刘玉震
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
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- 虹膜色素颗粒培养的牛小梁细胞中转化生长因子β1和纤维连接蛋白表达的变化及其意义被引量：1
- 2017年
- 背景色素性青光眼和假性剥脱性青光眼均以色素颗粒沉积于房角为主要特征，虹膜色素颗粒的沉积除阻塞房角的房水引流通道外，对小梁网的吞噬功能也可造成不可逆性损害，从而导致细胞外基质重塑异常。青光眼患者房水和小梁网组织中转化生长因子-β（TGF-β）含量升高，尤以假性剥脱性青光眼患者更为明显，但TGF-β和纤维连接蛋白（FN）在虹膜色素颗粒培养的小梁细胞中的表达变化尚不清楚。目的探讨虹膜色素颗粒培养的牛小梁细胞中TGF-β1和FN的表达变化，为青光眼的发病机制研究提供实验依据。方法采用组织块培养法培养新鲜牛眼小梁细胞，根据细胞的形态对培养细胞进行鉴定。将第3代牛小梁细胞接种于6孔培养板并分为正常对照组和虹膜色素颗粒干预组，分别在培养基中加入100μl色素颗粒工作液（终浓度为1×10^7／m1）和100μl 0．01mol／L PBS，继续培养24h。采用荧光定量PCR法检测各组细胞内TGF-β1 mRNA和FN mRNA的相对表达量；采用竞争ELISA法检测各组细胞培养上清液中TGF-β1和FN蛋白的质量浓度。结果体外培养的细胞呈长梭形、多角形或树枝状，细胞中可见色素，细胞核圆且居中，符合牛小梁细胞的形态特征。荧光定量PCR法检测显示，虹膜色素颗粒干预组细胞中TGF-β1 mRNA相对表达量为2．98±0.27，明显高于正常对照组的1．00±0.00，FN mRNA相对表达量为0．36±0.10，明显低于正常对照组的1．000±0．000，差异均有统计学意义（t=12．68，P=0．00；t=10．60，P=0．00）。ELISA法检测显示，虹膜色素颗粒干预组细胞培养上清液中TGF-β1蛋白质量浓度为（156．60±9．74）ng／L，明显高于正常对照组的（65．46±14．24）ng／L，FN蛋白质量浓度为（59．29±15．79）mg／ml，低于正常对照组的（102．10±12．14）mg／ml，差异均有统计学意义（t=9．15，P=0．00；t=3．72，P
- 牛春焕王强孟杰刘玉震
- 关键词：纤维连接蛋白
- 康柏西普对兔准分子激光角膜切削术术后角膜上皮下雾状混浊的影响
- 目的 探讨康柏西普对兔角膜PRK术后角膜上皮下雾状混浊(haze)形成及术区TGF-β1、α-SMA及MMP-2表达的影响.方法 32只纯种新西兰大白兔双眼行PRK手术,术后随机分为A、B、C、D等4组,每组8只,术后A...
- 张磊刘蓓刘玉震
- 关键词：准分子激光角膜切削术角膜上皮下雾状混浊
- 2型糖尿病性视网膜病变PBMCs中miR-126表达的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨糖尿病性视网膜病变（DR）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中miR-126的水平变化及其临床意义。方法临床病例对照研究。对2014年12月到2015年3月在滨州医学院附属医院内分泌科及眼科住院的76例患者分为无糖尿病性视网膜病变组（NDR组）30例，非增殖期糖尿病性视网膜病变组（NPDR组）25例，增殖期糖尿病性视网膜病变组（PDR组）21例，及正常对照组（CON组）30名。收集患者的-般检查结果，用逆转录PCR（RT—PCR）检测PBMCs中miR-126的水平，及酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血浆中VEGF的水平。结果高密度脂蛋白（HDL）在PDR组明显高于NDR组和NPDR组，差异有统计学意义（P〈0．05）。PDR组的白细胞（WBC）数明显比其余三组高，差异有统计学意义（P〈0．05）。miR-126在NPDR组、PDR组明显低于CON组和NDR组，差异有统计学意义（P〈0．05）。与CON组相比，血浆中的VEGF在NDR组、NPDR组和PDR组中明显上调，差异有统计学意义（P〈0．05）。PBMCs中miR-126水平与FPG、VEGF差异有统计学意义（P〈0．05），（r=-0．67，P〈0．05，f=-0．74，P〈O．05）。结论PBMCs中miR-126参与到DR的发生及发展的过程，其水平变化与病程有关。
- 高祎刘玉震王丽君房炳华雷宁玉
- 关键词：2型糖尿病糖尿病性视网膜病变PBMCSMIR-126
- 萝卜硫素对双氧水诱导下的牛眼小梁细胞氧化应激损伤的保护作用
- 目的为了探讨萝卜硫素(sulforaphane,SFN)是否可以减弱H2O2诱导的牛眼小梁细胞的氧化应激损伤。方法采用不同浓度的H2O2干预牛眼小梁细胞,构建牛眼小梁细胞氧化应激损伤模型。造模前给予细胞萝卜硫素预处理6h...
- 刘玉震
- 关键词：小梁细胞氧化应激青光眼
- 文献传递
- 康柏西普对兔眼准分子激光角膜切削术术后角膜上皮下雾状混浊的影响被引量：6
- 2019年
- 目的探讨康柏西普(conbercept)对兔眼准分子激光角膜切削术术后角膜上皮下雾状混浊(haze)的影响。方法采用随机数字表法将64只纯种新西兰大白兔分为单纯手术组、生理盐水组、conbercept0.5mg组和conbercept1.0mg组,每组16只,均行右眼准分子激光角膜切削术(PRK),术后单纯手术组不做任何处理,其余3个组分别给予术眼结膜下注射生理盐水0.05ml、conbercept0.5mg(0.05ml)和conbercept1.0mg(0.10ml),另选取8只兔作为正常对照组。术后裂隙灯显微镜下观察角膜上皮愈合情况及haze程度并进行Fantes分级,各手术组术后1周和4周分别空气栓塞法处死8只,正常对照组处死4只,取其角膜组织行苏木精-伊红染色,并通过免疫组织化学法检测角膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果术后兔眼角膜上皮均于3~5d完全愈合,各组兔眼术后角膜上皮愈合时间比较,差异无统计学意义(F=0.37,P=0.77)。在观察期间,各手术组haze均于术后4周时最明显,conbercept1.0mg组haze最严重,其次为单纯手术组和生理盐水组,conbercept0.5mg组haze较其他手术组明显减轻,各组兔眼不同时间点haze分级比较,差异均有统计学意义(F组别=20.114,P=0.000;F时间=8.084,P=0.006)。苏木精-伊红染色示PRK术后1周,术区角膜上皮细胞增生,细胞排列紊乱、形态各异,浅基质层成纤维细胞数量增多,胶原纤维排列紊乱。角膜上皮及浅基质层的增生程度由强到弱依次为conbercept1.0mg组、单纯手术组和生理盐水组、conbercept0.5mg组。术后4周各手术组术区角膜组织结构较术前1周紊乱,各组增生程度次序同术前1周。免疫组织化学法检测显示,术后1周conbercept1.0mg组术区角膜组织中TGF-β1、α-SMA和MMP-2的表达最强,其次为单纯手术组和生理盐水组,conbercept0.5mg组次之,各手术组3种因子的表达较正常对照组明显增强,差异均有
- 刘蓓张磊刘玉震高洪莲隋文君
- 关键词：准分子激光角膜切削术角膜上皮下雾状混浊Α-平滑肌肌动蛋白基质金属蛋白酶-2
- 莱菔硫烷对体外培养牛眼小梁细胞硫氧还蛋白表达的影响及其机制被引量：1
- 2016年
- 背景 研究证实莱菔硫烷（SFN）可以激活多条通路,促进机体内抗氧化蛋白的表达.硫氧还蛋白（Trx）是维持细胞内氧化还原稳态的重要抗氧化蛋白之一. 目的 研究SFN对体外培养的牛眼小梁细胞内Trx表达的影响及其机制.方法体外培养牛眼小梁细胞并进行形态学观察,取第3代培养的牛眼小梁细胞,分别加入终浓度为0、10、20和30 μmol/L SFN培养30 min,应用实时荧光定量PCR技术检测细胞内Trx mRNA的表达.将细胞按照随机抽样的方法分为6个组,即空白对照组、LY294002组、U0126组、SFN组、LY294002＋ SFN组和U0126＋SFN组.采用Western blot法检测各组细胞中Nrf2蛋白和Trx蛋白的相对表达量.结果 体外成功培养牛眼小梁细胞.不同浓度SFN干预下,细胞Trx mRNA相对表达量总体比较差异有统计学意义（F=88.090,P＜0.01）.LY294002＋ SFN组、U0126＋SFN组和SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.LY294002＋ SFN组和U0126＋SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于SFN组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）. 结论 SFN可通过磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）通路活化Nrf2,促进小梁细胞Trx mRNA及其蛋白的合成,保护细胞抵抗氧化应激损伤.
- 苏静王强刘玉震
- 关键词：莱菔硫烷硫氧还蛋白磷脂酰肌醇-3激酶丝裂原活化蛋白激酶小梁细胞
- 莱菔硫烷对过氧化氢诱导牛眼小梁细胞氧化应激损伤的保护作用被引量：1
- 2016年
- 背景 研究表明小梁网组织的氧化应激损伤是开角型青光眼的基本病理过程之一,莱菔硫烷（SFN）可通过激活Nrf2/ARE通路发挥其抗氧化应激作用,但其是否可对氧化应激损伤的小梁细胞发挥作用目前尚不清楚. 目的 探讨SFN对H2O2诱导的牛眼小梁细胞氧化应激损伤的防护作用. 方法 采用组织块培养法对新鲜摘取的黑牛眼球小梁组织进行小梁细胞原代培养,将第3代牛小梁细胞以1x 103/孔的细胞密度接种于96孔板中培养24 h后将细胞分为4个组,空白对照组加入100μl无血清培养基,H2O2组细胞在空白对照组的基础上加入100 μl终浓度为100 μmol/L H2O2建立细胞氧化应激损伤模型,SFN组在培养液中加入100μl终浓度为10μmol/L SFN,而SFN＋H2O2组在SFN组的基础上加入100 μmol/L H2O2,细胞培养后6h采用CCK-8法检测各组牛眼小梁细胞活力,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.结果 传至第3代的细胞呈梭形,形状和大小较均一,细胞质丰富,可见色素颗粒,核仁大.H2O2组和SFN＋H2O2组相对细胞活力分别为空白对照组的（67.00±1.27）％和（80.00±6.25）％,其中SFN＋H2O2组相对细胞活力低于空白对照组和SFN组,但明显高于H2O2组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.空白对照组、H2O2组、SFN组和SFN＋H2O2组细胞凋亡率分别为（11.33±0.77）％、（32.31±1.03）％、（10.44±0.68）％和（17.68±0.21）％,各组间总体比较差异均有统计学意义（F-539.96,P＜0.01）,其中SFN＋H2O2组细胞凋亡率明显低于H2O2组但高于空白对照组和SFN组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 SFN可以增强H2O2诱导的牛眼小梁细胞的抗氧化应激能力,减轻氧化应激对牛眼小梁细胞的损伤.
- 刘玉震王强
- 关键词：莱菔硫烷
- ET-1、VEGF在新生血管性青光眼中相互作用的研究进展被引量：2
- 2018年
- 新生血管性青光眼（neovascular glaucoma,NVG）是一组以虹膜和房角新生血管为特征的难治性青光眼,这些新生的病变累及小梁网,造成虹膜与小梁网和角膜后壁粘连,并导致房角关闭、房水外流受阻,这是青光眼的一种特殊类型,以眼球剧痛、视力下降、难以控制的眼压增高等为主要特征。目前NVG的发病机制尚不清楚,但国内外对它的研究从未间断。随着分子生物学及免疫学的发展。
- 孟杰王强牛春焕刘玉震
- 关键词：青光眼内皮素小梁网
