刘胜男 作品数:7 被引量:10 H指数:2 供职机构: 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 河北省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
长链非编码RNA XLOC_008370在食管鳞状细胞癌中的表达和甲基化状态及其与临床病理特征的关系 被引量:2 2015年 目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中长链非编码RNA XLOC_008370(long non-colding RNA XLOC_008370,lnc RNA XLOC_008370)的表达及其甲基化状态,探讨XLOC_008370在ESCC发生及发展中的作用机制。方法:分别应用RT-PCR以及甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycitydine,5-Aza-d C)处理前后的ESCC细胞系(TE1、TE13、Eca109、T.TN、YES-2)以及ESCC组织及相应癌旁正常组织中XLOC_008370的表达和甲基化状态,分析其与临床病理特征的关系。结果:5种ESCC细胞中XLOC_008370的表达均呈阴性或弱阳性,经5-Aza-d C处理后,5种细胞中XLOC_008370的表达均升高。5种细胞中XLOC_008370基因呈高甲基化状态,应用5-Aza-d C处理后,Eca109、Yes-2细胞中XLOC_008370基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,其余3种细胞中XLOC_008370基因均表现为非甲基化状态。XLOC_008370在ESCC组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P<0.05),并与TNM分期和组织学分化程度密切相关(P<0.05)。ESCC组织中XLOC_008370的启动子区甲基化率为(54.02%,47/87),显著高于癌旁正常组织(9.20%,8/87)(P<0.05),并与TNM分期和组织学分化程度密切相关(P<0.05)。发生XLOC_008370甲基化的ESCC组织中XLOC_008370的表达显著低于未发生甲基化的ESCC组织(P<0.05)。结论:XLOC_008370的异常低表达可能与ESCC的发生密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。 沈素朋 刘胜男 师雅斌 梁佳 郭炜 董稚明 王晶田关键词:食管鳞状细胞癌 甲基化 长链非编码RNA XLOC_002319在贲门腺癌中的表达及其甲基化状态 被引量:1 2017年 [目的]检测贲门腺癌(GCA)中长链非编码RNA XLOC_002319(lncRNA XLOC_002319)的表达及其甲基化状态,探讨XLOC_002319在贲门腺癌发生发展中的作用。[方法]分别应用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)以及甲基化特异性PCR(MSP)检测贲门腺癌组织、癌旁不典型增生组织及癌旁正常组织中XLOC_002319的表达和甲基化状态。[结果]XLOC_002319在贲门腺癌组织和癌旁不典型增生组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P<0.01),并且在贲门腺癌组织中XLOC_002319的表达与组织学分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05)。贲门腺癌组织中XLOC_002319的启动子区甲基化率(61.54%)和癌旁不典型增生组织甲基化率(54.84%)显著高于癌旁正常组织(17.95%)(P<0.01),并且贲门腺癌组织中XLOC_002319的启动子区甲基化率与组织学分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05)。发生XLOC_002319甲基化的贲门腺癌组织中XLOC_002319的表达显著低于未发生甲基化的贲门腺癌组织(0.217±0.074 vs 0.253±0.060,P<0.05)。[结论]XLOC_002319在贲门腺癌中的异常低表达可能与贲门腺癌的发生密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。 梁佳 刘胜男 沈素朋 郭炜 李慧杰 董稚明关键词:贲门腺癌 DNA甲基化 人食管鳞状细胞癌中微RNA-1250及其宿主基因AATK的表达及甲基化状态分析 被引量:5 2017年 目的:探讨微RNA-1250(microRNA-1250,miR-1250)及其宿主基因细胞凋亡关联酪氨酸激酶(apoptosis-associated tyrosine kinase,AATK)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生和发展中的作用。方法:分别采用实时荧光定量PCR法和甲基化特异性PCR法检测AATK基因在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况和甲基化状态,同时采用实时荧光定量PCR法检测miR-1250在ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。然后,分析miR-1250表达和AATK基因表达及其甲基化状态分别与ESCC组织病理学特征的关系,以及三者之间的相关性。结果:5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4株食管癌细胞系中AATK基因表达水平明显升高(P值均<0.05),并且其甲基化程度明显降低。在ESCC组织中,AATK mRNA平均表达量低于癌旁正常组织(P<0.05),AATK基因甲基化率明显高于癌旁正常组织(P<0.05);AATK mRNA相对表达量和AATK基因甲基化率均与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均<0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均>0.05)。同时,ESCC组织中miR-1250相对表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均<0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均>0.05)。ESCC组织中miR-1250与AATK mRNA表达明显相关(P<0.05),而且miR-1250和AATK mRNA表达与AATK基因甲基化状态也均明显相关(P值均<0.05)。结论:ESCC的发生和发展可能与miR-1250和AATK低表达以及AATK基因高甲基化状态有关,而且miR-1250与AATK mRNA表达具有一致性。 卢帆 徐凤楼 邝钢 董稚明 郭艳丽 沈素朋 梁佳 刘胜男 郭炜关键词:食管肿瘤 DNA甲基化 长链非编码RNA XLOC_005009对食管鳞状细胞癌生物学特性的影响 被引量:1 2017年 目的:探讨长链非编码RNA XLOC_005009基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)的体外增殖、迁移、侵袭和细胞周期与细胞凋亡等生物学特性的影响。方法:收集2015-2016年河北医科大学第四医院肿瘤研究所57例ESCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织标本。应用实时荧光定量PCR检测XLOC_005009基因在人ESCC细胞系Eca109、Kyse170与ESCC组织及其癌旁组织的表达,构建pc DNA3.1-XLOC_005009过表达质粒并转染Eca109、Kyse170细胞,应用MTS法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染前后细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、细胞周期与凋亡的变化。结果:XLOC_005009 m RNA在食管癌组织中的表达明显低于癌旁组织(0.06±0.06 vs 0.21±0.19,P<0.05),且食管癌细胞XLOC_005009 m RNA表达亦均低于对照组(P<0.05)。转染过表达质粒的Eca109和Kyse170细胞XLOC_005009基因表达显著高于对照组(Eca109细胞:039±0.17 vs0.02±0.00;Kyse170细胞:0.35±0.08 vs 0.01±0.01,均P<0.05)。与对照组相比,XLOC_005009基因过表达Eca109和Kyse170细胞增殖能力细胞显著减弱(P<0.05);克隆形成率显著减少(P<0.05);穿膜细胞数显著减少[Eca109细胞:(146.40±34.47)vs(193.00±26.33);Kyse170细胞:(157.80±32.51)vs(269.00±29.89),均P<0.05];Eca109细胞迁移率无显著变化,Kyse170细胞迁移率明显减小(P<0.05);S期细胞比例增加,细胞凋亡影响不明显。结论:XLOC_005009低表达与食管癌的发生发展密切相关,XLOC_005009过表达可抑制食管癌细胞的体外增殖、侵袭与迁移能力。 刘胜男 徐凤楼 卢帆 董稚明 邝钢 郭艳丽 沈素朋 梁佳 郭炜关键词:食管鳞癌 长链非编码RNA 长链非编码RNA XLOC_008370在贲门腺癌中的表达及其甲基化状态 2016年 目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织中长链非编码RNA(long non-colding RNA,lncRNA)XLOC_008370的表达及其甲基化状态。方法:分别应用RT-PCR以及甲基化特异性PCR(methylationspecific PCR,MSP)法检测76例GCA组织及其相应的癌旁组织中XLOC_008370的表达及其甲基化状态。结果:GCA组织中XLOC_008370的表达水平显著低于其相应的癌旁组织(P<0.05),并且与GCA患者的TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05和P<0.01)。GCA组织中XLOC_008370启动子区的甲基化率显著高于相应的癌旁组织(P<0.05),并且与GCA患者的TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01和P<0.05)。发生XLOC_008370甲基化的GCA组织中XLOC_008370的表达水平显著低于未发生甲基化的GCA组织(P<0.05)。结论:GCA组织中XLOC_008370低表达,其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。 沈素朋 刘胜男 邝钢 师雅斌 梁佳 郭炜 董稚明 齐海亮关键词:甲基化 长链非编码RNA XLOC_002319在食管鳞癌中表达及其甲基化状态 被引量:1 2016年 目的:通过检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中长链非编码RNA XLOC_002319(long non-colding RNA XLOC_002319,lncRNA XLOC_002319)基因的表达及其甲基化状态,探讨XLOC_002319基因在ESCC发生及发展中的作用。方法:分别应用RT-PCR以及甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)的方法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine,5-aza-d C)处理前后的食管癌细胞株(TE1、TE13、Yes-2、Eca109和T.TN)、ESCC组织以及癌旁正常组织、食管上皮内瘤变(esophageal intraepithelial neoplasia,EIN)组织中XLOC_002319基因的表达和甲基化状态。结果:未经5-aza-d C处理的5种食管癌细胞中XLOC_002319基因的表达均呈阴性或弱阳性,经5-azad C的5种食管癌细胞中XLOC_002319基因的表达均增高。5株食管癌细胞在5-aza-d C处理前表现为XLOC_002319高甲基化状态,处理后,Eca109和T.TN细胞系中XLOC_002319基因甲基化程度降低,其余3株细胞系中XLOC_002319基因均表现为非甲基化状态。XLOC_002319基因在ESCC组织中的表达显著低于食管上皮内瘤变组织和癌旁正常组织(P<0.01),并与组织学分化程度和TNM分期密切相关(P<0.05)。ESCC组织中XLOC_002319基因启动子区甲基化率为63.75%(51/80),显著高于食管上皮内瘤变组织和癌旁正常组织(P<0.01),并与淋巴结转移、组织学分化程度和TNM分期密切相关(P<0.05)。发生XLOC_002319基因甲基化的ESCC组织中XLOC_002319基因表达显著低于未发生甲基化的ESCC组织(P<0.01)。结论:XLOC_002319基因在ESCC中的低表达可能与ESCC的发生密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。 梁佳 邝钢 刘胜男 郭炜 沈素朋 丁春艳 李慧杰 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 DNA甲基化 长链非编码RNA XLOC_005009在食管鳞状细胞癌中的表达及其甲基化状态 被引量:1 2017年 [目的]通过检测长链非编码RNA XLOC_005009在人食管癌细胞系及食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达情况及其甲基化状态,探讨XLOC_005009基因在食管鳞癌发生、发展中的作用及表观遗传学失活机制。[方法]分别应用逆转录—聚合酶链反应以及甲基化特异性聚合酶链反应的方法检测XLOC_005009基因在DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-d C处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、T.Tn、Eca109)以及57例食管鳞癌组织及相应癌旁正常组织中的表达情况和各位点的甲基化状态。[结果]XLOC_005009基因的表达在5-Aza-d C处理后的4株细胞系中表达增高,在5-Aza-d C处理前的4株细胞系中XLOC_005009基因的3个位点均表现为高甲基化状态,在5-Aza-d C处理后,各位点甲基化程度均降低。XLOC_005009基因在ESCC中的表达明显低于对应癌旁正常组织(0.21±0.22 vs 0.32±0.29,P<0.05),其远端Cp G岛及第2外显子区甲基化率在ESCC与其癌旁正常组织中差异无统计学意义,且其在发生甲基化的ESCC与未发生甲基化的ESCC中的表达无统计学差异。第一外显子区甲基化率在ESCC中显著高于其癌旁正常组织[45.61%(26/57)vs 19.30%(11/57),P<0.05],并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关,且此位点发生甲基化的ESCC中该基因的表达显著低于未发生甲基化的ESCC组织(0.06±0.06 vs 0.33±0.23,P<0.05)。[结论]XLOC_005009基因在食管癌细胞系和ESCC中的低表达与ESCC的发生、发展密切相关,且其第一外显子区甲基化异常增高可能是导致其表达沉默的机制之一。 刘胜男 董稚明 邝钢 师雅斌 郭艳丽 沈素朋 梁佳 郭炜关键词:食管癌 鳞癌 长链非编码RNA DNA甲基化