孙美玲
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组Ⅱ型单纯疱疹病毒（OH2）基因组修饰稳定性研究
- 目的本课题主要研究重组Ⅱ型单纯疱疹病毒(OH2)基因组修饰的稳定性,为OH2进一步研究提供依据。方法研究中涉及的实验包括DNA提取、PCR产物酶切鉴定单纯疱疹病毒的型别、PCR法验证OH2基因修饰、细胞培养及ELISA检...
- 孙美玲
- 关键词：溶瘤病毒基因修饰HGM-CSF
- 文献传递
- 人用重组溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(OH2)生物学特性的稳定性被引量：1
- 2016年
- 目的分析人用重组溶瘤单纯疱疹病毒Ⅱ型(oncolytic herpes simplex virus type 2,OH2)生物学特性的稳定性。方法将OH2在Vero细胞中连续传20代,测定不同时间点收获的不同代次(P4、P10、P20)病毒的滴度,并绘制病毒的生长曲线;ELISA夹心法检测表达的h GM-CSF的含量;TF-1细胞培养法检测表达的h GM-CSF的活性;CCK-8试剂盒检测OH2的体外癌细胞杀伤能力。结果 OH2在Vero细胞中连续传20代后,不同代次病毒(P4、P10、P20)的生长曲线模式、表达的h GM-CSF含量及活性、体外癌细胞的杀伤能力均无明显差异。结论 OH2生物学特性的稳定性良好,具有新生物药开发前景。
- 李延飞毛泽勇石晓太邹建文董玉婷孙美玲刘滨磊方志正
- 关键词：生物学特性稳定性
- 重组Ⅱ型单纯疱疹病毒(OH2)基因组修饰稳定性研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨重组Ⅱ型单纯疱疹病毒(OH2)基因组修饰的稳定性。方法型别鉴定实验根据Ⅰ型(HSV-1)及Ⅱ型(HSV-2)单纯疱疹病毒g D糖蛋白基因的保守序列设计引物进行PCR扩增,HSV-1 PCR片段上有一个Msp I酶切位点,经酶切及电泳实验鉴别OH2病毒的型别;基因修饰实验根据被敲除或插入的序列位点上下游病毒核酸序列设计引物进行PCR扩增及电泳,并用电泳图分析OH2病毒基因组中是否剔除ICP34.5基因、ICP47基因及插入hGM-CSF基因;ELISA检测OH2上清中hGM-CSF含量验证插入的hGM-CSF基因能否正常表达。结果型别鉴定实验中HSV-1经酶切实验出现130bp和70bp两条条带,而HSV-2和OH2病毒PCR条带和酶切条带均只有一条,且为200bp。基因修饰实验中OH2病毒在四对引物下扩增,能扩增出对应大小的条带。ELISA实验中hGM-CSF浓度在31.25~500pg/m L范围内线性关系良好,且OH2病毒中hGM-CSF表达量均大于2ng/mL。结论 OH2病毒中被修饰的基因稳定地存在,同时插入的hGM-CSF基因能够正常表达。
- 孙美玲邹建文徐赐栋吴基良李炎坤刘滨磊
- 关键词：型别鉴定基因修饰ELISA实验
