王芬
- 作品数：7 被引量：37H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细粒棘球绦虫棘球蚴的水通道蛋白基因研究
- 目的： 1、对细粒棘球绦虫水通道蛋白（EgAQPs）的序列和结构特性进行生物信息学分析，为研究其生物学功能提供基础。 2、筛选以RT-qPCR方法检测棘球蚴EgAQPs基因转录表达状态的内参基因，并检测 EgAQPs...
- 王芬
- 关键词：细粒棘球绦虫棘球蚴水通道蛋白内参基因
- 干扰PGI调控HIF-1α的表达以及促进乳腺癌细胞凋亡被引量：3
- 2017年
- 本实验探究乳腺癌MCF-7细胞中干扰PGI的表达对HIF-1α的调控以及对细胞凋亡的影响。首先,使用慢病毒质粒转染构建干扰PGI(PGI-si RNA)的稳转细胞株,然后使用Hoechst33258染色和流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡,随后,采用RT-PCR检测PGI、HIF-1α和LDHA基因的表达,Western blotting检测Bcl-2、Bax、PGI、LDHA、HIF-1α和ERK蛋白的表达。成功构建PGI-si RNA的MCF-7稳转细胞株后,Hoechst33258染色实验结果显示,PGI-si RNA稳转细胞株中出现核固缩、染色质凝集等形态学改变,FCM结果亦表明PGI-si RNA稳转细胞株发生细胞凋亡。RT-PCR结果显示,PGI-si RNA稳转细胞株中PGI、LDHA和HIF-1α基因表达下调;Western blotting结果显示,PGI-si RNA稳转细胞株中LDHA、HIF-1α、ERK和Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调。以上实验结果表明:在乳腺癌MCF-7细胞中,干扰PGI可抑制HIF-1α的表达,同时促进MCF-7细胞凋亡。
- 王芬陈地龙陈益李海星熊伟石雪萍吕晓婷李静
- 关键词：PGIHIF-1ΑMCF-7细胞细胞凋亡
- PGI通过HIF-1α影响乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡的机制研究
- 背景目的： 近年来，我国乳腺癌的发病率和死亡率均呈持续上升趋势，其中雌激素依赖型乳腺癌发病率约占50%～70%。内分泌治疗对雌激素依赖型乳腺癌具有良好疗效，但其治疗后期转移率高，导致治疗效果不佳。 作为肿瘤细胞有氧糖...
- 王芬
- 关键词：乳腺癌缺氧诱导因子MCF-7细胞
- 文献传递
- 吴茱萸碱抑制荷瘤小鼠结肠癌HCT-116细胞增殖被引量：2
- 2017年
- 目的研究吴茱萸碱(Evo)对人结肠癌荷瘤Balb/c裸鼠HCT-116细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法用HCT-116细胞接种到4周龄的Balb/c裸小鼠右下腋部,待荷瘤直径约0.5 cm后用灌胃针灌入Evo(3 mg/kg)进行治疗,每3 d测瘤体直径及小鼠质量,绘制质量曲线及瘤体体积曲线,灌喂22 d后处死,取瘤体组织;HE染色法验证Balb/c裸鼠瘤体的成瘤情况;免疫组化检测瘤体HDAC3、NF-κB、p53的表达;Westernblot检测瘤体组蛋白去乙酰化酶HDAC3、NF-κB、p53的变化。结果 Evo灌喂组小鼠的瘤体体积和瘤体质量明显小于对照组,质量较对照组重;Evo灌喂组肿瘤细胞皱缩,胞核深染,较对照组核分裂像明显减少;经吴茱萸碱处理的裸鼠的瘤体中NF-κB、p53表达量较对照组增高,HDAC3则反之(P<0.05)。结论吴茱萸碱可以通过下调HDAC3来影响NF-κB及p53蛋白的表达,抑制人结肠细胞系HCT-116的体内增殖。
- 石雪萍李晓朋熊伟李海星郭珮王芬陈地龙李静
- 关键词：吴茱萸碱BALB/C裸鼠
- 鼠细粒棘球蚴囊壁消化残片的生发细胞培养试验被引量：1
- 2018年
- 目的建立高效、经济的细粒棘球蚴生发细胞原代培养方法。方法采用0.25%胰蛋白酶鄄EDTA溶液消化鼠细粒棘球蚴囊壁10～30 min,以消化后的棘球蚴囊壁残片进行组织贴壁培养原代生发细胞,以单纯组织贴壁培养法作为对照。用倒置显微镜观察生发细胞形态学动态变化,绘制生长曲线。免疫荧光试验鉴定获得的生发细胞。取残片培养的生发细胞进行小鼠腹腔返种, 4个月后剖检小鼠,观察小鼠感染情况;取病变组织制石蜡切片、 HE染色后,镜下观察棘球蚴囊壁生长情况。结果 0.25%胰蛋白酶鄄EDTA溶液消化10 min囊壁残片中的生发细胞的完整性好,胞浆丰富, 2～4 d后囊壁残片边缘游离出生发细胞,生发细胞培养9 d后呈现集落样生长状态。0.25%胰蛋白酶鄄EDTA溶液消化20 min、 30 min的囊壁残片中的生发细胞破碎并出现裸核。采用0.25%胰蛋白酶鄄EDTA溶液消化10 min的残片培养法培养生发细胞的成功率(6/10)高于单纯组织贴壁法(3/10);两种方法生长曲线均近似"S"形,残片培养法周期较短(18 d),残片培养法培养的生发细胞生长增殖水平高于单纯贴壁培养法(P <0.01)。免疫荧光结果显示,残片培养法培养18 d的生发细胞可被感染棘球蚴的人阳性血清中的抗棘球蚴抗体识别。残片培养法培养的生发细胞返种结果显示,小鼠腹腔有新生的棘球蚴囊状结构出现。HE染色结果显示,镜下可观察到发育中的棘球蚴囊壁角质层和生发层。结论建立的0.25%胰蛋白酶鄄EDTA溶液消化10 min的鼠源棘球蚴囊壁残片贴壁培养法可培养出活性正常的生发细胞,并能感染小鼠。
- 李锴吴宏烨范俊杰王芬刘许诺张静张静
- 关键词：细粒棘球蚴残片细胞培养
- 吴茱萸碱抑制HDAC6促进人白血病K562细胞周期阻滞和凋亡的机制研究被引量：14
- 2016年
- 目的探讨吴茱萸碱通过抑制组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）促进人白血病K562细胞周期阻滞以及凋亡的机制。方法采用CCK-8法检测吴茱萸碱对K562细胞增殖的影响;流式细胞术检测K562细胞周期和凋亡;化学比色法检测K562细胞HDAC6活性;Western blotting法检测K562细胞中HDAC6、Cyclin D1、CDK4、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、ERK、p-ERK、p38和p-p38蛋白的表达。结果 CCK-8法结果提示,吴茱萸碱在一定浓度范围内（1~16μmol/L）可以有效抑制K562细胞增殖,并呈时间和浓度依赖性;流式细胞术结果显示,吴茱萸碱可将K562的细胞周期阻滞于G0/G1期;2、4、8μmol/L吴茱萸碱诱导K562细胞48 h后,其凋亡率分别为（11.47±1.05）%、（12.77±0.79）%和（18.58±1.37）%,与对照组（2.79±1.01）%相比差异显著（P〈0.01）;化学比色法结果显示,吴茱萸碱能有效抑制HDAC6的活性;Western blotting结果显示,吴茱萸碱能上调Bax、Cleaved Caspase-3、p38和p-p38蛋白的表达,下调CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、HDAC6、ERK和p-ERK蛋白的表达。结论吴茱萸碱可能是通过抑制HDAC6的活性,激活MAPK信号通路,进而上调促凋亡蛋白的表达,下调周期蛋白的表达,从而抑制K562细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞和凋亡。
- 袁龙陈益刘泽洪王芬李科琼李静陈地龙
- 关键词：吴茱萸碱白血病细胞周期
- 人参皂苷Rh_2促进K562细胞自噬凋亡的体内实验研究被引量：15
- 2016年
- 该实验为研究人参皂苷Rh_2对人白血病细胞体内抑制作用,并从自噬凋亡角度来探讨其机制。采用人白血病K562细胞异体移植瘤模型,灌胃人参皂苷Rh_2后,测取肿瘤直径、体积、抑瘤率,观察人参皂苷Rh_2的抗肿瘤活性;化学发光法检测瘤组织HDAC和HAT活性;Western blotting法检测HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6的表达;Real-time PCR法检测自噬重要基因和HDAC6,Hsp90的mRNA表达水平;HE染色观察细胞凋亡,免疫组化法检测HDAC6,Hsp90和激活型的caspase 3蛋白表达水平。结果显示,人参皂苷Rh_2能抑制K562细胞异体移植瘤的生长,抑制率达53.10%;人参皂苷Rh_2能明显降低HDAC活性和降低HDAC1,HDAC2,HDAC6表达;人参皂苷Rh_2能抑制HDAC6和Hsp90表达,并增加自噬重要基因beclin-1,LC3A和LC3B表达;组织病理学结果显示人参皂苷Rh_2可明显增加肿瘤细胞凋亡。人参皂苷Rh_2具有较好的体内抗肿瘤作用,可能通过HDAC6,Hsp90通路调节自噬凋亡,抑制肿瘤细胞在体内增殖。
- 刘泽洪陈地龙姜蓉陈益熊伟王芬石雪萍李海星李静
- 关键词：人参皂苷RH2HDAC自噬
