张佳俐
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金湖南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 梅毒螺旋体黏附素Tp0751核酸菌影的构建及免疫原性研究被引量：3
- 2018年
- 目的:构建梅毒螺旋体(Tp)黏附素Tp0751的重组真核大肠埃希菌菌影(EBG)并检测其在免疫鼠中的免疫原性,为探讨新型梅毒疫苗奠定基础。方法:构建pc DNA3.1(+)/Tp0751真核表达载体,将其装载入已构建的空EBG中,形成重组核酸菌影pc D/Tp0751-BG,计算装载率;将核酸菌影转染鼠源性巨噬细胞RAW264.7,Western blot(WB)鉴定目的蛋白表达。将雌性BALB/c鼠随机分为A(PBS)、B(空EBG)、C(空pc DNA3.1)三个对照组和D(pc D/Tp0751)、E(pc D/Tp0751-BG)、F(pc D/Tp0751-BG+r Tp0751)三个实验组,各组间隔两周肌注免疫共三次,检测特异性血清Ig G及生殖道黏膜SIg A、小鼠脾细胞增殖水平和分泌IFN-γ水平。结果:重组真核质粒对菌影的装载率为76.1%;WB显示此转染细胞能有效表达重组目的蛋白。D、E、F实验组小鼠特异性血清Ig G与生殖道SIg A效价均随免疫次数增加而增加,各时间点均显著高于三个对照组(P<0.01),于末次加免后第8周达到峰值,此时F组Ig G与SIg A效价分别为1∶102 400与1∶12 800;首次加免2周后,E、F组均显著高于D组(P<0.01);末次加免2周后,F组显著高于E组(P<0.01)。末次加免后第8周,D、E、F组的刺激指数(SI)值与IFN-γ水平均分别显著高于三个对照组(P<0.01);E、F组均分别显著高于D组(P<0.01);F组分别均高于E组(P<0.05)。结论:Tp0751真核质粒菌影具有良好的免疫原性,在小鼠体内诱生了有效的系统和黏膜的体液应答以及系统细胞免疫应答;异源加免较同源加免免疫效果更好。
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- 关键词：梅毒螺旋体核酸疫苗免疫原性
- 梅毒螺旋体粘附素Tp0751重组菌影的构建与鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的构建梅毒螺旋体(Tp)粘附素Tp0751的重组大肠埃希菌菌影(E.coli bacterial ghosts,EBG),为深入评价其在抗Tp感染中的潜在免疫保护作用奠定基础。方法将含有噬菌体Phi X174裂解基因E的质粒p HH43转化E.coli DH5α,42℃温控诱导使其形成EBG并计算裂解效率,用琼脂糖DNA电泳和透射电镜(TEM)鉴定EBG。构建含有裂解基因盒E-box、膜锚定序列E'-linker及Tp0751目的基因的原核双表达重组质粒p ET28a-E'-Tp0751-E-box,28℃诱导重组E.coli BL21表达Tp0751并用Western Blot鉴定;42℃诱导形成重组EBG(r EBG),计算裂解效率并用DNA电泳和TEM鉴定。结果构建的EBG裂解率为98.13%,DNA电泳未观察到DNA条带,TEM显示绝大部分细菌都裂解成缺乏胞浆成分的细胞空壳并保持活菌基本形态。r EBG在28℃时高效表达重组Tp0751蛋白,且仅与梅毒患者血清特异性结合;42℃下其r EBG裂解率为96.37%,电泳和TEM鉴定结果与EBG的相似。结论成功构建表达Tp粘附素Tp0751的r EGB,其所表达目的蛋白具有良好免疫反应性。
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- 关键词：梅毒螺旋体粘附素大肠埃希菌
- 螺旋体脂蛋白免疫调节机制研究进展被引量：1
- 2016年
- 梅毒、莱姆病和细螺旋体病是威胁人类健康的主要螺旋体病。然而,对此类疾病的免疫机制尚未充分阐明。螺旋体通过各种结构,例如脂多糖(LPS)、表面脂蛋白和糖脂与宿主相互作用。尽管螺旋体抗原如LPS和糖脂可能在其感染时有助于炎症反应,但梅毒螺旋体(Tp)和伯氏疏螺旋体(Bb)缺乏LPS。脂蛋白是表达于所有螺旋体的最丰富的蛋白,往往决定螺旋体与环境作用的方式。脂蛋白可促进炎症反应、调节固有免疫应答和适应性免疫应答,并有助于螺旋体粘附在宿主中或中肠上,或逃避免疫系统。然而,大多数螺旋体脂蛋白功能尚未明确。本文综述螺旋体脂蛋白在免疫逃逸和免疫激活方面的免疫调节作用,将有助于阐明螺旋体病的固有免疫致病机制,以及与螺旋体疾病疫苗发展和螺旋体病炎症反应有关的适应性免疫机制。
- 曹二龙张佳俐赵飞骏曾铁兵
- 关键词：螺旋体脂蛋白脂肽免疫调节
- 梅毒螺旋体多价膜表面蛋白菌影的构建及免疫原性研究
- 目的 构建梅毒螺旋体(Tp)多价膜表面蛋白Tp0751-TprC/DC-TprIc的原核及真核重组菌影(BG)，检测其免疫C57BL/6小鼠后诱导特异性体液免疫和细胞免疫应答的能力，为深入探讨其抗Tp感染的免疫保护作用奠...
- 张佳俐甄红娇郑康段武宁志辉赵飞骏余坚曾铁兵
- 关键词：梅毒螺旋体多价疫苗核酸疫苗
