李运东
- 作品数:31 被引量:33H指数:4
- 供职机构:中国水产科学研究院南海水产研究所更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目广东省海洋渔业科技推广专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学经济管理生物学医药卫生更多>>
- 近缘新对虾PP2A-B55基因的克隆及表达分析
- 2024年
- 为了解蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在生物体细胞周期调控过程中的作用,采用RACE技术克隆了近缘新对虾(Metapenaeus affinis)PP2A-B55基因,并使用qRT-PCR初步探究其在卵巢发育过程的作用。通过RACE扩增得到了MaPP2A-B55基因的cDNA序列全长,共2100 bp,其中ORF为1332 bp,编码443个氨基酸,预测分子量为51.229 kDa,理论等电点为6.04。多重比对表明,MaPP2A-B55与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和斑节对虾(Penaeus monodon)的PP2A-B55的氨基酸序列一致性最高,系统进化树显示其与凡纳滨对虾、斑节对虾和日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)具有较近的亲缘关系。定量结果表明,MaPP2A-B55基因在肌肉和卵巢显著表达,同时在卵巢发育过程中的表达量存在显著差异,在幼体发育时期的受精卵阶段呈高表达,然后下降,在无节幼体Ⅵ期降到最低点,溞状幼体Ⅰ期开始上升之后表达平稳。研究结果表明,PP2A-B55可能参与了近缘新对虾的卵巢成熟与幼体发育过程。
- 张艳周发林李运东姜松黄建华杨丽诗陈旭江世贵杨其彬
- 关键词:克隆卵巢发育幼体发育
- 基于InDel标记的斑节对虾早期性别鉴定方法的建立被引量:3
- 2020年
- 为分辨斑节对虾(Penaeus monodon)发育早期的性别,利用改良的插入/缺失(InDel)标记追踪了从受精卵、无节幼体、溞状幼体、糠虾幼体、仔虾后1 d(PL1)、仔虾后30 d(PL30)及亚成虾个体的性别,建立了测序和荧光定量PCR熔解曲线的检测方法。结果表明,InDel标记可扩增获得雌雄特异性序列,用测序法判定亚成虾性别的结果与外部观察结果一致,准确率达100%,对受精卵、无节幼体、溞状幼体及糠虾幼体均可得到雌雄特异性序列;进而建立了基于SYBR Green实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)熔解曲线的快速鉴定斑节对虾性别的方法,其中雄性特异序列的熔解温度(Melting temperature,Tm)为(79.10±0.10)℃,雌性为(78.45±0.20)℃,通过特异的熔解曲线可准确区分PL30、亚成虾和无节幼体Ⅵ期个体,准确率可达96.3%以上。
- 黄智康江世贵周发林周发林杨其彬黄建华李运东杨其彬
- 关键词:斑节对虾性别鉴定INDEL标记实时荧光定量PCR熔解曲线发育早期
- 一种近缘新对虾的高产培育方法
- 本发明公开了一种近缘新对虾的高产培育方法。属于水产品养殖技术领域。该方法包括如下步骤:(1)虾池的选择与预处理;(2)虾苗孵育与培养;(3)虾苗投放;(4)饲养管理及虾池环境管理;(5)收捕。与现有技术相比,本发明取得的...
- 姜松周发林江世贵杨其彬杨万里孔德伟黄建华杨丽诗李运东陈旭
- 一种近缘新对虾抗高氨氮品种的选育方法
- 本发明公开了一种近缘新对虾抗高氨氮品种的选育方法。属于水产品抗逆性选育技术领域。该方法包括如下步骤:(1)亲虾的引进及性腺促熟;(2)产卵、孵化:(3)抗高氨氮筛选;(4)营养强化;(5)重复步骤(2)~(4),培育稳定...
- 姜松周发林江世贵杨其彬杨万里孔德伟黄建华杨丽诗李运东陈旭
- 斑节对虾PP2C基因的克隆及其在急性低盐和氨氮胁迫下表达模式的相关研究
- 2022年
- PP2C家族蛋白(Protein phosphatase 2C family protein)是一类在抗逆过程中具有重要作用的蛋白磷酸酶,但其在甲壳动物中研究较少。通过RACE(Rapid amplification of cDNA ends)方法克隆并获得了斑节对虾(Penaeus monodon)具有c型结构域的蛋白磷酸酶2C的cDNA全长(PmPP2C)。该基因cDNA开放阅读框(ORF)全长2079 bp,可编码692个氨基酸。实时荧光定量结果显示,PmPP2C基因在所有检测的组织中均有表达,在肝胰腺和鳃组织中的表达量最高,其次是胸神经、精巢、肌肉等组织。96 h急性低盐胁迫过程中,肝胰腺和鳃组织PmPP2C表达量先下调后上调。96 h急性氨氮胁迫中肝胰腺和鳃组织PmPP2C表达量整体呈下调-上调-下调趋势。结果表明,PmPP2C基因可能参与了斑节对虾急性低盐和氨氮胁迫响应过程,表明其可能在斑节对虾抗环境胁迫的免疫防御过程中发挥重要作用。
- 司梦茹李运东杨其彬姜松杨丽诗黄建华江世贵周发林
- 关键词:斑节对虾分子克隆低盐氨氮
- 一种斑节对虾PmGFPT2基因及其应用
- 本发明公开了一种斑节对虾PmGFPT2基因,所述基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示。所述编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。还公开了上述基因或所述基因的编码蛋白在提高斑节对虾耐氨氮方面的应用。以及一...
- 李运东周发林江世贵丁阳阳
- 文献传递
- 一种斑节对虾糖原合成酶激酶GSK3β基因及其应用
- 本发明公开了一种斑节对虾糖原合成酶激酶GSK3β基因,该基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了上述斑节对虾糖原合成酶激酶GSK3β基因的编码蛋白,所述编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。...
- 周发林李运东江世贵丁阳阳杨其彬姜松杨丽诗黄建华
- 基于水质智能感知的鲫鱼繁育全流程监测方法及系统
- 本发明公开了一种基于水质智能感知的鲫鱼繁育全流程监测方法及系统,包括:获取当前鲫鱼繁育的繁育工作流,根据历史水质监测参数与繁育工作流进行匹配,进行数据更新;在不同的繁育工作流子段中根据繁育特征筛选高关联水质参数,设置对应...
- 姜松周发林李运东杨其彬史健志黄建华杨丽诗
- 一种用于斑节对虾基因编辑的OpenCRISPR-NLS融合蛋白及其应用
- 本发明公开了一种用于斑节对虾基因编辑的OpenCRISPR‑NLS融合蛋白及其构建方法以及包含所述OpenCRISPR‑NLS融合蛋白的核苷酸构建体,还公开了上述融合蛋白或所述核苷酸构建体在斑节对虾基因编辑中的应用以及在...
- 李运东周发林李二超黄圣姜松
- 斑节对虾Pellino基因的克隆及其在不同胁迫条件下的表达分析被引量:2
- 2019年
- Pellino蛋白家族,是一类高度保守的E3泛素连接酶,在泛素化和先天性免疫中发挥重要作用。该研究通过RACE技术得到斑节对虾(Penaeus monodon)泛素连接酶Pellino基因的c DNA全长。该基因序列全长1 961 bp,编码区序列长1 299 bp,编码432个氨基酸,5’非编码区(UTR)为89 bp,3’UTR为573 bp。通过qRT-PCR技术,研究了PmPellino基因在斑节对虾不同组织中的表达水平,并研究了其在不同浓度氨氮胁迫下和不同微生物刺激下的表达情况。结果显示,PmPellino基因在各组织中均有表达,在鳃组织中表达量最高。急性氮氮胁迫后,PmPellino在肝胰腺中的表达量显著上调(P<0.01),但在鳃中的表达被抑制(P<0.01)。哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著激活PmPellino在鳃中的表达,抑制其在肝胰腺中的表达。鳗弧菌(V. anguillarum)可显著抑制PmPellino在肝胰腺中的表达,而对PmPellino在鳃中的表达无显著影响。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)可以显著激活PmPellino在肝胰腺和鳃中的表达。结果表明PmPellino可以激活免疫应答通路,在免疫防御中发挥重要作用。
- 丁阳阳江世贵李运东杨其彬姜松姜松杨丽诗周发林
- 关键词:斑节对虾泛素连接酶