0.05)。与对照组比较,NaAsO2染毒组、siPR-Set7组和siPR-Set7+NaAsO2组MPG基因编码CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO2组MPG基因编码CHIP3和CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3区H4K20me1富集减少;与NaAsO2染毒组比较,siPR-Set7+NaAsO2组MPG基因编码CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO2组MPG、PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集增加(P均<0.05)。与对照组比较,NaAsO2染毒组、siPR-Set7组、siPR-Set7+NaAsO2组和SAM+NaAsO2组MPG、XRCC1、PARP1 mRNA表达降低;与NaAsO2染毒组比较,siPR-S
- 王祺谢琅丁雪娇李昌哲李军
- 关键词：亚砷酸钠S-腺苷甲硫氨酸碱基切除修复
- H4K20me1与碱基切除修复相关基因在燃煤砷致DNA损伤修复中的作用
- 目的:了解燃煤污染型地方性砷中毒患者H4K20me1修饰水平与碱基切除修复基因mRNA的转录水平,并分析其与DNA损伤的关系,为深入揭示砷致DNA损伤修复机制提供科学依据。方法:采集自愿手术治疗的47例燃煤污染型砷中毒患...
- 李军谢琅丁雪娇马璐王祺张爱华
- H3K36me3调控O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因与砷致人皮肤角质形成细胞DNA损伤的关系被引量：3
- 2017年
- 目的了解亚砷酸钠（NaAsO2）对人皮肤角质形成细胞（HacaT细胞）组蛋白H3第36位赖氨酸三甲基化（H3K36me3）修饰水平、O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）基因mRNA转录水平的影响。探讨H3K36me3调控MGMT基因转录与砷致DNA损伤的关系，为砷中毒预防和治疗提供新思路和科学依据。方法1．25、2．50、5．00、10．00μmol／L NaAsO2处理HaCaT细胞24h，10．00μmol／L NaAsO2处理HaCaT细胞6、12、24h，剂量以0．00μmoL／L、时间以0h为对照组。采用单细胞凝胶电泳法检测HaCaT细胞DNA损伤情况；免疫印迹法检测H3K36me3总体修饰水平；实时荧光定量PCR检测MGMT基因mRNA表达水平：定量染色质免疫沉淀技术检测MGMT基因编码区（CHIP1、CHIP2区域）H3K36me3修饰水平。结果①DNA损伤检测结果：2．50、5．00、10．00μmol／L染砷组HaCaT细胞彗星尾部DNA百分含量（Tail DNA％。11．83±1．15、16．85±2．52、24．23±2．75）、彗星尾矩（Olive tail moment，OTM，10．90±1．13、16．19±2．26、23．83±2．79）明显高于对照组（0．00μmoL／L，2．40±0．51、2．26±0．40，P均〈0．05）；10．00μmoL／L NaAsO2处理HaCaT细胞12、24h，Tail DNA％（15．51±1．92、24．18±2．42）、OTM（13．58±2．04、23．14±2．11）明显高于对照组（0h，3．66±1．02、3．38±1．00，P均〈0．05）。②H3K36me3总体修饰水平检测结果：与对照组（0．00μmol/L，100．00±0．00）比较，2．50、5．00、10．00μmol／L染砷组H3K36me3总体修饰水平（60．59±9．75、57．82±11．28、39．45±7．09）降低（P均〈0．05）；与对照组（0h，100．00±0．00）比较，12、24h染砷组H3K36me3总体修饰水平（48．47±9．67、47．75±6．98）亦降低（P均〈0．05）。③不同剂量染砷组HacaT细胞H3K36me3总体修饰水平与Tail DNA％、OTM均呈负相关关系（r=-0．897、-0．903，P均〈0．05）。④MGMT基因mRNA表达水平检测结果：与对�
- 李军马璐谢琅陈丽张爱华
- 关键词：亚砷酸盐类组蛋白类DNA损伤
