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补肾活血汤对SD大鼠骨折愈合过程中结缔组织生长因子表达的影响被引量：1: 2016年; 目的:探讨补肾活血法对SD大鼠骨折愈合过程中结缔组织生长因子表达的影响。方法:清洁级SD大鼠40只,6月龄,随机分为对照组(A组)及补肾活血汤组(B组),建立骨折模型。A组大鼠灌胃蒸馏水,B组大鼠灌胃补肾活血汤溶液,灌胃给药容积为10 m L/kg。造模后第3、7、14、21天,每组随机选取5只大鼠,切取骨痂标本,采用RT-PCR法和Western-blot法分别检测结缔组织生长因子(CTGF)的m RNA和蛋白质的表达。结果:结果显示,A组术后3天、7天及14天的CTGF m RNA和蛋白的表达逐渐增强,至21天表达下降,与术后14天比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3天,B组CTGF m RNA和蛋白无表达,术后7天、14天及21天,B组的CTGF m RNA和蛋白的表达逐渐增强,术后21天与术后14天比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后21天,B组较A组的CTGF m RNA和蛋白的表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血能够促进骨折愈合过程中结缔组织生长因子蛋白和m RNA表达,从而促进骨折愈合。; 程英雄罗毅文王斌吴志方庄洪; 关键词：补肾活血汤骨折愈合

补肾活血法预防肾虚血瘀型下肢骨折术后深静脉血栓形成的临床研究被引量：10: 2017年; 目的:观察补肾活血法对肾虚血瘀型下肢骨折术后深静脉血栓(DVT)形成的预防效果。方法:回顾分析本院2013年9月至2016年9月收治需行手术治疗的下肢骨折患者,术后辨证为肾虚血瘀型,共72例。根据是否服用补肾活血汤分为观察组和对照组。观察组与对照组均给予骨科基础治疗,观察组从术后第1天至术后第14天服用补肾活血汤,1剂/d.观察两组术后第1天及第7天大小腿周径差,术后第1天及第14天凝血功能指标和血液流变学指标及两组DVT阳性率。结果:观察组术后第7天的大小腿周径差和术后第14天的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、全血黏度高低切,血浆黏度较同期的对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组DVT的阳性率2.86%,与阳性率为18.92%的对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾活血法能改善肾虚血瘀型下肢骨折术后的血栓前状态,有效防止DVT的形成,具有临床应用价值。; 吴志方罗毅文王斌黄杰文程英雄黄永铨黄菲罗辉; 关键词：补肾活血法深静脉血栓肾虚血瘀下肢骨折

骨髓间充质干细胞迁移的信号通路的研究进展被引量：4: 2016年; 骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有自我更新和多向分化能力,并有归巢损伤处修复组织等功能,在组织工程修复与再生医学中有广泛的应用。近年来干细胞迁移的信号通路机制的研究成为国内外的研究热点,涉及BMSCs迁移的信号通路较多,如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、Wnt信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路和应激活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶信号通路。; 吴志方罗辉罗毅文; 关键词：骨髓间充质干细胞迁移信号通路

补肾活血汤水提物调控Cbfal/RUNX2基因沉默骨髓间充质干细胞SP7/Osterix及碱性磷酸酶的表达被引量：12: 2018年; 背景:补肾活血汤可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化,探究分子机制利于推向临床。目的:探讨补肾活血汤水提物对Cbfal/RUNX2基因沉默的骨髓间充质干细胞Osterix、碱性磷酸酶表达的影响。方法:骨髓贴壁筛选法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,Cbfal/RUNX2基因沉默慢病毒转染骨髓间充质干细胞。取第3代骨髓间充质干细胞(空白对照组)、慢病毒沉默骨髓间充质干细胞(沉默组)和阴性病毒载体预处理骨髓间充质干细胞(阴性对照组),以及上述3组骨髓间充质干细胞加入100 mg/L补肾活血汤水提物干预3 d后,检测RUNX2、Osterix蛋白和mRNA表达以及碱性磷酸酶活性。结果与结论:(1)Cbfal/RUNX2基因沉默慢病毒转染效率达约90%;(2)与空白对照组和阴性对照组比较,沉默组骨髓间充质干细胞RUNX2和Osterix的蛋白及mRNA表达均下降,碱性磷酸酶活性也明显下降,差异有显著性意义(P<0.01);(3)补肾活血汤水提物干预后,沉默组骨髓间充质干细胞RUNX2、Osterix的表达和碱性磷酸酶活性明显增加,差异有显著性意义(P<0.01);(4)结果表明,补肾活血汤水提物可以促进骨髓间充质干细胞的RUNX2、Osterix表达,亦增加了碱性磷酸酶活性,从而促进骨髓间充质干细胞成骨分化。; 程英雄罗毅文王斌吴志方沈玮罗辉孙世栋黄文强; 关键词：补肾活血汤骨髓间充质干细胞 RUNX2 OSTERIX 基因沉默碱性磷酸酶干细胞

补肾活血法在老年肱骨近端骨折围手术期的应用研究被引量：14: 2016年; 目的：分析补肾活血法在老年肱骨近端骨折围手术期的疗效。方法：回顾2013年5月至2015年5月的79例老年肱骨近端骨折的患者,根据是否使用补肾活血汤分为治疗组和对照组。治疗组在常规对症治疗合并症同时,入院至术前1d和术后2~14d内,口服补肾活血汤1剂/d.对照组不服中药,其他与治疗组一致。结果：与对照组对比,补肾活血汤降低患者的疼痛程度（疼痛评分）,缩短肿胀天数,减少伤口浅表感染、术后发热、上静脉血栓例数,差异有统计学意义（P〈0.05）;而在切口愈合情况、压疮、肺部感染、尿路感染及原发老年病复合和加重方面,两组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：在老年肱骨近端骨折围手术期应用补肾活血法,可提高老年人耐受手术、创伤的应急储备能力,增强术后的抗感染能力,减轻患肢肿胀情况,促进患者早日康复。; 程英雄罗毅文王斌吴志方蔡炎李汪洋; 关键词：补肾活血肱骨近端骨折围手术期

3D打印与计算机辅助截骨联合泰勒三维空间支架骨搬运术治疗胫腓骨远端畸形1例被引量：3: 2018年; 胫腓骨远端畸形往往存在于多个平面并伴有软组织及神经挛缩畸形，采用常规的截骨矫形术治疗无法获得满意的效果。笔者于2015—08采用3D打印技术与计算机辅助截骨联合泰勒三维空间支架骨搬运技术治疗胫腓骨远端畸形1例，报道如下。; 程英雄罗毅文张淼吴志方

补肾活血汤通过Runx2/Osterix促进骨质疏松模型大鼠的骨折愈合被引量：35: 2019年; 背景:Runx2/Osterix是促进成骨细胞分化的重要的转录因子,研究发现中药能通过上调Runx2/Osterix促进骨折愈合。补肾活血汤是临床上治疗骨折的经验方药,能促进骨形成,通过探究其作用机制更好服务临床。目的:通过慢病毒载体介导Runx2基因沉默,研究补肾活血汤对骨质疏松模型大鼠骨折愈合影响及分子机制。方法:将广州中医院药大学动物实验中心提供的40只4月龄成年雌性SD大鼠随机等为5组,模型组、补肾活血汤组、Runx2沉默组、Runx2沉默+补肾活血汤组及对照组,对照组只建立股骨骨折模型,其他各组切除双侧卵巢并造成股骨骨折制作骨质疏松骨折大鼠模型。建模后补肾活血汤组、Runx2沉默+补肾活血汤组予以补肾活血汤灌胃,模型组、对照组及Runx2沉默组予以等体积蒸馏水灌胃;Runx2沉默组、Runx2沉默+补肾活血汤组于骨折处注射Runx2重组慢病毒,模型组、对照组及补肾活血汤组于相同部位处注射等体积PBS。建模4周后,Micro CT测定股骨标本骨密度、组织矿物质密度及骨体积分数(BV/TV),q PCR、Western blot测定骨痂成骨标志基因Runx2及Osterix mRNA及蛋白的表达水平。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组骨密度、组织矿物质密度、Runx2和Osterixm RNA及蛋白表达量显著降低(P <0.01);(2)与模型组相比,补肾活血汤组骨体积分数(BV/TV)、Runx2、Osterix mRNA表达量升高(P<0.05),而骨密度、组织矿物质密度、Runx2及Osterix蛋白表达量显著升高(P<0.01);Runx2沉默组骨体积分数和Osterix mRNA表达量降低(P <0.05),骨密度、组织矿物质密度、Runx2 mRNA及蛋白表达量、Osterix蛋白表达量显著降低(P <0.01);(3)与Runx2沉默组比较,Runx2沉默+补肾活血汤组上述全部指标的m RNA及蛋白表达均显著升高(P <0.01);(4)结果表明,慢病毒介导Runx2基因沉默使大鼠骨质疏松骨折愈合延缓,补肾活血汤能上调Runx2/Osterix表达,逆转Runx2基因沉默�; 胡流超罗毅文程英雄吴志方罗辉沈玮; 关键词：补肾活血汤骨质疏松核心结合因子骨折愈合

补肾活血汤提取物促进大鼠骨髓间充质干细胞体外迁移及CXCR4表达的研究被引量：15: 2016年; 目的筛选补肾活血汤促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外迁移的活性部位并研究其对CXCR4蛋白表达的影响。方法补肾活血汤采用索氏提取法,得到石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇及水提物4个部位。全骨髓贴壁培养法培养BMSCs,取第三代(P3)BMSCs进行实验。补肾活血汤4个部位按照10,50,100μg·mL^(-1)浓度梯度对BMSCs进行Transwell实验,筛选出有效部位。使用Western blot和细胞免疫荧光检测补肾活血汤有效部位对CXCR4蛋白表达的影响。结果 Transwell结果显示,补肾活血汤石油醚部位具有明显促进大鼠BMSCs体外迁移的作用,以100μg·mL^(-1)浓度最佳(P<0.05)。Western blot、细胞免疫荧光结果显示,补肾活血汤石油醚部位呈浓度依赖性上调大鼠BMSCs的CXCR4蛋白表达(P<0.05)。结论补肾活血汤促进大鼠BMSCs体外迁移的有效部位为石油醚部位,其相关机制可能与上调CXCR4蛋白表达,激活SDF-1/CXCR4信号轴有关。; 罗毅文王斌吴志方黄永铨刘亚梅陈东风蔡炎罗辉; 关键词：补肾活血汤骨髓间充质干细胞 CXCR4

补肾活血汤石油醚提取物对骨髓间充质干细胞表达Wnt5a/CCR2的影响被引量：4: 2017年; 目的:探讨补肾活血汤石油醚提取物对骨髓间充质干细胞(BMSCs)表达CCR2及其Wnt5a的影响。方法:索氏提取法提取补肾活血汤石油醚提取物;全骨髓贴壁筛选法培养BMSCs,取BMSCs第三代用于实验。石油醚部位按10,50,100μg/mL浓度梯度刺激BMSCs,利用免疫蛋白印迹法(Western blot)及其细胞免疫荧光检测CCR2蛋白表达情况,采用Western blot和qPCR检测Wnt5a蛋白和mRNA的表达。结果:Western blot和细胞免疫荧光结果显示石油醚提取物按照浓度梯度促进CCR2蛋白表达,以100μg/mL浓度最佳(P<0.01)。石油醚提取物同样促进Wnt5a蛋白及mRNA表达,其中Western blot结果亦以100μg/mL浓度最佳(P<0.01)。结论:补肾活血汤石油醚提取物亦能刺激MCP-1/CCR2信号轴,上调Wnt5a蛋白表达,初步发现迁移活性可能与Wnt5a通路相关。; 吴志方罗毅文王斌蔡炎罗辉黄杰文刘亚梅黄永铨; 关键词：补肾活血汤骨髓间充质干细胞信号通路

补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响被引量：10: 2017年; 目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/m L剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况。结果第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6 h及12 h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P<0.05,P<0.01);Transwell实验中100μg/m L补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P<0.05,P<0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/m L剂量mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P<0.01),均且以100μg/m L剂量最高(P<0.01)。结论补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关。; 罗辉吴志方沈玮胡流超王斌余丽娟罗毅文; 关键词：补肾活血汤骨髓间充质干细胞 WNT5A PKC

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吴志方

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