王冰源 作品数:11 被引量:28 H指数:3 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
猪精原干细胞体外分离培养及移植的研究进展 被引量:3 2020年 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)位于睾丸曲细精管基底小室内,因其具有持续的自我更新能力和分化为精子的能力,被认为是雄性哺乳动物体内唯一能将自身遗传物质传递给后代的成体干细胞。对SSCs的研究已成为干细胞学科研究的热点之一,但目前SSCs的研究多集中于啮齿类动物,而猪SSCs(porcine SSCs,pSSCs)的研究进展相对落后,主要是由于存在以下几个问题:睾丸中pSSCs本身数量极少,且缺乏特异的分子标记;pSSCs的分离纯化技术仍不成熟;pSSCs体外培养体系仍不够完善。这些问题的存在导致pSSCs分离纯化效率低,并且难以在体外长期稳定培养及传代,以至于pSSCs的相关机理研究缺乏稳定的材料,为其体外研究及应用带来了不便。基于以上现状,文章总结了pSSCs体外分离培养及移植的研究进展,详细介绍了pSSCs的分子标记、分离纯化和体外培养的相关方法,以及pSSCs移植技术的研究现状,旨在为pSSCs研究提供参考,以期加快pSSCs在猪的遗传育种与繁殖领域以及男性生殖医学领域的研究和应用。 张明睿 刘志国 王冰源关键词:精原干细胞 分子标记 分离纯化 仔猪人工呼吸器 本实用新型涉及一种仔猪人工呼吸器,其特征在于:它包括按压式球囊体、导管和仔猪呼吸面罩;所述导管一端插入所述按压式球囊体的球囊接口内,所述导管的另一端插入所述仔猪呼吸面罩上的面罩接口内,且所述球囊接口和面罩接口处均设有密封... 刘志国 李奎 牟玉莲 吴亚林 王冰源文献传递 农业动物干细胞研究进展 被引量:3 2020年 干细胞技术是近年来被广泛应用于生命科学领域的重要技术。获取具有无限增殖能力和分化能力的干细胞系主要有3种途径:(1)从胚胎分离胚胎干细胞;(2)从成体组织分离成体干细胞;(3)通过体外诱导体细胞重编程为诱导多能干细胞。在农业领域中,畜禽干细胞的分离、培养、建系有望显著提升体细胞克隆和细胞水平基因修饰的效率;干细胞体外诱导配子技术能够极大简化基因编辑畜禽的制备流程,提升制备效率。同时,通过结合基因编辑、显微注射、干细胞移植、胚胎移植等技术,干细胞技术在基因编辑动物的生产、组织和器官的供体制备、体外配子诱导及遗传重组胚胎制备、疾病治疗靶点的筛选,以及新药药理研究等方面都具有极大的应用潜力,对农业动物的遗传改良、疾病防治具有重要意义。本文综述了干细胞相关研究在农业动物包括猪(Sus scrofa)、牛(Bos taurus)、鸡(Gallus gallus)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)中的新进展,以期为农业动物干细胞领域的相关研究提供参考。 王冰源 牟玉莲 李奎 刘志国关键词:山羊 绵羊 干细胞 Ide基因通过AKT调控成肌细胞增殖和分化的研究 被引量:2 2020年 旨在了解胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,Ide)在猪不同组织中的表达情况,及其在C2C12成肌细胞增殖和分化中的作用。本研究利用RT-PCR和Western blotting技术检测了Ide在8月龄雄性小型猪不同组织中的表达;利用siRNA技术干扰Ide表达,检测了Ide在C2C12成肌细胞增殖、凋亡和分化中的作用,试验分为Ide-siRNA处理组和NC-siRNA(negative control)对照组,每组3个重复。结果显示,Ide在猪的不同组织(包括大脑、股四头肌、股二头肌、背最长肌、心、肝、脾、肺、肾和睾丸)中广泛表达,其中,在股四头肌、肾和睾丸中表达量相对更高。Ide-siRNA转染成肌细胞48 h后,Ide表达量极显著下降(P<0.001)。CCK-8检测显示,干扰Ide表达促进了成肌细胞的增殖,细胞周期相关基因表达也显著升高,同时发现干扰Ide表达未引起成肌细胞凋亡。利用2%马血清诱导成肌细胞分化的同时转染Ide-siRNA以干扰其表达,在分化的第2和5天发现,与对照组相比,分化相关基因Myog、Myhc等在干扰组中的表达均显著下降,提示成肌细胞的分化受到了抑制。进一步的研究还发现,在分化的第5天,Akt 2和磷酸化的AKT(P-AKT)表达量下降。综上,Ide在猪的不同组织中广泛表达,以肌肉、肾和睾丸中表达量更高。干扰Ide表达促进C2C12成肌细胞的增殖,分化时干扰Ide表达则通过Akt 2/P-Akt/Myog途径抑制C2C12成肌细胞的分化。 郭健康 樊自尧 牛鹏霞 刘志国 牟玉莲 张明睿 李奎 王冰源关键词:成肌细胞 AKT 分子编写育种——动物育种的发展方向 被引量:13 2018年 随着基因组学、基因组编辑技术的迅速发展以及显微注射技术、体细胞克隆技术的广泛应用,一套新型的育种策略和方法已经逐渐形成。这一套新型育种策略和方法可以称为分子编写育种(breeding by molecular writing,BMW)。该方法可以高效创制新的遗传标记并对其进行快速验证,也可以对基因组进行精确到分子水平的编写并定向培养新品种,不仅能打破生殖隔离,跨物种的引入新的性状,更可以对物种内个体间基因组进行精确到单个碱基的插入、删除和替换。如外源基因的精确整合,内源基因的精确删除、替换,SNP位点的复制、删除或替换等。该技术的优点是:可以在极大的降低非预期效应的同时,快速高效的将多种有益性状聚合到同一品种内。分子编写可进行以下四方面工作:(1)新型育种标记的创制及验证;(2)跨物种分子编写;(3)基因组中碱基序列的删除;(4)物种内分子编写。该育种技术可以不通过有性杂交,只引入一个或几个目标基因或SNP,快速获得目标性状突出的遗传稳定新种质,然后结合常规育种方法育成新品种。该方法将实现真正的个体和群体水平的基因(或分子)杂交育种,获得分子杂种优势,能够高效的解决长久以来困扰育种工作的诸多难题,大大提高育种效率,尤其在畜禽育种中具有重要应用前景,将会是未来育种的发展方向。文章详细论述了分子编写育种技术的基本概念、研究手段、研究内容、研究现状并展望了该技术的应用前景,为动物育种、畜禽繁殖等领域的研究及从业人员提供了参考。 刘志国 王冰源 牟玉莲 魏泓 陈俊海 李奎关键词:育种 体细胞核移植 基因敲除 一种胚胎移植工具 本实用新型公开了一种胚胎移植工具,包括移卵管和套管,移卵管包括导管针与接头,套管的两端分别设置为粗端和细端,套管的外径由粗端至细端逐渐变小;套管的内外管壁光滑,上端和下端的开口部圆润。本实用新型公开的胚胎移植工具有助于快... 刘志国 李奎 牟玉莲 吴亚林 王冰源文献传递 PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响 2019年 旨在研究PNPLA5基因对雄性大鼠繁殖性能的影响。本研究以PNPLA5敲除型雄性大鼠(KO)为试验组,野生型大鼠(WT)为对照组,分别饲喂普通饲料,并采集大鼠附睾精子及睾丸组织。利用繁殖试验检测配种后雌鼠的妊娠率及平均产仔数,精子运动性能分析检测精子运动能力,Western blot检测精子中线粒体功能相关细胞色素C(cytochrome C,Cytc)与细胞色素C氧化酶亚基IV(cytochrome c oxidase subunit IV,COX IV)的表达水平,HE染色检测睾丸组织形态。结果表明:与野生型雄性大鼠相比,PNPLA5敲除型雄鼠与野生型雌鼠配种后,雌鼠的妊娠率极显著下降(P<0.01);精子的曲线运动速度显著降低(P<0.05)及渐进运动精子的百分率极显著降低(P<0.01);PNPLA5敲除型大鼠精子中细胞色素C表达量下调,细胞色素C氧化酶亚基IV表达量上调,但差异均不显著(P>0.05);PNPLA5基因缺失引起大鼠睾丸组织结构疏松,曲细精管中各阶段生精细胞排列紊乱,上皮细胞脱落至管腔。综上表明,本研究发现PNPLA5基因敲除能够引起雄性大鼠繁殖能力降低,为家畜繁殖研究提供重要的参考依据。 胡言青 徐奎 魏迎辉 邱乙卿 张秀玲 王冰源 刘志国 牟玉莲 李奎关键词:睾丸 精子运动能力 新型猪食槽 本实用新型涉及一种新型猪食槽,包括槽体,在所述槽体的顶部设置覆盖所述槽体的上口的网状结构,所述网状结构用于防止槽体内的饲料飞溅;所述槽体的一侧设置有用于将所述槽体与猪舍固定的连接部,在所述槽体的另一侧设置多个供猪嘴进出的... 刘志国 李奎 牟玉莲 吴亚林 王冰源文献传递 脂肪决定肉品质,脂肪酸也可以让血管更畅通 被引量:1 2016年 随着我国居民生活水平的提高,肉类消费逐渐成为食品消费的主流,且人们对高品质健康肉类的需求越来越高。本文从健康的角度出发,介绍了脂肪对猪肉品质的影响,以及不饱和脂肪酸对人类心血管的保护作用,最后探讨了如何通过基因修饰技术来改善猪脂肪酸的组成和比例,为人们提供更加健康的肉类。 魏迎辉 魏景亮 王冰源 周荣 陶聪 李奎关键词:脂肪 肉质 脂肪酸 基因修饰 磷酸酶Wip1基因敲除表型及机制研究进展 被引量:1 2017年 野生型p53诱导的磷酸酶1(Wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是PP2C(The type 2Cfamily of protein phosphatases)磷酸酶家族中的一员。在DNA损伤修复中起重要作用,并作为原癌基因受到越来越多的关注。Wip1敲除小鼠虽然能够存活,但寿命缩短,并出现多系统异常,包括生殖系统、免疫体系、内分泌系统、神经系统等,具体表现:雄性生殖器官萎缩及雄性不育、对病原体敏感、T细胞和B细胞功能受损、胰岛素抵抗、体重增长受限、脂肪量减少、焦虑和抑郁样行为增加等。相关机制研究发现,Wip1通过去磷酸化不同蛋白底物而在多种生理和病理过程中发挥重要作用。本文旨在对小鼠Wip1基因缺失所致表型及其初步的分子机制进行综述,为进一步研究Wip1的生物学功能以及哺乳动物体内生理和病理过程的发生机制提供参考。 王冰源 刘志国 牟玉莲关键词:WIP