孔欣 作品数:4 被引量:17 H指数:3 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科技厅重大专项 贵州省科技厅国际合作项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
激活星形胶质细胞α7乙酰胆碱能受体抑制β-淀粉样蛋白的聚集 被引量:6 2016年 目的研究在星形胶质细胞内加入尼古丁后能否激活细胞内α7尼古丁乙酰胆碱能受体(n AChR)以及激活的α7n AChR对β-淀粉样蛋白(Aβ)的降解作用。方法分离新生乳鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并纯化、传代,使用细胞免疫荧光法鉴定细胞的纯度。凝胶银染方法鉴定寡聚体聚集情况。试验分为正常对照组、激动剂组、拮抗剂组以及Aβ组激动剂+Aβ组、拮抗剂+Aβ组,用蛋白印迹法检测α7n AChR蛋白表达情况以及激活细胞内受体后对Aβ的降解作用。结果经过传代培养细胞得以纯化。体外制备好的Aβ1~42除了含少量的未聚集的单体(4 k D)外,主要以二聚体、三聚体、九聚体等不同聚集形式的寡聚体存在。尼古丁组与对照组相比α7n AChR表达明显升高(P〈0.01),尼古丁组与拮抗剂组相比α7n AChR表达升高(P〈0.05);收集的蛋白与上清液,尼古丁组与Aβ组相比Aβ的表达均明显降低(P〈0.01),激动剂+Aβ组与拮抗剂+Aβ组相比Aβ的表达均明显降低(P〈0.01)。结论尼古丁可以激活星形胶质细胞内的α7n AChR,激活的α7n AChR对Aβ具有明显的降解作用,能够为预防和治疗阿尔茨海默氏病(AD)提供一个可能的方向。 孔欣 禹文峰 官志忠关键词:尼古丁 星形胶质细胞 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 寡聚体 大鼠皮质星形胶质细胞尼古丁型乙酰胆碱受体的表达 被引量:3 2016年 该文研究了尼古丁型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,n ACh Rs)不同亚单位在大鼠大脑星形胶质细胞的表达情况。分离新生大鼠大脑皮质培养原代星形胶质细胞并纯化、传代鉴定后,运用RT-PCR方法、蛋白质印迹法检测正常大鼠大脑皮质星形胶质细胞n ACh Rs不同亚单位的表达情况。结果显示,α2、α3、α4、α7、β2等n ACh Rs亚单位在星形胶质细胞均有表达,而β3 n ACh Rs亚单位在星形胶质细胞没有表达,为深入研究星形胶质细胞的功能提供了可能。 孔欣 禹文峰 官志忠关键词:星形胶质细胞 神经保护 体外培养星形胶质细胞α7尼古丁型乙酰胆碱能受体调控β-淀粉样蛋白聚集的作用 目的:研究激活星形胶质细胞内的α7尼古丁乙酰胆碱能受体(nicotinic acetylcholine receptor, nAChR)后对调控β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide, Aβ)聚集的作用。 ... 孔欣关键词:阿尔茨海默氏病 体外培养 星形胶质细胞 Β-淀粉样蛋白 一种改进的Aβ_(1-42)寡聚体的制备与鉴定方法 被引量:8 2016年 目的:改进Aβ1-42寡聚体的制备与鉴定方式。方法:以化学合成多肽Aβ1-42为原料在体外制备Aβ1-42寡聚体,用Western blotting进行鉴定;加入不同浓度Aβ1-42寡聚体后,用CCK-8法测定体外原代培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞(AS)的存活率。结果:化学合成的Aβ1-42寡聚体分子量为4~188kD,以64kD最多,亦有少量4kD单体存在;CCK18法显示Aβ1-42寡聚体对AS有明显的神经毒性作用,并呈现剂量一效应关系。结论:成功建立了一种改进的制备和鉴定Aβ1-42寡聚体的方法,为深入研究阿尔茨海默病提供了研究手段。 禹文峰 孔欣 官志忠关键词:淀粉样蛋白 阿尔茨海默病 寡聚体 星形胶质细胞 免疫印迹法