杭航
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 罗格列酮预处理对凝血酶激活的小胶质细胞PPARγ、Nrf2及HO-1表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:采用凝血酶激活新生大鼠神经胶质细胞,观察罗格列酮预处理对小胶质细胞过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)及血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:用新生SD大鼠的脑组织,体外培养原代小胶质细胞14 d左右分离收集细胞,分为:正常对照组、凝血酶刺激组、罗格列酮干预组(罗格列酮+凝血酶组)和维甲酸干预组(维甲酸+凝血酶组)进行实验。分别采用免疫组化染色、real-time PCR和Western blot检测PPARγ、Nrf2和HO-1的表达并进行统计分析。结果:免疫组化染色显示,与对照组比较,刺激组、罗格列酮+凝血酶组及维甲酸+凝血酶组的PPARγ、Nrf2和HO-1染色细胞数均增多。Real-time PCR结果显示罗格列酮+凝血酶组PPARγ、Nrf2及HO-1的mRNA表达均显著高于刺激组、对照组及维甲酸+凝血酶组(P<0.01),维甲酸+凝血酶组Nrf2及HO-1的mRNA表达均较刺激组和罗格列酮+凝血酶组降低(P<0.01)。Western blot结果显示,罗格列酮+凝血酶组PPARγ、Nrf2及HO-1的蛋白表达也明显高于刺激组、对照组及维甲酸+凝血酶组(P<0.01),维甲酸+凝血酶组Nrf2及HO-1的蛋白表达均较刺激组和罗格列酮+凝血酶组降低(P<0.01)。结论:罗格列酮预处理后可增加凝血酶激活的小胶质细胞PPARγ、Nrf2及HO-1的表达,通过维甲酸预处理抑制Nrf2的表达后,其下游基因HO-1表达也受影响,说明PPARγ抗氧化作用可能是通过Nrf2调控下游基因实现的。
- 杭航王丽琨伍国锋陈星宇
- 关键词：小胶质细胞罗格列酮过氧化物酶体增殖物活化受体Γ核因子E2相关因子2血红素加氧酶-1
- 罗格列酮预处理对凝血酶激活的大鼠小胶质细胞过氧化酶活化增生受体叭依赖还原型辅酶／Ⅱ醌氧化还原酶1及Y-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的 采用凝血酶激活新生大鼠小胶质细胞，观察罗格列酮预处理对小胶质细胞过氧化酶活化增生受体y（PPARy）、依赖还原型辅酶／Ⅱ醌氧化还原酶1（NQ01）及y-谷氨酰半胱氨酸合成酶（v—GCS）表达的影响。方法用新生的SD大鼠的脑组织，体外培养原代小胶质细胞14d左右分离收集细胞，分为3组：正常对照组（对照组）、凝血酶刺激组（刺激组）、罗格列酮干预组（罗格列酮＋凝血酶组）进行实验。分别采用免疫组织化学染色、逆转录-聚合酶链反应（PCR）检测PPAR7、NQ01、-y—GCS的表达并进行统计分析。结果免疫组织化学染色显示，与对照组比较，刺激组、罗格列酮＋凝血酶组PPARy、NQO1、1-GCS染色细胞数及染色程度均增多，其中罗格列酮＋凝血酶组PPAR7、NQ01、1-GCS染色较对照组及刺激组明显增强；逆转录-PCR结果显示，刺激组PPARymRNA（119．19±44．58）、NQ01mRNA（101．73±32．19）及y-GCSmRNA（108．81±19．71）表达较对照组（0．34±0．21、0．73±0．46、0．30±0．13）显著升高，罗格列酮＋凝血酶组PPARymRNA（211．88±58．75）、NQ01mRNA（182．67±62．09）及y-GCSmRNA（188．17±57．06）表达均显著高于刺激组和对照组（F：181．50、286．63、614．43，均P〈0．01）。结论中剂量罗格列酮预处理后可增加凝血酶激活的小胶质细胞PPARy／、NQ01及y-GCS的表达；罗格列酮可通过激活PPARy来增加其下游抗氧化基因的表达，发挥其抗氧化作用。
- 杭航王丽琨伍国锋陈星宇
- 罗格列酮对凝血酶激活的小胶质细胞PPARγ表达的影响及其抗氧化应激机制
- 目的： 体外原代培养新生大鼠脑小胶质细胞，采用凝血酶激活，观察罗格列酮预处理对小胶质细胞PPARγ、Nrf2、HO-1、NQO1、γ-GCS表达的影响，探讨罗格列酮预处理对凝血酶激活小胶质细胞抗氧化的反应机制。 方法...
- 杭航
- 关键词：小胶质细胞罗格列酮凝血酶
- 乳鼠脑小胶质细胞原代培养与鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的:探索乳鼠小胶质细胞的原代培养和鉴定方法。方法:取新生SD乳鼠脑组织捣碎、消化及共培养,用振摇法分离纯化小胶质细胞并继续培养;在相差显微镜下观察共培养第3、9及14天时细胞形态,计数纯化培养后小胶质细胞数及存活率,采用免疫细胞化学染色方法在共聚焦显微镜下计数纯化培养后小胶质细胞特异性OX-42抗体表达阳性的细胞数及存活率,同时观察小胶质细胞活化形态;观察纯化培养12、24、48及72 h后小胶质细胞的静止型细胞数和静止率。结果:振摇法共培养第14天时可见胞体折光不均的星形胶质细胞最多,分离时可获得1.2×106个/瓶(75 cm2,250 m L)小胶质细胞,免疫细胞化学染色显示小胶质细胞特异性OX-42表达阳性细胞达95%,存活率>95%;在显微镜下小胶质细胞形态以阿米巴样、长梭形及马鞍形为主;纯化培养72 h后小胶质细胞的静止型细胞数和静止率最高。结论:振摇法分离小胶质细胞纯化培养72 h,可获得最高的静止型小胶质细胞数和静止率。
- 杭航伍国锋王丽琨周海燕
- 关键词：小胶质细胞纯化
