杨江伟 作品数:39 被引量:91 H指数:6 供职机构: 甘肃农业大学生命科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 甘肃省高等学校基本科研业务费项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
马铃薯抗旱相关基因的发掘及功能鉴定 马铃薯是干旱胁迫敏感型作物,其抗旱性是由多基因控制的复杂数量遗传性状。马铃薯是同源四倍体,由于其抗旱机制的复杂性以及研究手段的局限性,目前虽然已克隆和揭示了部分与马铃薯抗旱相关的基因及调控途径,但对马铃薯抗旱机制的研究仍... 司怀军 杨江伟 张宁 周香艳 文义凯 唐勋 武亮亮关键词:马铃薯 抗旱 基因 马铃薯脱落酸受体StPYR1基因生物信息学分析及过表达载体构建 被引量:1 2018年 以马铃薯基因数据库中基因ID为PGSC0003DMT400005378 (落酸受体PYR1基因)的核苷酸序列作为原始序列,用在线比对软件NCBI进行Blast比对其在拟南芥、番茄、烟草等物种中同源序列,以同源性为100%的核苷酸序列(GenBank accession No. XM_006361126.2)进行生物信息学分析,并作为模板序列设计引物,以马铃薯栽培品种‘陇薯3号’无菌试管薯为实验材料,用RT-PCR的方法获得StPYR1基因的cDNA序列,构建了其过表达载体pCPB-StPYR1,取得的结果可为研究StPYR1基因在马铃薯块茎休眠调控中的作用提供基础。 赵仕荣 杨江伟 唐勋 张宁 文义凯 周香艳 司怀军关键词:脱落酸 马铃薯 休眠 马铃薯StCCaMK90基因的生物信息学分析及过表达载体的构建 被引量:1 2019年 Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶(calcium and calmodulin-dependent protein kinases,CCaMKs)是一种能参与植物逆境信号传导过程的激酶。本研究通过生物信息学分析该蛋白分子量为6.6 kD,理论等电点为8.25,推测为亲水性蛋白,含有跨膜结构域。同源性分析显示,该基因编码蛋白与番茄CCaMK5具有较高的同源性。以马铃薯栽培品种‘Favorita’的cDNA为模板,扩增出StCCaMK90基因,利用双酶切及质粒重组法构建过表达重组载体p CPB-CCaMK90,为后期通过遗传转化方法研究CCaMK的功能提供科学依据。 陈馨 朱熙 朱熙 洪旭升 杨江伟 杨江伟 司怀军关键词:生物信息学 甘肃红豆草BAN基因克隆与双标记选择表达载体构建 被引量:8 2016年 为探讨编码花青素还原酶BAN基因的功能及其与缩合单宁合成的关系,根据BAN基因序列设计特异引物,采用RT-PCR技术获得甘肃红豆草BAN的相似基因;利用生物信息学相关软件分析,预测其c DNA序列编码的蛋白质结构和功能;采用Real-time PCR法检测该基因在甘肃红豆草各组织中的表达;构建含有BAN基因的双标记选择载体。结果表明,克隆的BAN基因与报道的BAN基因序列相似性达到99.41%,其ORF长为1 020 bp,可编码339个氨基酸残基,具有花青素还原酶保守结构域和重要功能位点;三级结构预测显示,预测模型与花青素还原酶单体结构(C2RH8A)相似,属于短链脱氢/还原酶超家族成员,表明其可能具有花青素还原酶的功能。BAN基因在各组织中均表达,其表达量依次为荚果、叶、蕾、花、茎。以此为靶序列,构建携带抗除草剂bar和绿色荧光蛋白GFP基因的双标记选择植物表达载体,将为缩合单宁合成、代谢的进一步研究及抗除草剂和抗臌胀病牧草新品种的培育奠定基础。 陈春艳 马晖玲 董文科 杨江伟 李玉珠 姜寒玉 冯玉兰关键词:甘肃红豆草 基因克隆 马铃薯HD-Zip Ⅰ家族ATHB12基因的克隆及功能鉴定 被引量:6 2016年 HD-Zip I是一类植物特异转录因子,在植物应对外界逆境胁迫过程中有重要的调控作用。本研究从马铃薯栽培品种甘农薯2号中克隆了HD-Zip I转录因子ATHB12基因,其开放阅读框为759 bp,编码252个氨基酸残基。该基因位于马铃薯第1染色体,其启动子区含有ABRE、LTRECOREATCOR15和WBOXATNPR1等多种响应非生物胁迫(ABA、低温、脱水和高盐)的顺式作用元件。ATHB12基因在马铃薯根、茎和叶中均有表达,其根中表达量最高。q RT-PCR分析证实该基因的表达受聚乙二醇(PEG)、Na Cl和ABA诱导,受低温抑制。构建了由组成型表达启动子Ca MV 35S驱动的ATHB12基因的过表达载体,通过农杆菌介导法转化马铃薯获得了转基因植株。干旱处理后,转基因植株叶片中丙二醛含量显著低于非转基因植株(P<0.05),而脯氨酸含量显著高于非转基因植株(P<0.05);转基因植株根鲜重和干重均高于非转基因植株;说明马铃薯ATHB12基因可能参与了逆境胁迫的响应。 武亮亮 姚磊 马瑞 朱熙 杨江伟 张宁 司怀军关键词:马铃薯 HD-ZIP 丙二醛 脯氨酸 生物技术专业基因工程课程教学改革与实践 被引量:3 2019年 基因工程是一门对生物技术和生物工程专业学生非常重要的课程,主要包括基因工程操作原理和基因工程实践两部分内容。它不仅为生命科学理论创新提供技术基础,也为基因工程相关领域产业的发展提供了理论指导。就生物技术专业大学生培养而言,基因工程课程的教学改革势在必行。结合甘肃农业大学基因工程教学实践,就本课程的教学内容、教学方法、实践教学以及科研促教学方面进行了改革探索。实践证明:通过改革可以活跃课堂气氛,激发学生求知的欲望和学习的兴趣,能够达到提高教学质量的目的。培养既能考研继续深造学习,又能迅速对接社会实践生产的生物技术专业人才。 杨江伟 张宁 唐勋 王丽 罗攀 周香艳 司怀军关键词:基因工程 教学改革 生物技术专业 植物NF-Y转录因子研究进展 被引量:9 2021年 真核生物核因子(nuclear factor-Y, NF-Y)转录因子又叫亚铁血红素激活蛋白(heme-activator protein,HAP)或CCAAT结合因子(CCAAT-binding factor, CBF)。NF-Y是由NF-YA (CBF-B/HAP2)、NF-YB (CBF-A/HAP3)和NF-YC (CBF-C/HAP5) 3种亚基构成。NF-YB/C亚基具有组蛋白折叠基序, NF-YB/C与NF-YA或其他转录因子形成复合体以调节下游基因的转录。NF-Y作为一种重要的转录因子参与植物生长发育和胁迫应答等。本文综述了NF-Y亚基的结构、功能和已鉴定的NF-Y复合体及其分子调控机制,为人们进行作物遗传改良和农业绿色生产提供了理论依据。 李世贵 马瑞 王芳芳 刘维刚 杨江伟 唐勋 张宁 张宁关键词:生长发育 胁迫应答 复合体 马铃薯StmiR166b靶基因的鉴定及其表达分析 被引量:4 2019年 为阐明马铃薯(Solanum tuberosum L.)StmiR166b的生物学功能,以栽培品种‘甘农薯2号’试管苗为试验材料,采用定量PCR技术检测StmiR166b及其靶基因StHB14、StHB15在不同组织中的差异表达;利用pRS300质粒为模板,通过over-lapping PCR技术克隆了包含StmiR166b-StmiR166b^*成熟体序列的前体结构,构建了其人工表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化马铃薯获得了转基因植株。结果表明,StmiR166b及其靶基因StHB14和StHB15在马铃薯根、茎和叶中均有表达,在转基因株系L1、L3中靶基因不同程度地下调表达;与非转基因对照相比,转基因株系的株高和根长变短,生长受到抑制。 武亮亮 张宁 张宁 朱熙 马瑞 杨江伟 杨江伟关键词:马铃薯 amiRNA技术沉默C-3氧化酶编码基因StCPD对马铃薯抗旱性的影响 被引量:4 2018年 CPD(constitutive photomorphogenesis and dwarf)基因编码C-3氧化酶,为油菜素内酯(brassinosteroid,BR)生物合成途径中的限速酶,在植物响应逆境胁迫过程中具重要调控作用。本研究利用人工micro RNA(artificial micro RNA,ami RNA)技术,构建马铃薯CPD基因(StCPD)的干扰表达载体p CPB121-ami Rcpd,通过根癌农杆菌介导法将其转入马铃薯栽培品种"紫花白",获得转基因植株(Ci1~Ci5),其中Ci1和Ci3的StCPD基因干扰程度分别为78%和90%。基因组织表达特异性分析表明,StCPD在马铃薯试管苗叶片中表达量最高,是茎和根中表达量的3.05倍和1.65倍。转基因植株株高、茎粗、根长、鲜重及薯的大小和鲜重等指标均较非转基因(NT)植株显著下降,表明StCPD基因干扰表达后,植株的长势明显受到抑制。模拟干旱胁迫处理下,转基因植株叶片中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量显著高于NT植株,而脯氨酸含量显著低于NT植株。转基因和NT马铃薯中,StCPD基因的表达量、MDA和脯氨酸含量均显著高于对照;且随着胁迫处理时间延长,基因表达量呈持续增强趋势,MDA和脯氨酸含量随之增加。结果表明,StCPD基因干扰表达能明显降低马铃薯对干旱胁迫的抵抗能力,为进一步研究BR对马铃薯生长发育和对干旱胁迫的响应奠定了基础。 周香艳 杨江伟 唐勋 文义凯 张宁 司怀军关键词:马铃薯 油菜素内酯 马铃薯StCIPK11的克隆及响应干旱胁迫分析 被引量:1 2023年 明确马铃薯StCIPK11在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,为深入研究StCIPK11响应马铃薯抗旱调控的分子机制提供理论依据。利用同源重组法和人工microRNA技术构建马铃薯StCIPK11过表达载体和干扰表达载体,通过根癌农杆菌介导法分别将其转入马铃薯栽培品种‘大西洋’中。RT-qPCR结果表明,过表达植株StCIPK11的表达量是非转基因植株(NT)的11.59和21.76倍,干扰表达植株StCIPK11干扰程度达到78%。经PEG模拟干旱胁迫,过表达植株叶片中丙二醛含量显著高于NT植株,脯氨酸含量、抗氧化酶(超氧化物歧化酶、过氧化物酶)活性均低于NT植株;StCIPK11干扰表达植株则表现出相反的趋势。StCIPK11参与了干旱胁迫应答过程,StCIPK11干扰表达可以降低马铃薯植株对水分胁迫的敏感性。 刘雯锦 马瑞 刘升燕 杨江伟 杨江伟 司怀军关键词:马铃薯 干旱胁迫 生理指标