房立春
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- CIAV和REV荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用
- 为了快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中CIAV和REV的污染,根据CIAV和REV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件分别建立了快速检测CIAV、REV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立C...
- 任志浩栾怀彪房立春王一新李阳吕艳艳崔治中常爽赵鹏
- 关键词：鸡传染性贫血病毒禽网状内皮组织增生病病毒弱毒疫苗污染
- 弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒低剂量污染对SPF鸡体重和疫苗免疫抗体的影响被引量：5
- 2016年
- 为了观察使用污染有低剂量鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)弱毒疫苗后对鸡免疫和体重的影响,本研究通过人工模拟试验观察了CIAV低剂量污染对SPF鸡体重以及对NDV疫苗抗体产生的影响。结果显示使用每羽份污染10个EID50CIAV和5个EID50CIAV两种剂量的NDV疫苗后均造成了SPF鸡体重的下降,与使用未污染疫苗组相比差异显著;并且使用污染两种剂量CIAV的疫苗后NDV抗体水平与使用无污染组相比也降低了,差异显著。使用污染两种剂量CIAV的NDV疫苗后第2周开始均检测到一定比例的CIAV抗体阳性,而通过核酸检测在使用污染疫苗后第1周就检测到很高比例的CIAV核酸阳性。研究结果不仅展示了弱毒疫苗中CIAV污染对SPF鸡生产性能和免疫机能的影响,也提示我们在通过SPF鸡检查法检测外源病毒污染时增加对病毒核酸检测有助于节省检测时间和提高检出率。
- 房立春李晓晗任志浩李阳王一新崔治中常爽赵鹏
- 关键词：鸡传染性贫血病毒弱毒疫苗
- 弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒低剂量污染对SPF鸡体重和疫苗免疫抗体的影响
- 为了观察使用污染有低剂量鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)弱毒疫苗后对鸡免疫和体重的影响,本研究通过人工模拟试验观察了CIAV低剂量污染对SPF鸡体重以及对NDV...
- 房立春李晓晗任志浩李阳王一新崔治中常爽赵鹏
- 关键词：鸡传染性贫血病毒弱毒疫苗
- 新城疫疫苗中禽腺病毒的分离鉴定及其hexon基因的序列分析
- 近两年来,我国部分地区出现了由鸡腺病毒引起的心包积液综合症,鉴于此前曾怀疑禽弱毒疫苗中污染腺病毒引起的感染,本研究对不同疫苗中腺病毒污染进行了检测.用PCR的方法对32批弱毒活疫苗进行检测是否含有FAdV的污染.结果显示...
- 付佳媛李阳崔帅房立春崔治中常爽赵鹏
- 关键词：禽腺病毒新城疫病毒弱毒活疫苗污染
- 鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用被引量：14
- 2016年
- 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·μL^(-1),比常规PCR灵敏度高100倍。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克病病毒等病毒基因均无交叉反应,具有很好的特异性;批内重复和批间重复显示变异系数均小于2%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,该方法能够检测到1 000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的39种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于检测疫苗中CIAV低剂量的污染。
- 任志浩房立春栾怀彪李阳王一新崔治中常爽赵鹏
- 关键词：鸡传染性贫血病毒实时荧光定量PCR弱毒疫苗污染
- 卵黄抗体检测评估SPF鸡对鸡传染性贫血病病毒的感染状态研究被引量：2
- 2016年
- 鸡传染性贫血病病毒（CIAV）是禽弱毒疫苗中常见外源病毒之一,选择未被CIAV污染的SPF鸡胚是生产合格疫苗的关键环节,疫苗生产企业通常通过检测SPF鸡血清中CIAV的抗体来评估CIAV感染状况,本研究以取样更为方便的卵黄抗体检测来评估SPF鸡群中CIAV感染状态。将40只SPF鸡于19周龄时人工接种CIAV,同时30只SPF鸡饲养于另一隔离环境内作为空白对照。23周龄时每只鸡分别采集种蛋和血清并一一对应,然后将卵黄分别进行1∶10、1∶20、1∶30稀释后与血清同时检测CIAV抗体,结果发现卵黄抗体1∶20倍稀释后判定结果与血清抗体吻合率最高。对70只SPF鸡从25~34周龄进行连续10周观察,结果显示卵黄抗体检测结果与血清抗体检测结果吻合率达91.57%。建议疫苗生产企业可通过抽检卵黄抗体来判断SPF鸡群的CIAV洁净度。
- 李阳房立春王一新崔治中常爽赵鹏
- 关键词：SPF鸡鸡传染性贫血病病毒血清抗体卵黄抗体
- 禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病病毒nested-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 疫苗中污染鸡传染性贫血病毒(CIAV)是造成CIAV感染的途径之一,而通常疫苗中CIAV污染剂量较低,应用一般的技术难以检测到。为了更灵敏地检测禽弱毒疫苗中CIAV的污染,根据Gen Bank已发表的CIAV基因序列,针对其保守区设计了外用引物和内用引物,通过优化反应体系和反应条件建立了检测CIAV的nested-PCR检测方法。结果显示,所建立的检测方法灵敏度比常规PCR高100倍,该方法可以检测到1 000羽份弱毒疫苗中1 EID_(50)的低剂量CIAV污染,应用该方法从送检的50个疫苗样品中检测出4个样品为CIAV阳性。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克氏病病毒等的基因均无交叉反应,具有很好的特异性。提示所建立的nested-PCR灵敏度高、特异性强,可用于检测禽弱毒疫苗中CIAV低剂量的污染。
- 李晓晗房立春李阳崔治中常爽赵鹏
- 关键词：CIAV灵敏性
- 鸡传染性贫血病毒SYBR Green Ⅰ法荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用被引量：5
- 2017年
- 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达6.36 copies/μL,是常规PCR灵敏度的1000倍。该方法与禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、禽白血病病毒(Avian leukemia virus,ALV)、鸡马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)等均无交叉反应,特异性良好;批内和批间重复试验显示变异系数均小于2.5%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,建立的SYBR Green I荧光定量PCR能够检测到1000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的14种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性,阳性样品按照经典的SPF鸡检查法进行检测也为CIAV阳性。因此,本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,适合用于疫苗中CIAV污染的检验。
- 付佳媛李丹常臻李阳房立春崔治中常爽赵鹏
- 关键词：鸡传染性贫血病毒弱毒疫苗污染SYBR
- 中国三种不同地方品系鸡对J亚群禽白血病病毒NX0101株易感性的比较被引量：7
- 2017年
- 为了研究不同中国地方品系鸡对J亚群禽白血病病毒(subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)的易感性和抵抗力,将ALV-J中国分离株NX0101分别通过鸡胚静脉和卵黄囊两种接种方式接种莱芜黑鸡、汶上芦花鸡、济宁百日鸡3种不同地方品系鸡,分析比较NX0101株对3种品系鸡的致病性。结果表明,NX0101株均可诱发3种品系鸡的髓样细胞瘤,并引起生长迟缓和免疫抑制等亚临床症状,但致病性的强度差异具有显著统计学意义。在两种不同接种方式下,莱芜黑鸡的死亡率和肿瘤发生率均明显低于另外两个品系,并且感染莱芜黑鸡的体重受抑制程度最低。济宁百日鸡对NX0101株的抵抗力在这3种品系鸡中最弱。因此,莱芜黑鸡可以作为ALV-J遗传抗性基因筛选和抗病育种的候选品系。
- 栾怀彪王一新许书珍房立春崔治中常爽赵鹏
- 关键词：易感性遗传抗性
