郑波
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
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- 生殖细胞及体细胞相关标记蛋白在小鼠胚胎雌雄生殖嵴的表达差异研究
- 2015年
- 目的比较小鼠胚胎雌雄生殖嵴发育过程中的生殖细胞及体细胞相关标记蛋白的表达差异。方法运用免疫荧光技术分别在雌、雄小鼠12.5、13.5、14.5、18.5dpc(days postcoitum)及1dpp(days postpartum)的生殖嵴中标记DDX4(DEAD Asp-Glu-Ala-Asp box polypeptide 4)、OCT4(POU domain,class 5,transcription factor 1)、GATA4(Transcription factor GATA-4)、FOXL2(Forkhead box protein L2)、SOX9(Transcription factor SOX-9)、γ-H2AX(The phosphorylated form ofHistone H2AX)及磷酸化RB1(Retinoblastoma-associated protein)(P-RB1)。观察这些蛋白质在小鼠胚胎的不同时间点雌雄生殖嵴中的表达变化情况。结果 DDX4在早期胚胎各阶段雌、雄生殖嵴的生殖细胞呈现持续的表达;FOXL2和SOX9分别在早期胚胎雌、雄生殖嵴的体细胞持续表达;而其它标记蛋白(OCT4、GATA4、γ-H2AX和P-RB1)在早期胚胎不同阶段却呈现差异表达模式,OCT4在雄性生殖嵴的生殖细胞各个阶段均有表达,而在雌性生殖嵴14.5dpc已不表达;GATA4在雄性生殖嵴的体细胞各个阶段均有表达,但在雌性生殖嵴18.5dpc已不表达;γ-H2AX在雌性生殖嵴18.5dpc已不表达;P-RB1在雄性生殖嵴13.5dpc的生殖细胞开始不表达,而在雌性生殖嵴18.5dpc开始不表达。结论不同细胞组分功能蛋白的特异性表达模式对于早期胚胎生殖嵴的发育和分化起到重要作用。
- 沈聪郑波隋雪松霍然
- 关键词:生殖细胞体细胞免疫荧光
- 小鼠精原干细胞系自我更新和分化能力的体外观察被引量:3
- 2016年
- 目的 :体外观察小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的自我更新和分化能力。方法 :体外构建稳定的小鼠SSCs系,利用Ed U细胞增殖分析试剂盒检测小鼠SSCs体外自我更新的能力;利用活细胞工作站进一步观察小鼠精原干细胞体外增殖现象;运用TUNEL法检测SSCs凋亡现象;通过维甲酸(retinoic acid,RA)诱导小鼠SSCs,观察其体外分化的能力。结果:Ed U孵育小鼠SSCs 2 h后,流式检测细胞增殖率平均为40.75%;活细胞工作站下可见正在分裂的干细胞;TUNEL检测显示干细胞中凋亡信号很少;RA诱导后,标记SSCs分化的基因(C-kit、Scp3和Stra8)表达量明显升高(P<0.05)。结论:稳定构建的小鼠SSCs系与体内的SSCs类似,具有较强的自我更新以及细胞分化能力,为下一步开展精原细胞相关基因和蛋白功能研究提供了良好的技术平台。
- 薛江阳高亭亭邵彬彬郑皓宇郑波黄晓燕
- 关键词:精原干细胞自我更新分化