刘延明
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：聊城大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 无外源基因整合人体诱导多能干细胞的产生及其分化为多巴胺神经元的研究
- 方法将Episomal plasmids 通过电转方式转入人体皮肤成纤维细胞,利用免疫荧光分析、RT-PCR 等技术对iPS 细胞进行鉴定,在Matrigel 基质进行iPS 细胞培养.依据国内外最新的研究进展,比较分析...
- 芦现杰王伟陈超段婧王琰宋娜刘延明
- 关键词：多巴胺神经元神经分化
- 应用小动物活体成像追踪观察EGFP标记的间充质干细胞被引量：5
- 2016年
- 为探讨干细胞移植治疗过程中干细胞在体内的存活和迁移能力,利用非细胞损伤性的EGFP(enhanced green fl uorescence protein)标记间充质干细胞进行了实验研究。该研究用电穿孔方法将加强的绿色荧光蛋白表达质粒p CMV-EGFP(cytomegalovirus-EGFP plasmid)转染细胞产生具有EGFP标记的牙髓干细胞、皮肤成纤维细胞(skin fi broblast cells,SFCs)和脐带间充质干细胞。将EGFP标记的脐带间充质干细胞注射到裸鼠皮下,用小动物活体成像系统观察了EGFP标记细胞在体内移植后细胞存活能力和荧光强度随时间的变化情况。结果表明,电穿孔转染能够在体外产生高效表达EGFP的标记细胞,EGFP在牙髓干细胞、SFCs和脐带间充质干细胞中的表达率分别为80%、85%和80%。通过小动物活体成像系统检测表明,EGFP标记的脐带间充质干细胞注射到裸鼠皮下后EGFP荧光表达在7 d后逐渐下降,但免疫组化分析表明,移植细胞可存活6个月以上。该研究提示,EGFP标记的干细胞可用于体内追踪其存活、迁移及分化,为探讨干细胞移植治疗作用提供了实验证据。
- 王伟陈超刘延明张男吕丽燕宋现让韩发彬
- 关键词：牙髓干细胞皮肤成纤维细胞脐带间充质干细胞
- 人体皮肤成纤维细胞的快速分离及多向分化能力鉴定被引量：9
- 2019年
- 目的 建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、 成软骨和成神经的多向分化潜能。方法 利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形 态学观察、流式分析、Vimentin 蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲线、核型分析、线粒体 染色分析不同传代细胞的增殖速度,线粒体及染色体形态的改变;最后进行成纤维细胞成脂、成 骨、成软骨和成神经的诱导分化实验,鉴定其多向分化潜能。两代细胞增殖速度及线料体相对 量的比较采用 t 检验统计分析。结 果 分离的皮肤成纤维细胞呈典型梭状及多角形;高表达细 胞表面标记物 CD90(NCF1,NCF2占比分别为 99.9,98.7)和 CD73(NCF1,NCF2占比分 别为98.2,85.6),但极少表达造血干细胞标记物 CD34(NCF1,NCF2占比分别为 1.8,2.6);细胞 Vimentin 蛋白表达呈阳性,阳性率为100;对细胞生长曲线进行分析,表明分离 后不同代次细胞增殖差异无统计学意义(t=1.586,P =0.1567);线粒体相对含量统计分析,同一株细胞系第5代(相对荧光强度值: 6876±577.8)与第 10 代(相对荧光强度值:7371±471.9)之 间的差异无统计学意义(t = 0.664,P = 0.543);核型分析分别显示传代后保持染色体数目为正常 46 条且形态无明显异常;经诱导后成纤维细胞可向成脂、成骨、成软骨和类神经分化。结论 利 用组织块培养法分离出的人体皮肤成纤维细胞状态稳定,增殖能力强,具有成脂、成骨、成软骨 和成神经多向分化诱导潜能,为细胞移植修复骨损伤、软骨损伤和神经损伤性疾病的临床研究 提供细胞来源及实验依据。
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- 关键词：皮肤成纤维细胞组织块培养法多向分化
